腺病毒siRNA抑制RhoA基因并联合TNF-α诱导肝癌细胞凋亡的研究

目的建立RhoA基因的腺病毒siRNA系统,并联合TNF-α诱导肝癌细胞凋亡,分析RhoA在肿瘤细胞中的功能和作用。方法用已构建的RhoA干扰质粒构建RhoA的腺病毒siRNA系统,筛选重组病毒并感染HepG2细胞,应用Western blot和RT-PCR检测RhoA蛋白表达和基因表达水平。感染Ad-siRNA-RhoA腺病毒的肝癌细胞用TNF-α诱导后进行MTT以及细胞内DNA片段化检测。结果成功构建RhoA基因的siRNA腺病毒系统。用重组病毒感染肝癌细胞,RhoA蛋白表达抑制率为76.48%;RhoA基因的mRNA转录水平降低74.46%。MTT检测显示,感染腺病毒Ad-U6-control对照组以及感染腺病毒Ad-siRNA-RhoA实验组的细胞A值差异无统计学意义(F=5.41,P>0.01),即利用siRNA抑制肝癌细胞中RhoA表达,肿瘤细胞凋亡不明显。TUNEL检测显示,RhoA腺病毒siRNA联合TNF-α致肿瘤细胞凋亡作用显著。结论构建的腺病毒siRNA载体系统能抑制目的基因RhoA的表达,联合TNF-α能抑制肿瘤细胞生长和增殖并诱导肿瘤细胞凋亡,为肿瘤基因功能的基础研究和肿瘤基因治疗打下了实验基础。     

微弧氧化ZK60镁合金生物安全性和降解性的体内实验研究

目的:研究经微弧氧化处理的ZK60镁合金(MAO-ZK60)植入动物体内后的组织毒性和降解性来探讨其作为骨科植入材料的可能。方法:将18只SD大鼠随机均分为3组(A、B、C组):A组为实验组,在大鼠股骨髁内植入经微弧氧化处理的ZK60镁合金(MAO-ZK60)棒;B组植入表面未经处理的ZK60镁合金(ZK60)棒;C组植入医用高分子左旋聚乳酸(PLLA)棒,B、C组分别为对照组。观察并比较不同组之间的血生化指标的动态变化。12周后处死实验动物后取材,病理切片观察肝、肾组织形态变化,判断有无肝肾毒性。micro-CT检查观察镁合金在大鼠体内降解情况及植入体-骨组织界面,并用GEHC Micro View软件计算镁合金植入体体积的变化。结果:各组随时间变化生化指标无显著变化,差异无统计学意义。各组肝、肾组织病理组织切片均未见异常。micro-CT显示A组4周时骨-植入体界面有空隙开始形成,8周时空隙开始逐渐减小,至12周时空隙继续减小并且植入物与骨质结合较好。A组的体积随时间的改变小于B组(P<0.05)。结论:经微弧氧化处理的ZK60镁合金在动物体内表现出良好的完全性,其耐腐蚀性较未经处理的ZK60镁合金有所提高。     

控制性超排卵中黄体生成素的过度抑制和黄体生成素预处理

体外受精-胚胎移植(IVF-ET)降调方案中,使用促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)降调后,部分患者可能出现卵巢过度抑制,对卵泡刺激素(FSH)的反应延迟.而GnRH-a主要抑制黄体生成素(LH),因此可能存在LH不足,对IVF中出现卵巢过度抑制的患者可考虑LH预治疗.     

腰椎后路椎旁肌间隙入路的解剖学与影像学观察

目的:观察腰椎周围肌间隙的解剖学与影像学特点,为腰椎后路椎旁肌间隙入路的选择和操作提供形态学依据.方法:选取18具成人尸体湿性躯干标本,一侧行局部解剖观察腰椎周围肌肉及其毗邻结构,另一侧行模拟肌间隙手术入路,观察不同肌间隙的解剖构成及其显露腰椎相关结构的特点;同时选取30例健康志愿者的腰部MRI与CT图像,观察肌间隙的影像学显示特点.结果:Wiltse间隙位于多裂肌与最长肌之间,由脂肪及疏松结缔组织填充,无血管、神经穿行;通过该间隙可清晰显露腰椎关节突关节、椎间孔及横突;75.0％的CT片和93.3％的MRI片可显示Wiltse间隙.LIMP间隙位于最长肌与髂肋肌之间,由一层薄而透明的筋膜分隔两肌,69.4％标本可见脊神经后支的肌支穿行间隙内;该间隙可满意显露椎间孔区及椎弓根;41.6％的CT片和56.6％的MRI片可显示LIMP间隙.Watkins间隙位于髂肋肌与腰方肌之间,由腰背筋膜中层及少量脂肪分隔肌肉形成,75.0％标本可见脊神经后支的皮支及伴行血管走行;该间隙可满意显露椎间孔及椎体两侧;63.3％的CT片和86.6％的MRI片可显示Watkins间隙.结论:熟悉腰椎不同肌间隙的形态特点及穿行结构,术前影像学准确观测有助于椎旁肌间隙入路的选择与操作.     

小鼠原位肝癌移植模型中髓系来源抑制性细胞的表达

目的 观察小鼠原位肝癌移植模型中髓系来源抑制性细胞(MDSCs)的表达.方法 将10只BALB/c小鼠随机分为两组:正常组和荷瘤组,后组是将H22肝癌细胞注射到肝左外叶,制作小鼠原位肝癌移植模型.10d后处死小鼠.流式细胞术检测两组小鼠外周血、骨髓、脾脏及肝脏组织中MDSCs的表达.结果 荷瘤组小鼠外周血、骨髓和脾脏中的MDSCs比例为[(47.73±6.00)、(71.90±4.30)、(11.21±1.19)％],均明显高于正常组小鼠[(18.33±2.31)、(59.03±4.50)、(5.82±0.58)％];正常小鼠肝组织中MDSCs占肝内白细胞6.5％,荷瘤小鼠肝癌组织、癌旁组织中MDSCs占肝内白细胞分别为43.8％和12.8％.结论 在小鼠原位肝癌移植模型中,MDSCs表达明显上调,为研究MDSCs在肝癌发生发展中的作用提供了良好的动物模型.     

吻合掌侧静脉及保留指甲的指尖再植

目的: 探讨手指指尖离断的治疗方法及临床效果。方法: 2007年10 月至2011年6月治疗13例18指指尖离断患者,其中男9例,女4例;年龄17～45岁,平均26岁。伤后至就诊时间30 min～5 h,断指缺血时间1.5～7 h,均为常温保存。采用吻合掌指静脉及保留指甲的方法进行再植。结果: 13例18 指断指均成活并获随访,术后无血管危象发生。随访时间为3～24个月,平均14个月。患指外形及长度与健指相似,指甲平整,关节活动良好,触、痛觉恢复,两点辨别率3～6 mm,平均5 mm.根据中华医学会手外科学会断指再植功能评定标准评定,优14指,良3指,差1指。结论: 采用吻合掌侧静脉及保留指甲的方法进行指尖再植,不仅可以提高断指成活率还可以恢复良好的外观及功能,是一种理想的方法。     

MMP-3、IgG和CD68在青少年与中老年突出腰椎间盘组织中的表达分析

【摘要】 目的：比较细胞因子基质金属蛋白酶3（matrix metalloproteinases 3,MMP-3）、IgG和CD68在青少年与中老年患者突出腰椎间盘组织中的表达,探讨两个年龄段腰椎间盘突出的病因。方法：收集40例腰椎间盘突出症患者的突出腰椎间盘髓核标本,青少年组18例,年龄11～25岁,平均20.6±3.4岁;中老年组22例,年龄40～72岁,平均48.0±10.3岁。HE染色观察标本退变情况,免疫组化染色检测MMP-3、IgG和CD68的表达,光学显微镜下观测并计录数据。结果：标本HE染色提示多数（17/22）中老年组腰椎间盘存在明显退变,青少年组多数椎间盘（13/18）退变不明显或无退变。MMP-3阳性率青少年组（33.33%）低于中老年组（81.82%）;IgG阳性率青少年组（66.67%）高于中老年组（31.82%）;CD-68阳性率青少年组（83.33%）高于中老年组（45.45%）,两组MMP-3、IgG和CD68的表达阳性率比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：免疫和炎症反应可能是青少年腰椎间盘突出的重要病因,而中老年腰椎间盘突出可能主要与退变有关。     

肩关节骨折的数字化辅助治疗

目的 探讨计算机三维仿真技术辅助个体化肩关节骨折的治疗效果.方法 选择获得随访≥6个月的90例肱骨近端骨折及30例肩胛骨骨折患者共120例,采用传统手术治疗60例,数字化辅助手术治疗60例,数字化辅助组在术前CT图像三维重建、快速成型、计算机三维模拟手术和个体化预手术的基础上实施精确化手术.比较两组术中复位固定时间及随访6个月时的肩关节功能情况.结果 120例均获随访,时间 6～36(13.5±4.5)个月.数字化辅助组与传统手术组复位固定时间分别为38~42(40.3±5.4)min和47~65(53.3±5.7)min,术中出血量分别为70~100 (80.3±15.9) ml和95~120(100.7±10.4) ml;两组比较差异均有统计学意义(P<0.01).随访6个月时,肩关节功能按Neer评分:数字化辅助组优良率为86.67%,传统手术组为79.3%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 计算机三维仿真技术辅助个体化肩关节手术可以缩短术中复位固定时间,提高肩关节骨折手术的精确度,是治疗肩关节骨折的有效方法.     

锥形束CT与根尖片对牙根纵裂诊断的对比研究

目的:比较锥形束CT(CBCT)和X线根尖片在牙根纵裂诊断中的准确度,探讨CBCT对牙根纵裂诊断的价值。方法:选取临床检查中疑似牙根纵裂患牙50例,分别进行X线根尖片、CBCT检查诊断和外科手术诊断;对X线根尖片和CBCT对牙根纵裂的诊断结果进行统计分析。结果:CBCT诊断牙根纵裂的敏感度(83.33%)高于X线根尖片诊断牙根纵裂的敏感度为(47.61%),P<0.05。结论:CBCT比X线根尖片能更准确诊断牙根纵裂,有助于牙根纵裂诊断。     

低位直肠癌保功能手术的解剖学基础

尽管全直肠系膜切除术（TME）是直肠癌根治术的金标准．但术后有一定的泌尿生殖功能障碍发生率。我们通过盆腔筋膜的解削研究明确了TME正确的手术层次,并进一步界定了手术层次与盆腔神经的关系．以期减少术巾神经损伤。值得注意的是,盆丛存在两种形态。如果盆丛为弥散状,完整的切除直肠系膜将不可避免地损伤盆丛,因而需通过深入的研究明确盆丛不同的功能单位。