RIFLE标准在术后急性肾损伤患者选择中的作用

目的探讨RIFLE标准在外科术后急性肾损伤（AKI）患者选择肾替代治疗时机选择中的作用及与预后的关系。方法回顾性分析2001年1月至2006年12月第四军医大学第一附属医院行肾脏替代治疗的外科术后AKI患者368例,按治疗方式分为两组：（1）连续性静脉-静脉血液滤过（CVVH）组,316例,每日置换总量48—96L;（2）非CVVH组,52例,其中间断性血液透析（IHD）29例,每日或隔日治疗4．5h;腹膜透析（PD）23例,每日腹透液总量8～12L。应用RIFLE标准对AKI进行分期,对比分析各组患者在不同AK1分期的医院死亡率、APACHEⅡ评分、器官衰竭数,以及CVVH组存活者的CWH治疗时间、尿量恢复时间和ICU逗留时间等指标的区别。结果（1）AKIⅢ期患者医院死亡率高于AKIⅠ期和Ⅱ期患者（P〈0．05）。（2）CVVH患者治疗前APACHEⅡ评分在AKI的3个分期中均高于IHD／PD患者（P〈0．05）。（3）CVVH存活者的CVVH治疗时间、尿量恢复时间和ICU逗留时间随AK1分期的加重而延长。结论RILFE标准对外科术后AKI早期诊断和判断预后有指导意义。必须强调肾脏替代时机的选择,早期行肾替代治疗（AKIⅠ期和Ⅱ期）可以明显改善预后,而CVVH比IHD和PD更有优势。     

Greater Adherence to Dietary Guidelines Associated with Reduced Risk of Cardiovascular Diseases in Chinese Patients with Type 2 Diabetes

The evidence regarding the impact of the scores on healthy eating indices on the risk of cardiovascular events among patients with type 2 diabetes (T2D) is limited. As such, in this study, we examined the associations of adherence to the Chinese and American dietary guidelines and the risk of cardiovascular disease (CVD) among Chinese individuals with T2D. We conducted a 1:1 age- and sex-matched case–control study based on a Chinese population. We used a structured questionnaire and a validated 79-item food-frequency questionnaire to collect general information and dietary intake information, and calculated the Chinese Healthy Eating Index (CHEI) and the Healthy Eating Index-2015 (HEI-2015). As participants, we enrolled a total of 419 pairs of hospital-based CVD cases and controls, all of whom had T2D. We found a significant inverse association between diet quality scores on the CHEI and HEI-2015 and the risk of CVD. The adjusted odds ratios (95% confidence interval) per five-score increment were 0.68 (0.61, 0.76) in the CHEI and 0.60 (0.52, 0.70) in the HEI-2015. In stratified analyses, the protective associations remained significant in the subgroups of sex, BMI, smoking status, tea-drinking, hypertension state, dyslipidemia state, T2D duration, and medical nutrition therapy knowledge (all p < 0.05). These findings suggest that a higher CHEI or HEI-2015 score, representing a higher-quality diet relative to the most recent Chinese or American dietary guidelines, was associated with a decreased risk of CVD among Chinese patients with T2D.     

A High-Fat Diet Induces Muscle Mitochondrial Dysfunction and Impairs Swimming Capacity in Zebrafish: A New Model of Sarcopenic Obesity

Obesity is a highly prevalent disease that can induce metabolic syndrome and is associated with a greater risk of muscular atrophy. Mitochondria play central roles in regulating the physiological metabolism of skeletal muscle; however, whether a decreased mitochondrial function is associated with impaired muscle function is unclear. In this study, we evaluated the effects of a high-fat diet on muscle mitochondrial function in a zebrafish model of sarcopenic obesity (SOB). In SOB zebrafish, a significant decrease in exercise capacity and skeletal muscle fiber cross-sectional area was detected, accompanied by high expression of the atrophy-related markers Atrogin-1 and muscle RING-finger protein-1. Zebrafish with SOB exhibited inhibition of mitochondrial biogenesis and fatty acid oxidation as well as disruption of mitochondrial fusion and fission in atrophic muscle. Thus, our findings showed that muscle atrophy was associated with SOB-induced mitochondrial dysfunction. Overall, these results showed that the SOB zebrafish model established in this study may provide new insights into the development of therapeutic strategies to manage mitochondria-related muscular atrophy.     

益气化瘀方及其拆方对大鼠椎间盘纤维环细胞凋亡相关因子的作用

目的:研究益气化瘀方及其拆方药理血清对大鼠诱导凋亡椎间盘纤维环细胞bcl-2、Bax及半胱氨酸蛋白酶8(caspase-8)表达的影响.方法:用细胞免疫化学和积分光密度分析等方法比较分析益气化瘀方及其拆方益气方、化瘀方药理血清,以及胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1, IGF-1)对抗-Fas抗体(anti-Fas antibody)诱导凋亡大鼠椎间盘纤维环细胞bcl-2、Bax及caspase-8表达的影响.结果:益气化瘀方、益气方、化瘀方及IGF-1血清处理组与凋亡模型组相比,bcl-2表达升高,Bax及caspase-8表达降低,均有统计学意义(P<0.01);益气化瘀方组与益气方、化瘀方组比较,Bax表达明显降低,有统计学意义(P<0.05).结论:益气化瘀方及其拆方可以调控大鼠椎间盘纤维环细胞内Bax、bcl-2和caspase-8表达,其延缓椎间盘退变的机制可能与调控细胞的凋亡相关因子有关.     

严重下颈椎骨折脱位的术式选择与疗效分析

目的探讨治疗严重下颈椎骨折脱位的术式选择和手术疗效。方法 2004年9月~2010年7月笔者对83例严重下颈椎骨折脱位患者应用前路、后路和一期后-前路或是前-后-前联合入路（后路撬拨复位、植骨融合内固定术＋前路颈椎损伤节段椎间盘切除或椎体次全切＋钛板（钛网）植骨融合内固定术）治疗。术后对比评估的方法,使用测量Cobb角、椎体水平移位和Frankel评分表评价脊髓功能恢复与脊柱损伤重建稳定性等情况。结果 80例患者获得有效随访,在手术参数、术后力学参数方面对其进行比较,联合入路组手术时间和出血量均较单纯前路或后路组长,神经学方面,7例术前Frankel分级A级无恢复外,其余患者均有不同程度恢复,脊髓功能平均提高1.1级。术后4~6个月摄片融合节段均获得骨性融合。结论应用一期联合手术入路在复杂下颈椎骨折脱位方面较单纯前路或后路手术具备更宽的适证,需要掌握严格手术指征和根据病情制订个性化治疗方案。     

自体腘绳肌腱与同种异体肌腱移植重建前交叉韧带的临床疗效分析

目的探讨关节镜下同种异体胫前肌腱与自体腘绳肌腱重建前交叉韧带（ACL）的临床疗效.方法选择2008年12月至2010年8月昆明医学院第一附属医院骨科膝关节前交叉韧带重建患者46例,其中男27例,女19例,分为A组：自体肌腱移植重建25例,B组：同种异体肌腱移植重建21例.术后进行临床体检及前/后抽屉试验、Lachman试验、膝关节应力X线片、髌骨轴位片及MRI等相关检查,Lysholm评分,IKDC评分,AKS评分.术后随访4～24个月,平均12.4个月.结果两组病例术后Lysholm评分,IKDC评分,AKS评分测试结果差异无统计学意义（P〉0.05）.结论同种异体与自体肌腱重建ACL的疗效相近,是重建ACL良好的移植物之一.     

γ-分泌酶抑制剂对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的作用

目的γ-分泌酶抑制剂(DAPT)是Notch信号通路特异性阻断剂,本实验将研究DAPT对SD大鼠离体心脏缺血再灌注损伤(I/RI)的影响,为探明Notch信号通路在心肌I/RI中的作用提供理论依据。方法采用离体大鼠心脏Langendorff逆行灌注模型,缺血50 min,再灌注60 min。实验分为4组,分别为正常对照组(Control)、I/RI组、DAPT(1μM)+I/RI组,DAPT(1μM)组。监测缺血前后血流动力学各项指标,包括:心率(HR)、左心室发展压(LVDP)、左心室内压最大变化速率(+dp/dtmax)、冠脉流量(CF)、计算出心率压力指数(DP,LVDP×HR/1000);氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定各组心肌梗死(MI)的面积;专用试剂盒测定冠脉流出液(CF)中乳酸脱氢酶含量(LDH)。结果与Control组比较,I/R组缺血后各时间点的收缩及舒张功能均显著降低(P<0.01),MI面积显著增加(P<0.01),冠脉流出液中LDH含量显著升高(P<0.01);与I/RI组比较,DAPT+I/RI组可以加重上述指标进一步恶化(P<0.01);与Control组比较,DAPT各项指标无统计学差异(P>0.05)。结论DAPT有加重心肌缺血再灌注损伤的作用,Notch信号通路可能在心肌缺血再灌注损伤中发挥重要的调控作用。     

右胸、颈、腹三切口治疗食管上段癌

目的 :探讨胸上段食管癌的外科治疗。方法 :采用右胸、颈、腹三切口术式治疗胸上段食管癌 32例。结果 :右胸三切口具有显露满意 ,切除率高 ,不切开膈肌术后对咳嗽排痰有利 ,胸内操作和开胸时间短等优点。结论 :右胸三切口是胸上段食管癌手术的首选切口。     

Nestin特异性RNA干扰真核表达载体的构建及稳定株筛选

目的构建人nestin基因特异的RNA干扰质粒,为探讨抑制nestin基因表达对人黑色素瘤细胞生物学行为调控的研究奠定基础。方法分别用30、50、80 nmol/L干扰或80 nmol/L对照siRNA转染人黑色素瘤细胞株UACC903,48 h后用免疫荧光、RT-PCR和Western-blot鉴定nestin基因表达并筛选有效的序列,用有效或对照组序列的正义链和反义链,通过酶切、连接、转化和筛选,获得长期下调人nestin基因表达的慢病毒载体,并包装慢病毒感染人UACC903细胞,免疫组化和Western-blot鉴定干扰有效,以此获取nestin表达下调的UACC903细胞株。结果重组质粒成功转化高感受态大肠杆菌,经XhoⅠ和HPAⅠ双酶切,琼脂糖凝胶电泳分析,结果表明寡核苷酸成功插入到预计位点,经测序鉴定,序列完全正确。干扰组或对照组慢病毒感染UACC903细胞后与对照组比较,干扰组mRNA和蛋白表达明显降低。结论成功构建了针对人nestin基因的特异性shRNA真核表达载体,转染细胞后可抑制nestin基因的表达,为进一步研究其基因功能奠定了基础。     

人β-catenin-EGFP融合表达慢病毒载体构建及在毛囊干细胞中的表达

目的 构建人β-连环蛋白(β-catenin)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合表达的慢病毒载体,感染人毛囊干细胞并予以鉴定.方法 提取人血管内皮细胞总RNA,RT-PCR扩增获得β-catenin基因全部序列,采用TA克隆技术获取基因亚克隆pUCm-T-β-catenin,AgeⅠ酶切连接pGC-FU载体构建β-catenin融合EGFP共表达慢病毒载体质粒pGC-FU-β-catenin-EGFP.质粒转化感受态细菌,筛选阳性克隆,经RT-PCR及测序鉴定正确后转染FT293细胞,Western blotting分析鉴定.质粒再转染FT293细胞进行慢病毒质粒包装,荧光显微镜观察,Real-time PCR测定病毒滴度.包装后慢病毒质粒感染体外分离和培养经免疫荧光染色鉴定的人毛囊干细胞,RT-PCR鉴定,荧光显微镜观察感染效率.结果 RT-PCR及测序鉴定证实目的 基因正确克隆至慢病毒载体中.在转染pGC-FU-β-catenin-EGFP的FT293细胞,Western blotting证实细胞表达β-catenin;质粒包装后荧光显微镜观察FT293细胞见大量绿色荧光时测得病毒滴度为2.0×108 TU/mL.在感染慢病毒质粒的人毛囊干细胞,当感染复数为10时,感染后48 h的感染效率可达80%以上,感染后3周的感染效率仍维持在80% ～90%.结论 成功构建β-catenin-EGFP融合表达慢病毒载体,可高效感染人毛囊干细胞且表达稳定、持久.