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背景:传统方法多采用平滑肌细胞和移行上皮细胞构建组织工程膀胱,并进行支架材料的双面种植,但由于平滑肌细胞取材培养困难,且体外传代有限,双面种植较为困难。
目的:实验拟验证以骨髓间充质干细胞及膀胱脱细胞基质构建组织工程膀胱的可行性。
设计:基础实验研究。
单位:中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心。
材料:实验于2006-03/2007-05在中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心完成。实验室级别为卫生部部属医院开放实验室。1月龄SD大鼠,雌雄不限,体质量80~ 100g,由中山大学实验动物中心提供。新鲜猪膀胱取自南方医科大学动物实验中心。
方法:采用全骨髓培养连续贴壁法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,并应用流式细胞仪检测其表面抗原。采用去污剂洗涤法制备猪膀胱脱细胞基质,并测定其纯度及特性。将第3代骨髓间充质干细胞接种到膀胱脱细胞基质上,以添加25 ng/L血管内皮生长因子(VEGF165)的培养液进行体外、体内复合培养,检测其相容性。体内实验以细胞单独培养为对照,体外实验以未植入细胞的材料为对照,并模拟合适的微环境诱导骨髓间充质干细胞生长分化,分别在4,8周后取出动物体内的复合材料行组织切片检查,并进行免疫组织化学角蛋白染色,检测上皮细胞再生情况。
主要观察指标:骨髓间充质干细胞与膀胱脱细胞基质的生物相容性。
结果:①采用全骨髓法成功培养出骨髓间充质干细胞,行流式细胞仪检测细胞表面抗原显示,传代第3代细胞CD29阳性细胞为99.43%。②制备的膀胱脱细胞基质具有良好的生物特性,镜下见均质状态的基质和细丝状的胶原纤维。体内外相容性实验表明骨髓间充质干细胞与膀胱脱细胞基质具有良好的相容性,细胞生长状态良好。③4周后组织切片检查可见组织中较多炎症细胞浸润,胶原及弹性纤维排列紧密,免疫组织化学角蛋白染色见有薄层、不连续的单层上皮生长,8周后可见组织中已无明显炎症细胞浸润反应,胶原及弹性纤维排列紧密,免疫组织化学角蛋白染色见有薄层、连续的多层上皮生长。
结论:骨髓间充质干细胞与膀胱脱细胞基质具有良好的生物相容性,并且在体内与周围组织有良好的生物相容性,可以作为构建组织工程膀胱的材料。 相似文献
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目的:了解我院呼吸科住院病人下呼吸道感染的病原菌分布和耐药情况,为临床用药提供参考。方法:采用纸片扩散法对2004—01~2005—12我院呼吸科下呼吸道感染的住院病人痰培养阳性的病原菌进行药敏检测,按NCCLS 2003年版标准判断结果,同时对结果进行回顾性分析。结果:2a中分离出538株革兰氏阴性菌,其中以大肠埃希氏杆菌、阴沟气杆菌、绿脓假单胞菌以及肺炎克雷白杆菌为主;64株革兰氏阳性菌,以金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌为主;耐药分析显示主要革兰氏阴性菌对亚氨培南(100%)、头孢哌酮-舒巴坦(80.7%)敏感性高,其他依次为阿米卡星(59.1%)、左氧氟沙星(56.1%)、头孢他啶(53.8%);大肠埃希氏杆菌、阴沟气杆菌、肺炎克雷白杆菌中产ESBLs菌株,分别为30.4%、24.4%及29.7%;产酶菌株对除碳青酶烯类之外抗菌剂耐药率明显高于非产酶菌株,产酶菌株对亚氨培南、头孢哌酮/舒巴坦敏感性好,对阿米卡星、左氧氟沙星次之,对三代头孢高度耐药。结论:近2a来我院呼吸科下呼吸道感染住院病人的主要致病菌,是以大肠埃希氏杆菌、阴沟气杆菌、绿脓假单胞菌以及肺炎克雷白杆菌为主的革兰氏阴性菌,产ESBLs菌株的增多是革兰氏阴性菌耐药的重要原因之一,临床应合理应用抗生素。以防细菌耐药性的发生。 相似文献
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经皮肾穿刺微造瘘输尿管镜治疗上尿路结石(附156例报告) 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨经皮肾穿刺微造瘘输尿管镜治疗上尿路结石的方法及疗效。方法采用经皮肾穿刺微造瘘输尿管镜下气压弹道碎石处理上尿路结石156冽。结果156例均一期手术取石,单通道取石126例.双通道取石25例,三通道取石5例。其中1次取石120例,2次取石28冽,3次取石8例。136例结石全部取尽。平均手术时间90min,平均出血量50m1,术后平均住院时间8d。所有病例均无严重手术并发症。结论经皮。肾穿刺微造瘘取石术治疗上尿路结石具有创伤小、并发症少、疗效好、恢复快、结石清除率高等优点.值得推广应用. 相似文献
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急性脑缺血γ-氨基丁酸的磁共振质子波谱分析与研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 利用磁共振质子波谱 (1 H MRS)研究缺血后脑组织 γ-氨基丁酸 (γ-aminobutyricacid,GABA)变化的时空规律。方法 健康 SD大鼠 1 4只 ,随机分为 3组。 A组 (4只 ) ,自体血栓栓塞 1 h组 ;B组 (5只 ) ,线栓栓塞 (MCAO) 1 h组 ;C组 (5只 ) ,正常对照组。分别于栓塞后 3 0、40、5 0、60 min行1 H MRS检查 ,半定量分析兴趣区 (regionsof interest,ROIs) GABA的变化。结果 以 GABA与肌酸和磷酸肌酸 (Pcr Cr)的谱峰积分面积比值为判断指标 ,GABA在兴趣区缺血后先升高 ,后逐渐下降。其中缺血后 5 0 min,GABA/(Pcr Cr)的比值与缺血后 40 min的比值经统计学检验差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 1 H MRS为研究急性脑缺血后细胞代谢、神经递质变化提供了一个无创性、直接性、综合性的研究工具。 相似文献
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血清胰岛素样生长因子结合蛋白与肾病大鼠的生长障碍 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:探讨营养不良、肾病本身的糖皮质激素作为各自独立因素对大鼠血清胰岛素生长因子结合蛋白(ICFBPs)浓度的影响,阐明血清IGFBPs代谢紊与肾病综合片(NS)大鼠生长障碍的关系。方法:24只周龄相同体重相近的雄笥SD大鼠随机分成正常、食物对照、阿霉素现任地塞米松治疗的阿霉素肾病四组。血清IGFBPS浓度和肝脏IGFBPsmRNA表达分别采用Westernligandblot和RT-PCR法检测 相似文献
1000.
聚β-羟基烷酸酯作为一种生物降解、生物相容的微生物合成材料,具有广阔的应用前景,但其成本高、质脆,特别是加工温度区间窄,大大限制了其应用。就宾结构特点,质脆的原因,共混改性的手段、尤其是近几年混改性的进展作了综述。 相似文献