秦皮配方颗粒UPLC指纹图谱研究

目的:建立秦皮配方颗粒的超高效液相(UPLC)指纹图谱,为秦皮配方颗粒的鉴别及其质量控制提供实验依据。方法:采用UPLC法,以Zorbzx Eclipse XDB C18(2.1 mm×100 mm,1.8μm)为色谱柱;甲醇-0.4%醋酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速0.3 m L·min-1;检测波长为245 nm;柱温25℃。结果:建立了秦皮配方颗粒的UPLC指纹图谱,以秦皮甲素为参照,确定了15个共有峰为特征峰,并指认出1号峰为秦皮甲素、2号峰为秦皮乙素、3号峰为秦皮苷、4号峰为秦皮素,对照指纹图谱色谱峰丰富,相似性好。结论:该方法稳定、可靠,可用于秦皮配方颗粒的快速鉴别、质量评价与控制。     

布渣叶总黄酮中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷在家兔体内的药动学

目的：建立了家兔灌胃布渣叶总黄酮提取物后血浆中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的HPLC/MS方法,并研究其药动学。方法：家兔灌胃给于布渣叶总黄酮提取物后于不同时间点取血,采用HPLC/MS测定兔血浆中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的血药浓度,并计算药动学参数。色谱柱：Hypersil Gold C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-1%乙酸水溶液（V/V）,梯度洗脱,柱温20℃,质谱检测采用ESI离子源,同时测定血浆样品中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的浓度,采用非房室模型估算药动学参数。结果：牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷均在0.2~20 mg·L^-1内线性关系良好（r>0.999）,提取回收率、精密度和稳定性均良好。家兔口服布渣叶总黄酮提取物后牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的主要药动学参数如下：AUC_0-t分别是10.13,8.92,15.12 mg·L^-1·h,C_max分别是3.04,2.62,3.51 mg·L^-1,t_max分别是0.75,0.75,1.00 h,t_1/2分别是2.96,3.20,3.93 h,MRT_0-∞分别是5.01,5.58,6.33 h。结论：该方法可特异、准确、灵敏地同时测定家兔血浆中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的血药浓度,家兔口服布渣叶总黄酮提取物后牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷可迅速吸收入体内,其药时曲线存在双峰现象。     

多巴对映异构体的柱前衍生化HPLC法手性拆分

目的：建立多巴对映异构体的柱前衍生化拆分分析方法。方法：采用柱前衍生化反相高效液相色谱法,以氯甲酸乙酯为酰化剂,L-丙氨酸-β-萘胺（L-Ala-β-NA）为柱前衍生化试剂,在室温反应20 min 后,依利特 Hypersil ODS2（4.6 mm ×250 mm,5μm）为色谱柱;乙腈-0.05%三氟乙酸为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL·min-1;柱温为25℃;检测波长为280 nm。结果：多巴对映体衍生物获得了基线分离,并确认了R（-）-和S（+）-两个衍生物的色谱峰。结论：该方法经济可行,操作较简便,为多巴的药理学研究和光学异构体纯度测定提供了参考。     

何首乌配方颗粒的UPLC指纹图谱及化学成分归属

目的:建立何首乌配方颗粒的UPLC指纹图谱,并对其主要的共有峰进行成分归属,为配方颗粒的快速质量评价提供方法。方法:采用超高效液相色谱法,以Agilent Eclipse Plus C_(18) RRHD(2.1 mm×100 mm,1.8μm)为色谱柱,流动相乙腈-水梯度洗脱,检测波长254 nm,流速0.4 m L·min~(-1),柱温30℃,同时采用飞行时间质谱法对指纹图谱中的主要化学成分进行归属。结果:建立了何首乌配方颗粒的UPLC指纹图谱,确定了12个共有峰,并对其中5个共有峰进行了指认,各何首乌配方颗粒样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度均0.9。结论:该方法简单、准确、快速、重复性好,能有效地对何首乌配方颗粒的质量进行快速评价。     

参柏洗剂的制备工艺

目的:优选参柏洗剂的制备工艺,为该制剂的工业化生产提供参考。方法:采用水蒸气蒸馏法提取松叶、荆芥中挥发油,通过单因素试验优选提取工艺。以总生物碱质量浓度和固形物总量的综合评分为指标,通过正交试验考察加水量、提取时间、提取次数对参柏洗剂水提工艺的影响,并通过单因素试验筛选浓缩工艺及成型工艺。结果:最佳制备工艺条件为加14倍量水提取5 h,收集含挥发油蒸馏液,加0.1%聚山梨酯80增溶;药渣与其余4味药材加8倍量水煎煮3次,每次1 h,常压或减压浓缩,加入0.3%苯甲酸钠防腐,冷藏48 h除杂。总生物碱质量浓度不低于195 mg·L-1,保留率不低于85%。结论:该工艺稳定可行,可为参柏洗剂的规范化生产提供实验依据。     

三黄益肾方的纯化工艺研究

目的:研究三黄益肾方的纯化工艺。方法:以纯化后澄清液中总多糖、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷保留率和除杂率为指标,分别考察水提醇沉法(50%、60%、70%乙醇)和澄清剂法(101果汁澄清剂、ZTC天然澄清剂、壳聚糖澄清剂)的纯化效果,以筛选三黄益肾方纯化方法;设计正交试验对最优纯化方法的工艺参数(药液质量浓度、澄清剂用量和药液pH)进行优化,并进行验证试验。结果:纯化方法中以壳聚糖为澄清剂时纯化效果较优,综合评分为98.62;优化后工艺参数为药液质量浓度1 g/m L、1%壳聚糖溶液用量2 m L/g、pH 5.1;验证试验中总多糖、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷保留率和除杂率平均值分别为79.56%、78.11%、79.46%、32.18%(RSD分别为1.24%、0.97%、1.03%、1.16%,n=3)。结论:采用壳聚糖为澄清剂对三黄益肾方纯化效果较好,且操作简单,优化后工艺稳定、可行。     

复方芪麻胶囊对高血压患者降压效应的Meta分析

目的:系统评价中药新药复方芪麻胶囊(QM)对原发性高血压(EH)的降压效应,为QM新药临床试验提供依据。方法:2018年7月31日前从CNKI、万方和维普数据库中检索出符合标准的全文文献:QM干预EH患者血压或24h动脉血压的随机对照(RCT)研究。在评价文献质量基础上提取数据,由RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果:24篇中收治1963例(治疗组vs对照组:1047例vs 916例),其中16篇(735例vs 626例)、22篇(955例vs 872例)、4篇(168例vs 167例)分别观察降压临床疗效、血压和24h动态血压;与对照组比较,治疗组SBP、24hSBP、dSBP、dDBP、nSBP均有显著性降低(P0.01),而DBP和24hDBP、nDBP均无显著性差异(P0.05),降压疗效有显著性改善(P0.01)。结论:QM单独或合用降压西药主要降低SBP、辅助性降低DBP,从而改善降压效果。     

鼻舒通窍合剂制备工艺的优化

目的优化鼻舒通窍合剂制备工艺。方法以固形物总质量、黄芪甲苷及毛蕊异黄酮葡萄糖苷含有量为评价指标,加水量、提取时间、提取次数为影响因素,正交试验优化水提工艺。以黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含有量和保留率为评价指标,考察常压和减压对浓缩工艺的影响。再研究增溶剂(聚山梨酯80)、矫味剂(蔗糖)、抑菌剂(苯甲酸钠)用量对成型工艺的影响。结果最佳水提条件为加水量10倍,提取时间1 h,提取次数2次,综合评分91.67;常压浓缩下,黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含有量和保留率高于减压浓缩;聚山梨酯80、蔗糖、苯甲酸钠用量分别为1.43%、15%、0.3%时,成型工艺最优。结论该方法稳定可行,可用于制备鼻舒通窍合剂。     

复方芪麻胶囊UPLC指纹图谱建立和同时测定8种成分研究

目的建立复方芪麻胶囊(CQC)的UPLC指纹图谱,并同时测定指标成分天麻素、5-羟甲基糠醛(5-HF)、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(CG)、野漆树苷、柚皮苷、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷(FG)、毛蕊异黄酮、芒柄花素的量,为评价CQC质量提供依据。方法分析采用Agilent Eclipse C18柱(100 mm×4.6 mm,3.5μm),以乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱,体积流量0.3 m L/min,柱温25℃,检测波长为265 nm。结果得到分离度和重现性良好的CQC UPLC指纹图谱,相似度在0.98以上,标示出22个共有峰;8种成分中天麻素在5.976~29.880μg/m L、5-HF在10.596~52.980μg/m L、CG在2.697~13.485μg/m L、野漆树苷在2.262~11.309μg/m L、柚皮苷在40.768~203.840μg/m L、FG在5.825~29.126μg/m L、毛蕊异黄酮在0.372~1.858μg/m L、芒柄花素在1.888~9.440μg/m L线性关系良好,r均0.999 9,加样回收率分别为1.04%、1.30%、1.81%、1.41%、1.29%、1.01%、1.48%、1.29%。10批样品中天麻素量在2.883~3.491 mg/g,5-HF量在1.710~3.791 mg/g,CG量在0.107~0.286 mg/g,野漆树苷量在0.157~0.346 mg/g,柚皮苷量在8.853~10.726 mg/g,FG量在0.282~0.692 mg/g,毛蕊异黄酮量在0.097~0.135 mg/g,芒柄花素量在0.041~0.063 mg/g。结论同时对CQC UPLC指纹图谱和8个指标成分进行分析,方法快速、简便、准确,可以作为有效评价该制剂质量的方法。     

补肾活血方含药血清对退变型人原代软骨细胞microRNA表达谱的影响

目的:探究补肾活血方含药血清对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)刺激的人原代软骨细胞microRNA芯片表达的影响。方法:采用免疫组化和甲苯胺蓝染色鉴定了原代培养的人软骨细胞,然后采用IL-1β(10 ng/m L)刺激人原代软骨细胞,并且加入补肾活血方含药血清处理24 h。抽提细胞RNA采取反转录荧光标记microRNA,标记完成之后取样品与microRNA表达谱芯片进行杂交,并用激光扫描仪检测其杂交信号,再用相应软件分析所得数据。结果:与对照组比较,补肾活血方含药血清导致9个已知的microRNA表达呈明显上升(诱导倍数 2)以及4个已知的microRNA表达明显下降(抑制倍数 2)。RT-qPCR结果表明补肾活血方含药血清对miR-140-5p的表达具有明显诱导作用。结论:补肾活血方可能通过调节miR-140-5p靶向ADAMTS-5和MMP-13等基因在维持软骨细胞外基质稳态中发挥作用。