以PTP1B为靶点的中药对胰岛素干预HepG2细胞调节作用研究进展

2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)是胰岛素抵抗或胰岛β细胞功能障碍引起的以高血糖为特征的慢性代谢性疾病。胰岛素抵抗作为T2DM病发的关键要素及明显特点,主要作用于肝脏、肌肉、脂肪等外周靶器官、组织,可降低机体对胰岛素的反应敏感性,致使胰岛素无法产生正常生理效应。肝脏作为机体维持血糖稳态的关键器官,在患者餐后血糖浓度明显增加时,在胰岛素作用下肝脏可有效降低血糖。相反,在血糖浓度降低到一定程度时,会增强肝糖原及糖异生的作用,生成葡萄糖运送至血液中,从而维持血糖稳定。分子水平研究表明2型糖尿病的一个发病机制是胰岛素信号通路障碍。蛋白酪氨酸磷酸酶1B(protein tyrosine phosphatases 1B,PTP1B)是胰岛素信号转导过程中的负调节因子,是2型糖尿病的一个治疗靶点。在肝脏发生胰岛素抵抗的情况下,PTPIB表达水平明显增高,可以将胰岛素受体及受体底物去磷酸化,并影响PI3K/Akt胰岛素信号转导下游相关信号因子的表达,有效降低葡萄糖的吸收作用。该文重点概述以PTPIB为靶点的相关中药对胰岛素干预HepG2细胞的调节作用,探讨相关中药对2型糖尿病的作用机制,以期为相关药物细胞水平的作用机制研究提供参考。     

基于古今医案云平台的中医治疗失眠证治规律研究

目的:挖掘中医辨证论治失眠的组方用药规律。方法:筛选纳入古今医案云平台(V 1.5.7)古代医案、现代医案、名医医案及共享医案数据库中所收录的符合本研究要求的有关失眠的医案,应用平台软件中的频次分析、关联分析、药对分析等方法进行数据挖掘。结果:共收集失眠医案664个,主要症状为入睡困难、早醒、睡眠表浅、睡中易醒、多梦等...     

基于糖谱法的半夏及其炮制品多糖结构特征分析及水/酶解前后抗氧化活性评价

目的：采用糖谱法,通过部分酸水解和特异性糖苷酶酶解结合高效薄层色谱法（HPTLC）和荧光辅助凝胶电泳法（PACE）,分析半夏及其炮制品多糖的糖苷键结构特征,以及其水/酶解前后的抗氧化活性变化。方法：半夏及其炮制品多糖加入淀粉酶除淀粉后,超滤法除去3 000 Da以下的小分子成分;精制后的多糖以酸水解和5种特异性糖苷酶酶解制备样品,采用HPTLC和PACE进行分析;以2,2′-联氮-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（ABTS）和2,2-联苯基-1-苦基肼基（DPPH）自由基清除实验评价多糖水/酶解前后抗氧化活性的变化。结果：通过HPTLC和PACE分析发现,半夏及其炮制品多糖能被β-半乳糖苷酶、β-甘露糖酶、纤维素酶和果胶酶水解,而几乎不能被葡聚糖酶水解,表明半夏及其炮制品的多糖含有β-吡喃半乳糖苷键、β-1,4-甘露糖苷键、β-1,4-葡萄糖苷键和α-1,4-半乳糖醛酸苷键。通过体外抗氧化实验发现,半夏及其炮制品多糖经酸水解和果胶酶酶解后清除ABTS自由基能力减弱,而经纤维素酶,β-半乳糖苷酶和β-甘露糖酶酶解后,清除ABTS自由基能力增强;而半夏及其炮制品多糖经不同水/酶解后...     

靶向DNA损伤应答关键分子在肿瘤放疗增敏中的应用

放射治疗是临床肿瘤治疗的重要手段,主要通过破坏DNA双链对肿瘤细胞造成严重损伤。然而,其作为单一的治疗手段,治疗效果受肿瘤细胞固有DNA损伤修复能力的影响。多项研究表明,靶向调节DNA损伤响应关键分子可以有效抑制DNA损伤修复,协同增强放化疗敏感性。本文对一些关键的DNA损伤响应抑制剂联合放疗、化疗在多种肿瘤治疗中的应用进行了总结,并阐述了联合治疗诱导由环鸟嘌呤核苷酸腺嘌呤核苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子介导的免疫反应。最后总结和展望了联合治疗存在的挑战和发展前景。     

基于血热证探讨银屑病病证结合动物模型的构建

目的:以中医病因学说为切入点探讨如何构建银屑病血热证大鼠模型。方法:30只雄性SPF级SD大鼠随机分为空白组、银屑病组、银屑病血热证组,每组10只。空白组大鼠不做任何处理,银屑病组大鼠背部剃毛暴露2 cm×2 cm区域,将5%心得安乳剂按照0.3 g/cm2剂量均匀涂抹以建立银屑病模型,3次/d,共21 d。银屑病血热证组大鼠与银屑病组同法造模,同时用紫外线灯模拟日光照射背部皮肤1 h,1次/d,共21 d,以及按照1 mL/100 g剂量灌服干姜、甘草煎液,1次/d,共21 d。从背部皮肤皮损形态、组织病理Baker评分、体质量、肛温、进食量、饮水量、排便量、排尿量、T3、T4及炎症因子TNF-α、IL-17的表达评价动物模型。结果:银屑病血热证组大鼠背部皮肤出现典型的红斑、丘疹、鳞屑,Baker评分高于空白组(P<0.01);银屑病血热证大鼠症状表现有体质量减轻、肛温升高、进食量减少、饮水量增多、排便量、排尿量减少,与银屑病组比较,差异有统计学差异(P<0.05);与银屑病组比较,银屑病血热证组大鼠T3、T4及炎症因子TNF-α、IL-17均升高(P<0.05)。结论:银屑病血热证大鼠模型既具有银屑病皮损病理特征,又具有中医血热证症状。     

基于UHPLC-Q-Orbitrap HRMS和整合网络药理学的川芎酒制后增强抗脑缺血损伤作用机制分析

目的 分析川芎酒制前后水提物中差异性成分，探讨川芎酒制增强抗脑缺血损伤的分子作用机制。方法 采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法（UHPLC-Q-Orbitrap HRMS），基于化合物质谱信息并结合对照品、参考文献比对，定性分析川芎水提物的主要化学成分，采用化学模式识别方法筛选川芎酒制前后的差异性成分。基于此，通过在线数据库对差异化合物的潜在靶点进行预测，搜索脑缺血疾病相关靶点。运用Cytoscape 3.6.0建立川芎酒制前后差异成分-作用靶点-疾病网络图；使用STRING 11.5构建交集靶点蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络；通过DAVID 6.8对差异性成分抗脑缺血的潜在靶点进行基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析；同时，将相对含量较高且酒制后峰面积升高的化合物与其对应靶点进行分子对接，以验证酒制增效机制。结果 从川芎中共鉴定出71个化学成分，筛选出34个差异性成分，对应潜在靶点603个，与769个疾病靶点做交集后共得到60个交集靶点。通过PPI网络分析得到7个关键靶点，包括JUN、信号转导和转录激活因子3（STAT3）、丝裂原活化蛋白激酶3（MAPK3）、白细胞介素-1β（IL-1β）、血管内皮生长因子A（VEGFA）、胱天蛋白酶-3（CASP3）、基质金属蛋白酶9（MMP9）；肿瘤坏死因子（TNF）信号通路为主要的差异信号通路。分子对接结果显示，各差异成分（洋川芎内酯K、洋川芎内酯F、3-正丁基苯酞、Z，Z′-6，8′，7，3′-双藁本内酯、阿魏酸、Z-藁本内酯）和其对应靶点均具有较好的结合活性。结论 川芎酒制增效机制可能与抑制炎症反应的作用增强有关。     

依帕司他原料药有关物质的HPLC测定方法改进研究

目的 采用改进的高效液相色谱法测定依帕司他原料药有关物质。方法 采用依利特Hypersil BDS C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈-pH6.5磷酸盐缓冲液（0.025 mol·L^-1 KH₂PO₄+0.025 mol·L^-1 Na₂HPO₄,用H₃PO₄调节pH至6.5）为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为396 nm和280 nm,柱温为30℃,进样量为20 μL。结果 依帕司他与相邻杂质能较好地分离。立体异构体杂质在浓度0.010~30 μg·mL^-1内线性关系良好,检测限和定量限分别为0.80,2.4 ng·mL^-1。精密度、稳定性、准确度、耐用性均符合要求。结论 该方法可用于依帕司他原料药有关物质的检查。     

《重订王孟英医案》19则泄泻医案的证素与辨证研究

选取《重订王孟英医案》中泄泻病医案展开研究。提取规范共性证素,病位证素8项,分别为肝、脾、胃、大肠、心、肺、肾和厥阴;病性证素14项,分别为气虚、气滞、火、热、阴虚、阳亢、动风、暑、湿、痰、饮、津(液)伤、血虚和阳虚。由证素组合基本证型30项,并由基本证型或证素组合成反映医案机理的复合证型。在研究医案和指导临床辨证过程中运用证素分析方法能阐明病证的要点,揭示疾病各要素间的病机关系,明晰医家的临证思路。     

RAW 264.7细胞炎症模型优化及异喹啉类生物碱抗炎活性研究

目的 对RAW 264.7细胞炎症模型进行优化,并考察异喹啉类生物碱的抗炎活性。方法 采用内毒素脂多糖（LPS）诱导RAW264.7细胞炎症反应,以细胞上清液中炎症因子分泌水平为指标,优化LPS诱导浓度、时间及阳性药地塞米松（DEX）孵育时间,并考察异喹啉类生物碱的抗炎活性。结果 RAW 264.7细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）分泌水平随LPS诱导浓度、时间增加而升高,但当LPS质量浓度超过100 ng/mL、诱导时间超过12 h后,TNF-α分泌水平趋于平缓;LPS为20 ng/mL、诱导12 h的TNF-α分泌水平明显升高。DEX对TNF-α分泌抑制作用随孵育时间延长而增强,但孵育4 h后,TNF-α分泌抑制作用趋于平缓。异喹啉类生物碱呈现不同程度TNF-α分泌抑制作用,其抑制活性与其季胺型母核结构及R基团烷氧基取代等密切相关。结论 LPS为20 ng/mL、诱导12 h能较好诱导RAW 264.7细胞炎症反应;异喹啉类生物碱的TNF-α分泌抑制作用与其季胺型母核结构、R基团取代等密切相关。     

论"天地合气"嬗变为"肺脾合化"在人体气血生成中的作用

"天地合气命之曰人","人之所有者,血与气耳"。人生存于天地之间,天食人以五气,地食人以五味,用取象比类的中医思维,将人体"天地"嬗变为肺、脾,"天地合气"嬗变为"肺脾合化"。通过梳理《内经》气血生成的理论,认识"肺脾合化"在人体气血生成过程中的重要性,对于丰富中医气血理论内涵,指导中医气血辨证,拓宽相关疾病的治疗思路等,都具有重要的意义。