双靶向组织特异性HSV-tk/GCV抗瘤系统的构建及体外效应研究

目的：构建高靶向性基因转移及表达系统，并研究其介导HSVtk/GCV自杀基因系统对肝癌细胞的体外杀伤作用。方法： 通过重组技术分别构建antiTfR ScFvGAL4融合蛋白表达载体ScFvGAL4pET28a及含AFP启动子、GAL4特异性识别序列（GAL4rec）的HSVtk真核表达载体pEBAF/tkGAL4rec。IPTG诱导后，利用受体介导内吞作用介导pEBAF/tkGAL4rec质粒转染表面均高表达TfR的人肿瘤细胞株HepG2，SMMC7721及A549。潮霉素筛选后，MTT法检测GCV对它们的杀伤作用。结果：双酶切鉴定、SDSPAGE电泳及测序分别证明antiTfR ScFvGAL4融合蛋白及重组pEBAF/tkGAL4rec真核表达质粒构建成功。体外杀伤实验中，高分泌AFP(845 ng/ml) 的HepG2/tk细胞对GCV很敏感，且抑制率与GCV浓度及作用时间呈正相关；而低分泌AFP(2 ng/ml)的SMMC7721/tk细胞对GCV低度敏感；不分泌AFP 的A549/tk细胞则不敏感。结论：双靶向组织特异性HSVtk/GCV抗瘤系统构建成功，并显示出很好的靶向性。     

不同处理时间50 Hz 3.6 mT正弦交变磁场对人脐带干细胞增殖与成骨性分化的研究

目的：研究50 Hz 3.6 mT不同处理时间的正弦交变电磁场（Sinusoidal electromagnetic field,SEMFs）对体外培养人脐带干细胞（Human umbilical cord stem cells,HUCSC）增殖与成骨性分化的影响。方法：体外分离培养HUCSC,传代后随机分为6组。用频率50 Hz,3.6 mT的SEMFs分别每天处理HUCSC 0.0（对照组）、 0.5、1.0、1.5、2.0 h和2.5 h,倒置相差显微镜观察细胞形态,MTT法测定细胞增殖,在磁场处理后的15 d 和17 d 分别用茜素红和vonkossa对钙化结节进行染色,在磁场处理后的第4天和第6天 PCR检测胶原Ⅰ（Collagen-Ⅰ）和骨形态发生蛋白（Bone morphogenetic protein-2,BMP-2）mRNA表达量的变化,在磁场处理后的10、12、14 d 和 16 d测定ALP活性。结果：1.0、1.5、2.0 h和2.5 h组促进HUCSC增殖;磁场处理后的7~9 d细胞出现钙化结节;在SEMFs处理后的第14天和第16天0.5 h组和1.0 h组碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase,ALP）活性显著高于对照;SEMFs处理组能增加HUCSC钙化面积,其中尤以0.5 h和1.0 h最为明显;SEMFs能增加Collagen-Ⅰ和BMP-2 mRNA表达量,其中尤以0.5 h和1.0 h组作用最为明显。结论：50 Hz,3.6 mT 1.0、1.5、2.0 h和2.5 h促进HUCSC增殖,同时SEMFs组能促进体外培养HUCSC成骨性分化,尤以处理0.5 h和1.0 h促进成骨性分化最为明显。     

精子功能指标在辅助生殖助孕方式选择中的作用

目的 评估精子功能参数对精子常规体外受精能力的预测价值,探寻有效选择受精方式的新指标.方法 回顾性分析2017年1月至2019年12月于我院首次行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)短时受精的429个周期的临床资料,根据受精结局不同分为2组:受精失败或受精率＜30％的患者为早补救卵胞浆内单精子注射(R-ICSI)组(n=...     

LHRHa靶向紫杉醇脂质体的制备及体外抗肿瘤作用

目的:制备促黄体激素释放激素类似物(Luteinizing hormone-releasing hormone analogues,LHRHa)靶向紫杉醇脂质体(Paclitaxel liposomes,PTX-Lipo),研究其在体外增强紫杉醇(Paclitaxel,PTX)对卵巢癌A2780/DDP细胞的抑制作用。方法:采用薄膜超声法制备PTX-Lipo与LHRHa靶向紫杉醇脂质体(LHRHa-Paclitaxel liposomes,LHRHa-PTX-Lipo),用透射电镜考察脂质体形态;高效液相色谱法测定2种PTX-Lipo的包封率;激光共聚焦法通过卵巢癌A2780/DDP细胞对4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并氧杂恶二唑荧光素的摄取检测来反映细胞对NBD-Lipo与NBD-LHRHa-Lipo的摄取情况;MTT法及细胞克隆形成实验检测LHRHa-PTX-Lipo体外对卵巢癌细胞的生长抑制情况。结果:制备LHRHa-PTX-Lipo的平均粒径123.4 nm,包封率在90%以上;A2780/DDP细胞对NBD-LHRHa-Lipo组的荧光摄取明显高于NBD-Lipo组;LHRHa-PTX-Lipo对A2780/DDP细胞的生长及克隆形成抑制明显高于PTX组及PTX-Lipo组(P<0.05)。结论:采用薄膜超声法制备的LHRHa-PTX-Lipo可使药物在靶部位聚集,增强药物对卵巢癌细胞的抑制作用。     

人参皂苷Rg3辅助治疗结肠癌临床研究

目的:观察人参皂苷Rg3辅助治疗结肠癌的临床疗效。方法:选取89例Ⅲ期结肠癌患者,按随机数字表法分为观察组45例和对照组44例。对照组给予氟尿嘧啶(5-Fu)+亚叶酸钙+奥沙利铂治疗,观察组在对照组基础上给予人参皂苷Rg3治疗。比较2组短期疗效及治疗前后免疫细胞水平、血管内皮生长因子(VEGF)、p53表达及生活质量评分。结果:观察组短期总有效率为82.22%,高于对照组59.09%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,2组白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4 (IL-4)、白细胞介素-6 (IL-6)及白细胞介素-10 (IL-10)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组IL-2、IFN-γ、TNF-α水平高于治疗前,且观察组高于对照组(P<0.05);2组IL-4、IL-6及IL-10水平低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05)。治疗前,2组VEGF及p53水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组VEGF及p53水平低于治疗前,且观察组VEGF...     

原发性高血压并发2型糖尿病患者靶器官损害分析

【目的】探讨2型糖尿病（T2DM）对于原发性高血压（EH）患者靶器官损害的影响。【方法】158例EH患者按是否合并T2DM分为EH组（78例）及EH＋T2DM组（80例）,分别测定其血压、血脂、血糖等,计算体重指数（BMI）。所有患者接受超声心动图和颈动脉超声检查,计算左室重量（LVM）及左室重量指数（LVMI）,测量颈动脉内膜情况及有无斑块形成。测定徽量白蛋白尿（MAU）。【结果】EH＋T2DM组患者BMI、TC、LDL-C、SBP、24h-SBP、IVST、LVM、LVMI、颈动脉血管壁增厚或斑块发生率、微量白蛋白尿（MAU）均高于EH组,差异具有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。【结论】原发性高血压并发T2DM,意味着靶器官的损害及心血管疾病危险性显著增加。     

莫沙必利及铝镁加混悬液治疗胆汁反流性胃炎的临床研究

[目的]探讨莫沙必利及铝镁加混悬液对胆汁反流性胃炎的疗效及胃内24h胆汁的影响.[方法]55例经胃内24h胆汁监测证实的胆汁反流性胃炎患者随机分3组.A组20例,予以莫沙必利5mg,每天3次,治疗4周;B组15例,予以铝镁加混悬液15mL,每天3次,治疗4周;C组20例,予以莫沙必利5mg,每天3次,及铝镁加混悬液15mL,每天3次,治疗4周.分别于治疗前及治疗4周后观察3组患者腹胀、上腹痛、恶心及呕吐症状变化,并于治疗后复查胃内24h胆汁监测.[结果]治疗后3组患者症状均明显减轻(P＜0.05),但各组间症状有效率的比较差异无显著性.3组患者治疗后胃内24h胆汁反流总时间百分比均显著减小(P＜0.05),但减小幅度各组间比较差异无显著性(P＞0.05).[结论]莫沙必利可减少胃内胆汁反流,铝镁加混悬液可结合胆酸,均为治疗胆汁反流性胃炎的有效药物.     

螺旋CT诊断新生儿缺氧缺血性脑病的价值

目的 探讨螺旋CT在新生儿缺氧缺血性脑病中的诊断价值。方法 采用常规扫描技术对98例患儿作颅脑螺旋CT检查,请两名CT诊断医生进行单独阅片后再对照讨论然后作出诊断。结果 （1）病灶主要分布在两大脑半球各叶,但累及桥脑、胼胝体少见。本组未累见及小脑。（2）病灶的形态大多为不规则斑片状、类圆形、结节状及条带状影像。（3）螺旋CT特点：一类为单发或多发单纯低密度脑组织水肿、无占位、中线移位不明显,但有时脑室变狭窄。另一类不仅有脑水肿灶而且合并脑组织出血、脑室出血、蛛网膜下腔及硬膜下出血。据螺旋CT表现可分为轻度、中度、重度三种类型。结论 螺旋CT不仅能明确诊断新生儿缺氧缺血性脑病,而且还能指导临床进行治疗及病情观察。     

反义促血管生成素2基因稳定转染对人胃癌细胞SGC-7901体外生长的抑制作用

目的：观察以pEGFP-N1为载体的促血管生成素2（angiopoietin2,Ang2）反义基因转染的人胃癌细胞SGC-7901中Ang2蛋白的表达,研究其对人胃癌细胞体外生长的抑制作用。方法：应用重组质粒转染反义Ang2的pEGFP-N1载体（pEGFP-N1-anti Ang2）、pEGFP-N1空载体质粒以脂质体转染法转染体外培养的人胃癌细胞株,以未转染组为对照,经G418筛选抗性克隆,扩大培养后,应用RT-PCR技术与免疫组化法检测Ang2基因及其蛋白的表达,MTT法分析细胞生长抑制作用,Annexin V-FITC和PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：RT-PCR与免疫组化均示pEGFP-N1-anti Ang2转染组无Ang2 mRNA及其Ang2蛋白的表达,MTT检测表明pEGFP-N1-anti Ang2转染组活细胞数较其它两组均低,差异有统计学意义（F=10.39,P=0.002 4）,流式细胞仪检测则显示其凋亡率较其它两组明显增高,差异有统计学意义（?字2=3 188.98,P＜0.000 1）。结论：pEGFP-N1-anti Ang2成功转染人胃癌细胞SGC-7901且可封闭Ang2 mRNA表达,使已转染pEGFP-N1-anti Ang2的人胃癌细胞Ang2蛋白的表达减少,并抑制人胃癌细胞的恶性表型。     

基于经络辨治对改善失眠患者神经递质的数据挖掘

〔摘 要〕 目的：采用数据挖掘的方法,探索运用经络理论在调节失眠患者神经递质方面的辨治规律。 方法：检索 2003 年 1 月至 2023 年 5 月期间在中国知网数据库（CNKI）、万方数据知识服务平台、维普数据库等数据库中关于 以经络理论辨证论治失眠患者后,针对改善失眠患者神经递质变化的相关文献,提取纳入文献的取穴处方,对高频穴 位进行频次分析,并进行归经,关联分析及聚类分析,对所涉及的经络进行网络可视化分析。 结果：本研究共纳入文 献 41 篇,其中穴位处方 41 首。涉及穴位 54 个,其中使用频次≥ 3 次的穴位 27 个,共涉及 12 条经脉。使用频次最 高的穴位为百会,穴位归经后使用频次最高的经络为督脉;关联分析显示高频使用穴位关联程度较高的穴位为照海、 百会、神门、三阴交,高频使用经络之间的关联度最高的为足厥阴肝经 → 足太阳膀胱经,相关性较好的经络为足厥 阴肝经、足太阳膀胱经、督脉、足少阳胆经、手少阳三焦经。高频穴位聚类可得到核心取穴组合 7 个。 结论：经络理 论辨治失眠患者,核心穴位处方为百会、神门、三阴交,治疗以督脉上穴位相关性最强,通过不同的穴位处方组合, 可以改善患者的神经递质,从而达到改善睡眠的效果。