合肥市产超广谱β-内酰胺酶菌株TEM型耐药基因分布

目的了解1999-2000年合肥市多所医院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中，TEM型β-内酰胺酶基因型分布。方法酶抑制剂增强的肉汤稀释法筛选出产ESBLs细菌，PCR扩增其TEM型β-内酰胺酶编码基因片段，克隆人pGEM-Teasy载体，双脱氧链终止法测定核苷酸序列并确定TEM基因型。结果98株产ESBLs菌株中有79株产TEM型β-内酰胺酶，其中TEM-1型75株和TEM-10型4株。结论合肥市产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中存在2种TEM型β-内酰胺酶，在国内首次报道一种新的β-内酰胺酶(TEM-10)。     

多重PCR技术检测医院感染大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌质粒AmpC酶基因型别

目的了解我地区大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌携带质粒介导AmpC酶的情况及基因型别. 方法用头孢西丁耐药表型筛选阳性可疑菌株,提取耐药质粒,然后采用多重PCR技术检测是否存在质粒介导的AmpC 基因及其基因型别;并对PCR产物进行测序. 结果 7株头孢西丁耐药的大肠埃希菌多重PCR均为阴性,4株肺炎克雷伯菌中3株多重PCR阳性,测序结果均为DHA-1型质粒AmpC酶. 结论多重PCR技术是一种灵敏、特异、快速的检测质粒AmpC酶及其基因型别的好方法;采用该方法在我地区首次检测出产DHA-1型质粒AmpC酶的肺炎克雷伯菌.     

社区及医院感染中产β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌细菌耐药性及质粒分析

目的探讨社区和医院感染中产ESBLs的大肠埃希菌(ECO)和肺炎克雷伯菌(KPN)耐药性及细菌质粒谱特点. 方法药敏试验采用改良Kirby-Bauer法,细菌质粒DNA采用碱变性少量快速提取法,用χ2检测. 结果医院感染ECO耐药率明显高于社区感染(P＜0.001),ECO细菌质粒较KPN分子量大,表现多源性、多样性、分布较广,仅在ECO中发现3对同源基因质粒谱. 结论医院感染致病ECO有多源多样的细菌耐药质粒,为医院感染顽固的耐药菌,应加强医院感染易感因素控制,以防感染流行.     

企业医院产权制度改革探索

在分析企业医院现状和存在问题的基础上,介绍了企业医院产权制度改革的做法.对企业医院建立现代医院制度,提高效益和效率,推行区域卫生规划,加快产权制度改革步伐,促进企业医院发展进行了思考.     

肾移植术后医院感染的临床特点

目的探讨肾移植术后患者医院感染特点及其危险因素. 方法对92例同种异体肾移植住院患者回顾性调查,分感染组与非感染组,调查医院感染特点及对照分析临床危险因素. 结果 92例术后患者有44例70例次医院感染,感染率47.8%,例次感染率为76.1%;主要病原微生物G 菌占47.7%,有金黄色葡萄球菌和肠球菌属;其次G-菌占31.8%,有大肠埃希菌、克雷伯菌属、阴沟肠杆菌及假单胞菌属和真菌(20.5%), 并检出2例卡氏肺孢子虫;感染重点部位为肺、上呼吸道、泌尿道、口腔和伤口等;危险因素中术前血透时间、术程、留置尿管时间和长期住院、第三代头孢菌素应用与医院感染关系密切. 结论控制上述危险因素可以预防医院感染的发生.     

电刺激迷走神经对内毒素休克大鼠血压的影响

目的研究电刺激迷走神经对内毒素(LPS)休克大鼠血压的影响. 方法 4组雄性Wistar大鼠,切断大鼠双侧颈部迷走神经干或做假手术对照,将左侧迷走神经干远端连接刺激电极,于静脉滴注LPS(10mg*kg-1)即刻持续电刺激(5V、2ms、1Hz),同时监测平均动脉压(MABP),并于静脉滴注LPS后1 h检测各组血TNF-α及皮质醇水平. 结果迷走神经电刺激能缓解LPS引起的低血压休克,同时使血TNF-α水平较LPS组显著降低(105.39±21.52) pg/ml,较(129.80±26.56) pg/ml,P<0.05;迷走神经切断能加快LPS休克的产生,使MABP下降50%的时间提前(9.65±0.53) min比(25.72±3.07) min,P<0.05,且使血TNF-α水平显著上升(159.07±21.94) pg/ml比(129.80±26.56) pg/ml,P<0.01,血皮质醇水平显著下降(34.89±3.14) ng/ml比(42.83±2.88) ng/ml,P<0.01. 结论电刺激迷走神经可以改善LPS休克大鼠的低血压,而切断迷走神经可使休克症状加重,这种现象与迷走神经影响体内炎症介质的合成与皮质激素的分泌有关.     

泛素水解酶22调控丝裂原活化蛋白激酶激酶6基因的转录活性

目的：克隆丝裂原活化蛋白激酶激酶6(mitogen-activated protein kinase kinase 6,MKK6)基因启动子,研究泛 素水解酶22(ubiquitin specific peptidase 22,USP22)对MKK6转录活性的调控作用。方法：采用PCR扩增MKK6基因启动 子片段,并以该片段为模板对USP22结合位点进行定点突变,将野生型与突变型启动子片段定向插入荧光素酶表达 载体pGL3-Basic;用重组载体与内参质粒pRL-TK共转染HeLa细胞,行双荧光素酶活性检测以确定其转录活性;利用 染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)实验观察USP22蛋白与MKK6启动子是否存在直接的结合;下 调USP22表达后,检测MKK6转录活性的变化。结果：成功扩增MKK6启动子及其突变体并构建荧光素酶表达载体; USP22结合位点的突变导致该启动子活性在HeLa细胞中明显降低(P<0.05);USP22与MKK6启动子在细胞中存在直接结 合;抑制USP22的表达导致MKK6转录水平明显下降(P<0.05)。结论：在HeLa细胞中,USP22有效地调控MKK6基因的 转录。     

Alopecurone B逆转人乳腺癌细胞MCF-7阿霉素耐药株活性研究

目的 研究黄酮化合物Alopecurone B（APB）对人乳腺癌细胞阿霉素耐药株MCF-7/ADR多药耐药的逆转活性及逆转机制。方法 人乳腺癌细胞阿霉素耐药株MCF-7/ADR维持在含有250 ng/mL阿霉素的培养基中,使用MTT法、qPCR、Western blot和流式细胞术研究APB对耐药株P-糖蛋白(P-gp)功能和表达的影响。结果 APB能逆转MCF-7/ADR细胞多药耐药,抑制P-gp的功能,下调P-gp基因和蛋白的表达。结论 APB具有强效逆转人乳腺癌细胞MCF-7/ADR多药耐药的效果,其机制涉及对P-gp的调控。      

基于Keap1/Nfr2/ARE信号通路研究机械相关性肺损伤分子机制

  目的  探索基于Keap1/Nfr2/ARE信号通路探索呼吸机相关肺损伤（ventilation induced lung injury,VILI）形成的分子机制。  方法  给予SD大鼠过度机械通气建造VILI模型;HE染色检测对照组、正常潮气量（VT）组（VT为8 mL/kg）、大VT组（VT为40 mL/kg）肺组织病理变化;检测各组肺组织湿重/干重（W/D）比值变化;BCA法检测各组支气管肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白的变化;ELISA法检测各组BALF和血清中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素-8（IL-18）以及肺组织中8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）的水平变化;TBA法检测肺组织中丙二醛（MDA）水平变化;Western bloting实验检测巨噬细胞中Nod样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、caspase-1蛋白以及肺组织中Keap1、Nrf2蛋白的变化;逆转录PCR检测各组肺组织中SOD mRNA、HO-1 mRNA表达变化。  结果  过度机械通气可损伤肺组织,导致肺泡破裂、炎症细胞浸润和红细胞增多;与对照组和正常VT组相比,大VT组肺组织W/D值、8-OHdG和MDA水平、BALF中总蛋白、IL-1β、IL-18以及血清中IL-1β、IL-18水平均显著上升（P均<0.05）,肺泡巨噬细胞中NLRP3、ASC、caspase-1蛋白以及肺组织中Keap1蛋白表达上升（P均<0.05）,肺组织中Nrf2蛋白、SOD mRNA、HO-1 mRNA表达下降。  结论  大VT通气可以使肺组织发生急性炎症性损伤并导致VILI的发生,其机制为过度通气引起Keap1/Nrf2-ARE通路抑制和活性氧（ROS）清除能力的下降,进而引起肺巨噬细胞产生NLRP3炎症小体,参与VILI的形成。     

Catquest-8SF量表分析年龄相关性白内障患者的效果

目的：应用Catquest-8SF量表研究PHACO+SIOL植入术患者主观报告的效果,评估Catquest-8SF量表在中国北方白内障人群的适用性及其对白内障手术的敏感性。

方法：前瞻性临床病例随访研究。泰安市中心医院白内障患者术前和术后3mo完成面对面的Catquest-8SF量表填写。

结果：术前共120例白内障患者完成了Catquest-8SF量表。术前Catquest-8SF量表得分与术前双眼加权logMAR视力及年龄呈显著负相关(P<0.05),与文化程度呈正相关(P<0.001),无全身合并症的患者量表得分高于有全身合并症的患者(P<0.05)。102名(85%)患者完成术后3mo量表,单眼手术组和双眼手术组比较,术后视力均显著提高(t=10.404, P<0.001),术后量表得分均明显提高(P<0.001)。两组在量表得分提高值上差异无统计学意义。92.2%的患者对手术效果满意。满意度与量表得分的提高值显著相关(P<0.05)。

结论：中文版Catquest-8SF量表在我国北方ARC人群中适用性好,简短高效,可以作为白内障常规临床评估的一部分。