雷帕霉素对肥胖小鼠卵巢功能的影响

目的：研究雷帕霉素对母源性肥胖导致的卵巢功能异常的干预作用以及药物的安全性评估。方法：建立一种高脂饮食的雌性肥胖小鼠模型,然后随机分为注射雷帕霉素的处理组和注射PBS的对照组,24周后统计其排卵数目,收集卵母细胞进行纺锤体免疫荧光染色,以评估雷帕霉素对肥胖小鼠排卵功能及卵母细胞质量的影响,并通过蛋白免疫印迹分析和RT?qPCR分析检测卵巢相关基因在蛋白和mRNA表达水平的变化。结果：雷帕霉素处理的肥胖小鼠体重下降,其卵巢磷酸化核糖体蛋白（phosphorylated ribosomal protein 6,P?rps6）和磷酸化起始因子4E结合蛋白（phosphorylated 4E binding protein 1,P?4EBP1）的表达明显降低,且超排的卵母细胞数目与对照相比有增加趋势,但卵母细胞纺锤体染色结果显示卵母细胞质量无明显差异;处理后的卵巢肿瘤坏死因子（tumor necrosis factorα,TNF?α）的mRNA表达水平增加;血清中雌激素和促卵泡激素都无明显变化。结论：雷帕霉素有改善排卵功能的趋势,尚未发现对卵母细胞质量有明显影响,为未来研究雷帕霉素对肥胖女性生育力的影响提供了实验基础。     

COL6A2基因3′-UTR区域功能单核苷酸多态性位点rs1044598参与miR-4252调节中国汉族人群先天性房间隔缺损

目的:探讨COL6A2基因3′非翻译区(3′-UTR)单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点对先天性房间隔缺损(congenital atrial septal defect,ASD)发病风险的影响及其可能的作用机制?方法:搜索PubMed及Hapmap数据库获得COL6A2基因3′-UTR区域中国汉族人群最小等位基因频率>0.05的SNP位点,随后通过miRNA-SNP功能网站预测SNP位点的功能情况并与本课题组前期ASD全基因组关联研究数据库比对,研究SNP位点与ASD的发病关联,最后对可能的功能位点进行功能学研究?结果:rs1044598位点AA基因型较野生TT基因型显著减少了36%的患病风险?HEK293T细胞?H9C2细胞以及SD乳鼠原代心肌细胞荧光素酶报告基因转染实验证实,miR-4252与COL6A2基因rs1044598不同基因型表达质粒共转染后,荧光强度在3个细胞系中均有显著差异 (P < 0.05)?结论:COL6A2基因rs1044598位点的变异可能与ASD的发病风险相关?miR-4252可通过与COL6A2的3′-UTR区域发生有效结合而下调基因的表达,而rs1044598位点的变异参与这一机制并减少ASD的发生?     

漂白处理对树脂充填体边缘微渗漏的影响

目的:评价35%过氧化氢凝胶对树脂充填体边缘微渗漏的影响。方法:选择离体上颌第三磨牙40颗,在颊面制备Ⅴ类洞复合树脂分层充填,光照固化抛光后按处理时间随机分为4组(n=10):A(对照组)、B(10 min)、C(20 min)、D(30min)。将凝胶涂布于充填体表面进行漂白处理后冷热循环500次,再用2%亚甲蓝溶液染色24 h,沿颊舌纵向剖开,体式显微镜观察并记录染料渗入深度。用Kruskal-Wallis法进行数据分析;Mann-Whitney法组间两两比较,检验水准均为α=0.05。结果:不同漂白处理时间对树脂充填体边缘微渗漏的影响有统计学意义(P<0.05);组间比较显示A与C、A与D、B与D、C与D间差异有统计学意义。结论:35%过氧化氢凝胶漂白处理使复合树脂充填体的边缘微渗漏程度增加。     

上鼓室重建及鼓室成形术在开放式乳突根治中的应用

目的 探讨重建上鼓室外侧壁在开放式乳突根治中的意义。方法 选择开放式乳突根治的病人，同时应用同种异体鼻中隔软骨或自体乳突皮质骨，重建上鼓室外侧壁，完成上鼓室成形术20例。结果 20例手术均获得干耳，术后3～6个月平均气导听力提高20dB以上4耳，l0～20dB 13耳。结论 应用同种异体鼻中隔软骨或自体乳突皮质骨，重建上鼓室外侧壁，能改善行开放式乳突根治病人的听力。     

糖尿病性视网膜病变的血液流变学改变

目的探讨糖尿病视网膜病变患者的血液流变学变化。方法对２６例糖尿病视网膜病变（ＤＲ）患者、３２例糖尿病眼底正常者（ＮＤＲ）和３１例正常人（对照组）进行血液流变学测定。结果ＤＲ组的全血粘度、血浆粘度、血沉均高于ＮＤＲ组。结论血液粘度的升高与ＤＲ的发生有关。     

HPLC测定理气健脾颗粒中橙皮苷的含量

目的:建立HPLC测定理气健脾颗粒中橙皮苷的含量。方法:色谱柱:Beckman ODS C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-0.2%磷酸(20∶80);流速:1.0mL·min-1;检测波长:284nm。结果:橙皮苷进样量的线性范围0.040~0.40μg(r=0.9998),平均加样回收率为100.49%,RSD=1.66%(n=6)。结论:本法灵敏、准确、快速,可用于理气健脾颗粒的质量控制。     

茵陈对肝内胆汁淤积湿热证大鼠利胆退黄作用机制的研究

目的通过研究茵陈对肝内胆汁淤积湿热证大鼠肝组织中胆盐输出泵(BSEP)基因表达的影响,从分子水平探讨茵陈利胆退黄的作用机制。方法 45只雄性SD大鼠随机分为3组:正常组、模型对照组和茵陈组。检测治疗后大鼠血清生化指标、肝脏组织病理的变化和肝脏BSEP的表达。结果治疗后茵陈组大鼠体质量增加明显高于模型对照组(P<0.05)。茵陈组大鼠血清TB、DB、ALT、AST、ALP、TBA浓度低于模型对照组(P<0.05);HE染色显示茵陈组大鼠肝脏的病理损害轻于模型对照组。免疫组织化学染色显示茵陈组大鼠比模型对照组有更多的BSEP阳性细胞。荧光定量RT-PCR法显示模型对照组大鼠肝组织中BSEP mRNA表达明显低于茵陈组(P<0.05)。结论茵陈能有效改善肝内胆汁淤积湿热证大鼠的肝功能、减轻病理损害,并能上调肝脏BSEP的表达。     

曲美他嗪对急性前壁心肌梗死心肌缺血再灌注损伤的保护作用

 目的 观察急性前壁心肌梗死患者应用曲美他嗪(trimetazidine, TMZ)对急诊经皮冠状动脉介入治疗术(percutaneous coronary interventions, PCI)后心肌缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion, I/R)的保护作用。方法 266例初发ST段抬高型急性前壁心肌梗死患者随机分为曲美他嗪组(132例)和对照组(134例)。曲美他嗪组于确诊急性心肌梗死后即刻给予负荷剂量曲美他嗪(60 mg),术后继续应用曲美他嗪(20 mg,3/d)3个月。记录两组患者PCI术中TIMI血流分级和TIMI心肌组织灌注分级(TIMI myocardial perfusiongrade, TMPG)。术后24 h分别测定两组患者血清肌钙蛋白I(cTNI)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平。在PCI术前及术后1、3个月分别超声心动图测量左室射血分数。结果 与对照组相比,曲美他嗪组PCI术中血流达到TIMI-3级和TMPG-3级例数较多,术后24 h心肌酶TNI[(17.04±1.71)ng/ml vs(14.39±1.42)ng/ml,P=0.001]、CKMB[(90.32±9.26)U/L vs (82.55±8.04)U/L,P=0.001]较显著降低。PCI术后3个月,曲美他嗪组患者左室射血分数明显优于对照组[(54.81±3.27)%比(52.26±2.55)%,P=0.001]。结论 急性前壁心肌梗死患者早期应用曲美他嗪能降低PCI术中心肌缺血再灌注损伤,长期应用曲美他嗪能够改善远期心脏功能。     

自噬相关基因Atg12和LC3-Ⅱ在脑缺血再灌注大脑表达的实验研究

目的：探讨局灶性脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia reperfusion injury,CIR）时大脑皮质自噬相关蛋白-12（autophagy related protein-12,Atg12）和自噬微管相关蛋白轻链3抗体Ⅱ（autophagy microtubule-associated protein light chain 3 antibodyⅡ,LC3-Ⅱ）的激活规律,在此基础上探讨其对脑组织自噬的影响。方法：实验分为假手术组（sham组）和缺血再灌注组（CIR组）,且CIR组下设CIR 0、6、12、24、48、72h共6个亚组。除sham组和CIR 24h组为每组20只外（其中10只用于模型鉴定）,其余为每组10只。采用大脑中动脉栓塞术制备局灶性脑缺血再灌注模型,再灌注24 h后采用神经功能评分、2,3,5-三苯基氯化四氮唑（2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC）染色、脑组织含水量来鉴定脑缺血模型是否成功。采用免疫组化和免疫印迹方法检测大脑皮质Atg12和LC3-Ⅱ的表达规律。结果：与sham组比较,CIR 24h组可见明显的神经功能缺损、脑梗死和明显的脑水肿。免疫组化结果显示,Atg12和LC3-Ⅱ在大鼠脑缺血再灌注6 h开始表达[阳性率分别为（15.49±4.18）%、（18.54±3.62）%],在24~48 h达高峰[（33.63±3.26）%、（29.62±1.73）%],72 h之后逐渐减弱[（24.90±3.96）%、（20.36±3.51）%]。免疫印迹结果显示,Atg12和LC3-Ⅱ在大鼠脑缺血再灌注6 h开始表达[表达量为（0.372 3±0.076 5）、（0.148 4±0.011 5）],在24~48 h达高峰[（0.741 7±0.071 8）、（0.451 3±0.019 0）],72 h之后逐渐减弱[（0.365 0±0.042 0）、（0.245 1±0.030 3）]。结论：脑缺血时Atg12和LC3-Ⅱ在调节脑缺血的脑组织自噬方式中具有重要的作用。