大鼠小肠上皮细胞的体外原代培养

目的：探讨大鼠小肠上皮细胞原代培养的原理与方法以及培养过程中常见的问题和克服办法。方法：取生后1周SD大鼠的小肠上皮细胞，经分离纯化后进行原代培养。结果与结论：胶原酶Ⅺ型和中性蛋白酶Ⅰ型配合使用，可以分离到形态完整、容易贴壁生长的小肠绒毛细胞团。进一步利用离心技术纯化得到95％以上的小肠上皮细胞。结果显示，常规体外培养的肠上皮细胞是否增殖分化最终决定于用酶消化后的结构完整性，如果用0．25％胰酶消化，则细胞受损程度较大，不易贴壁生长。     

吻合腓肠浅动脉的游离小腿后侧皮瓣修复手掌软组织及神经缺损

目的 探讨修复手掌软组织及神经同时缺损的新方法。方法 利用吻合腓肠浅动脉的游离小腿后侧皮瓣修复手掌软组织及神经缺损6例。结果 临床应用6例，全部成活，术后10～13个月随访，皮瓣外形近似正常手掌，两点辨别觉为5mm，感觉为S4；患指感觉恢复为S3两例，S4四例。结论 利用吻合腓肠浅动脉皮瓣修复手掌软组织及神经缺损是理想的方法。     

肝素膀胱灌注治疗间质性膀胱炎

目的　观察肝素膀胱灌注治疗间质性膀胱炎的疗效。　方法　 17例间质性膀胱炎患者 ,均为女性。平均年龄 35岁。平均病程 2 7个月。临床表现主要为尿频及膀胱区疼痛。膀胱镜检见黏膜下点状出血 15例 ,Hunner溃疡 2例。按O’Leary Sant间质性膀胱炎症状评分 (ICSI) 8～ 18分 ,平均 (13.4± 3.5 )分 ;问题评分 (ICPI) 3～ 12分 ,平均 (8.2± 3.4 )分。所有患者均使用肝素钠 10 5U膀胱灌注 ,每周 3次 ,疗程 4周。观察治疗后患者症状改善情况。　结果　 17例患者随访 3～ 12个月 ,平均 6个月 ,症状缓解 14例 ,其中症状显著缓解或消失 9例 ,评分下降 7分 ;症状部分缓解 5例 ,评分下降 >3分 ;无效 3例。 2例于治疗 7个月及 9个月症状复发。有效率 82 %。治疗后 1、2个月ICSI分别降至 (6 .1± 3.4 )、(6 .3± 3.5 )分 ,ICPI分别降至 (3.5± 2 .9)、(3.6± 2 .7)分 ,治疗前后比较差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。治疗期间发生一过性尿道灼痛者 2例 ,轻微肉眼血尿 1例。　结论　肝素膀胱灌注治疗可有效缓解间质性膀胱炎患者症状 ,提高生活质量。     

温血高钾间断灌注心肌保护的临床应用

目的　探讨浅低温体外循环 (CPB)温血间断灌注心肌保护的临床效果。方法　全组随机分为对照组 (A组 )6 8例 ,采用浅低温CPB温血高钾持续灌注心肌保护。实验组 (B组 ) 91例 ,采用浅低温CPB温血高钾间断灌注心肌保护。观察两组术中心肌保护效果的差别。结果　CPB时间、主动脉阻断时间B组明显小于A组 (P <0 .0 5 ) ;库血用量和 2 4h胸腔引流量B组明显少于A组 (P <0 .0 5 ) ;主动脉开放前血钾浓度B组明显低于A组 (P <0 .0 5 ) ;主动脉开放后心脏自动复跳率B组明显高于A组 (P <0 .0 5 ) ;术后心功能临床观察两组无显著差异。结论　浅低温CPB温血高钾间断灌注保护心肌效果良好。     

Brevibacterium sp.DGCDC-82发酵罐中生产胆固醇氧化酶

用Brevibacterium sp.DGCDC-82在7L发酵罐中分批培养.分别对添加剂吐温-80、培养温度、培养基的pH、通风量和搅拌速度在胆固醇氧化酶的生产中的影响进行了研究.结果显示以上条件均对产酶有影响.在不同的发酵阶段改变发酵操作条件,发酵20 h最高酶活可达1203U/L,生产强度可达60 U/(L·h).既有效地提高了胆固醇氧化酶的产量,又防止了发酵过程中的泡沫外溢.     

P_(27)、PCNA与IgA肾病中医证型及病理类型的关系

目的 :运用免疫组化方法研究原发性IgA肾病患者肾组织中细胞周期调控蛋白P2 7(P2 7)、增殖细胞核抗原PCNA(PCNA)的表达 ,探讨两者与IgA肾病病理分级及其与中医证型之间的关系。 方法 :选择行肾穿刺活检的IgA肾病住院患者 5 2例 ,并按照中医辨证分型标准将其分为肺肾气虚证、脾肾阳虚证、肝肾阴虚证、气阴两虚证、血瘀证、湿热证六型。系膜增生的病理组织学分为 4级。运用免疫组化方法检测P2 7、PCNA的表达。结果 :(1)IgA肾病各个病理分级P2 7、PCNA的表达两两比较有统计学意义。显示随着系膜细胞增生的病理分级程度增高 ,PCNA的表达增高 ,而P2 7的表达则按相反方向进行。病理分级和P2 7、PCNA表达的等级相关性检验 (Spearman法 )显示 :P2 7的表达与病理类型呈非常显著负相关 ,而PCNA的表达与病理类型呈显著正相关。 (2 )IgA肾病三个中医证型的病理分级之间有统计学意义 ,其中气阴两虚证的病理分级比湿热证、肝肾阴虚证高 ,湿热证与肝肾阴虚证的病理分级之间无统计学意义。 (3)随着湿热→肝肾阴虚→气阴两虚的进展 ,P2 7的表达呈现出逐渐减少的趋势 ,而PCNA的表达呈现出逐渐增加的趋势。结论 :(1)P2 7、PCNA作为判断IgA肾病肾脏组织学损伤程度和预后的指标值得深入研究。 (2 )IgA肾病中医证型之间病理分     

主动脉内球囊反搏在小儿中的应用

主动脉内球囊反搏(intraaortic balloon pump，IABP)已广泛应用于成年人心源性休克和围手术期低心排血量综合征的治疗，并取得良好的治疗效果，但在小儿中的应用仍较局限。现就有关IABP在小儿中的应用进行综述，着重分析IABP的适应证和影响在小儿中应用的技术困难和其他因素，介绍小儿IABP应用的技术要点，可能的并发症和治疗效果。在无体外膜式氧合器(ECMO)和左心辅助设备的情况下，小儿心脏直视手术后如不能脱离体外循环机或发生严重低心排血量综合征等，应用IABP治疗可收到较好的效果。     

超声观察银屑病中医分型的血管变化研究

目的　探讨银屑病中医分型皮损处与正常皮肤处血管血流的变化情况。方法　将 3 0例寻常型斑片状银屑病按中医辨证分型 ,超声观察患者正常皮肤处及皮损处浅层动脉血管、静脉血管血流情况。结果　“血热型”皮损处及正常皮肤处动脉血管增大、扩张、血流加快 ;“血瘀型”及“血燥型”未发现异常。结论　银屑病动脉血管及静脉血管增大、扩张、血流加快与中医分型“血热型”密切相关 ,这些将有助于临床根据中医分型进行辨证施治     

胶质瘤中LGI 1的突变及微卫星不稳定性研究

目的 为了检测人脑胶质瘤组织及胶质瘤细胞系LGI 1基因编码区中有无碱基突变及微卫星不稳定性(MSI)和杂合性缺失(LOH).方法 收集30例胶质瘤标本,2例脑膜瘤、2例瘤旁及2例颅脑损伤内减压脑组织标本及体外培养5个脑胶质瘤细胞系.提取组织标本及培养细胞基因组DNA.设计特异性引物分别扩增LGI 1各外显子序列,采用SSCP银染分析;扩增LGI 1微卫星序列,凝胶电泳银染分析;发现异常泳动条带进行DNA序列分析.结果 ①PCR-SSCP分析琼脂糖凝胶电泳检测有1例Ⅱ级胶质瘤标本未检测到第1 a外显子处扩增产物以及Ⅱ、Ⅲ级各1例胶质瘤标本均未检测到第8 c外显子处扩增产物.未在30例胶质瘤标本和4个脑胶质瘤细胞系中检测到电泳条带异常,在细胞系TJ905第5外显子处检测到电泳条带异常,经DNA测序分析证实确有突变.②在30例胶质瘤标本及5个细胞系中均未检测到MSI和LOH.结论 基因突变及MSI和LOH可能不是LGI 1在胶质瘤恶性进展过程中失活的主要原因.     

踝部开放性骨折的急症手术治疗

目的探讨踝部开放性骨折的损伤特点及相关的急症手术技术特点。方法2001年8月至2006年4月，急症手术治疗踝部开放性骨折51例，男39例，女12例；年龄18-72岁，平均36岁。伤口Gustilo分度，Ⅰ度3例，Ⅱ度37例，ⅢA度7例，ⅢB度3例，ⅢC度1例。急诊给予有效抗生素治疗，尽早开始手术。冲洗及彻底清创后，根据骨折类型、粉碎程度及伤口情况制定骨折处理的顺序，依次完成骨折复位、固定。结果48例患者获得随访，随访时间8-48个月，平均26个月。无一例发生深部感染。12例伤口发生浅表皮缘坏死，2例伤口延迟愈合，2例伤口发生浅表感染。踝部骨折在10-18周（平均13周）愈合。采用AOFAS踝后足功能评分标准，48例评分在76-100分，平均90分。结论踝部开放性骨折在急症手术时应彻底清创，注意保护皮肤活力。在处理后踝骨折时，可采用胫骨远端脱出法。多数手术应先精确复位、固定外踝骨折，对旋后内收型、外踝严重粉碎的踝部骨折应先进行内踝骨折的复位、固定。对严重的下胫腓联合分离，应直视下复位且常规使用下胫腓螺钉固定。