利用CRISPR/Cas9技术建立RelB敲除小鼠模型

目的：利用CRISP/Cas9技术敲除C57BL/6小鼠中的RelB基因,为核因子（nuclear factor,NF）?κB转录因子蛋白家族的RelB基因与肿瘤转移等方面的研究提供RelB基因敲除实验动物模型。方法：利用基因编辑技术CRISPR/Cas9系统,设计并构建针对目的基因RelB第4外显子sgRNA,同时利用T7 RNA聚合酶体外转录Cas9 mRNA。取C57BL/6小鼠受精卵体外注射sgRNA和Cas9 mRNA后,进行胚胎移植,实现靶基因敲除。待小鼠出生后提取DNA并进行PCR鉴定,获得F0代,后与野生型交配后繁殖,取样提取DNA,测序分析鉴定后获得F1代小鼠,并在蛋白质水平和基因组水平分别验证敲除效果。结果：获得了4个在RelB基因突变的首建鼠,并得到了稳定遗传的RelB基因敲除小鼠。基因组测序结果示,敲除实验组中RelB的mRNA出现无义突变,令其mRNA翻译终止。与对照组相比,敲除实验组检测不到RelB蛋白表达。同时,Western blot结果显示,NF?κB家族中其他成员RelA、p50和p52的蛋白表达不受影响。结论：成功获得特异性敲除RelB的C57BL/6小鼠,为RelB在肿瘤转移、耐药中的研究提供了重要工具。     

数据挖掘法探讨周珉教授治疗原发性肝癌用药规律及经验总结

[目的]数据挖掘法分析周珉教授治疗原发性肝癌的中医用药规律，探讨相关病机并进行经验总结。[方法]收集2016年2月—2018年5月周珉教授门诊期间治疗原发性肝癌的方剂，运用“中医传承辅助系统（V2.50）”进行数据挖掘，并结合周珉教授临床经验，进行原发性肝癌病机探讨及用药规律分析。[结果]共收集治疗原发性肝癌方剂176首，涉及中药235种，列出方剂中的高频药物及组合规律。[结论]总结原发性肝癌以“湿热痰毒、气阴两伤”为基础病机，“清热化湿、健脾养阴”治则贯穿原发性肝癌治疗始末，同时，根据疾病不同发展阶段及治疗措施，权衡“扶正”与“祛邪”的主次分配，斟酌应用“攻毒散结”“行气化瘀”等治法，以达到改善患者生活质量、延缓疾病进展的目的。     

RECK、MMP 9在三阴性乳腺癌组织芯片中的表达及临床意义

【摘要】 目的 探讨基质金属蛋白酶抑制剂(RECK)、基质金属蛋白酶 9(MMP 9)在三阴性乳腺癌（TNBC）组织、癌旁组织中的表达及与TNBC临床病理的关系。方法 选择绵阳市中心医院乳腺外科2011年5月~2013年7月经病理证实为TNBC的72例石蜡标本及同 患者癌旁组织,利用免疫组化组织芯片技术检测其RECK、MMP 9蛋白的表达。结果 RECK在TNBC组织及癌旁组织中阳性表达率分别为4306%、8056%（P=0000）。TNBC中RECK的表达与临床分期（P=0009）、组织学分级（P=0010）、腋窝淋巴结转移情况（P=0000）相关。MMP 9在TNBC组织及癌旁组织中阳性表达率分别为625%、1528%（P=0000）。TNBC中MMP 9的表达与肿瘤大小（P=0017）、临床分期（P=0001）、组织学分级（P=0001）、腋窝淋巴结转移状况（P=0001）、Ki 67表达情况（P=0034）相关。TNBC中RECK与MMP 9表达呈负相关(r= 0195,P＜005)。结论 RECK的表达缺失与MMP 9过度表达与TNBC浸润、转移有关,有望成为TNBC的预后指标,并且有可能成为TNBC治疗的靶点。     

肠内营养支持在食管癌围手术期中的应用效果

【摘要】 目的 探析肠内营养支持在食管癌围手术期中的应用效果。方法 选择2017年12月～2018年10月在我院接受手术治疗的84例食管癌患者作为研究对象,按随机数字表法分为对照组和观察组,每组各42例。对照组术后行肠外营养支持,观察组术后行肠内营养支持,比较两组患者的营养指标、免疫功能以及术后康复状况。结果 术后第1d,两组患者的转铁蛋白(IF)、血清白蛋白(ALF)、血清总蛋白(TP)以及体质量指数(BMI)比较均无显著性的差异（P＞0.05）;术后第8d,观察组的上述营养指标均显著高于对照组（P＜0.05）,且观察组术后第8d的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IgA、IgM、IgG水平均明显优于对照组（P＜0.05）;观察组术后并发症发生率较对照组低,住院时间较对照组明显缩短（P＜0.05）。 结论 对食管癌围手术期患者实施肠内营养支持能够有效改善其营养状况,提高机体免疫力,有利于促进患者术后康复,可在临床推广应用。     

The Effect of Silica Dust Exposure on the Serum Clara Cell Protein 16 Levels in Chinese Workers

<正>Pneumoconiosis is a systemic occupational disease that commonly manifests as diffuse fibrosis of the lungs caused by long-term inhalation of silica dust in the production process. The development of pneumoconiosis is a chronic and progressive process; once it occurs, it is irreversible, and gradually develops into lung injury and respiratory failure, and can cause death regardless of exposure to dust. The     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨复方土贝母对裸鼠乳腺癌移植瘤的影响

[目的]研究复方土贝母对裸鼠乳腺癌移植瘤生长以及对Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的影响。[方法]40只4～5周龄雌性BALB/C裸鼠皮下接种1×10~7/mL MCF-7细胞悬液0.2mL/只,造模后随机分为荷瘤对照组、复方土贝母低、中、高剂量组。复方土贝母各剂量组分别以0.5、1.0、2.0g·m L~(-1)的复方土贝母连续灌胃30d,对照组予0.9%氯化钠溶液灌胃,灌胃容积均为0.6mL/20g。所有小鼠第30天处死,测量各组移植瘤体积,并计算抑瘤率。实时荧光定量PCR检测β-连环蛋白(β-catenin)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)mRNA表达水平,Western blot和免疫组化检测β-catenin、E-cadherin、Vimentin蛋白表达水平。[结果]复方土贝母低、中、高剂量组抑瘤率分别为10.56%、37.06%、33.17%,中、高剂量组移植瘤体积小于荷瘤对照组,差异有统计学意义(P0.05),复方土贝母各剂量组的β-catenin、Vimentin m RNA表达低于荷瘤对照组,E-cadherin mRNA表达高于荷瘤对照组,差异有统计学意义(P0.05)。中、高剂量组β-catenin、Vimentin蛋白表达低于荷瘤对照组,E-cadherin蛋白表达高于荷瘤对照组,差异有统计学意义(P0.05)。[结论]复方土贝母能抑制乳腺癌移植瘤的生长,可能与抑制肿瘤中β-catenin、Vimentin的表达,上调E-cadherin表达有关。     

调补肺肾方对慢性阻塞性肺疾病合并气管支气管软化症患者肺功能和生活质量的影响

目的:探讨调补肺肾方对慢性阻塞性肺疾病合并气管支气管患者肺功能和生活质量的影响。方法:分析我科从2016年3月～2017年12月诊治的60例慢阻肺合并气管支气管软化症患者临床资料。根据入院先后及是否采用中医治疗分为对照组和观察组,2组各30例。对照组采用单纯西医对症治疗组,包括:轻度软化症患者常规给予沙美特罗替卡松(50/250 ug)2吸bid,或布地奈德福莫特罗(160/4.5 ug)2吸bid,或联合噻托溴铵(18 ug)1吸qd;中度患者在常规治疗基础上给予无创呼吸机辅助通气(模式BiPAP或CPAP),重度患者酌情给予气道支架植入,肺部感染患者给予抗感染治疗。观察组在对照组基础上加用中医调补肺肾方水煎剂,1剂/d, 3次/d。统计分析2组患者治疗前后肺功能、C反应蛋白(CRP, C-reactive Protein)、降钙素原(PCT, Procalcitonin)、改良英国医学研究学会呼吸困难指数(mMRC, Modified British Medical Research Council)、慢阻肺评估测试(CAT, Chronic Obstructive Pulmonary Disease Assessment Test)变化。结果:研究显示,与基线值比较,对照组与观察组都能改善患者肺功能FEV1值,降低CRP及PCT,改善呼吸困难指数及CAT评分,差异有统计学意义;但在改善FEV1/FVC、RV/TLC、DLCO、PO_2及PCO_2方面无统计学差异。组间比较显示,观察组较对照组能更好改善患者PO_2、mMRC及CAT评分,能进一步改善患者生活质量,差异有统计学意义,但2组在改善肺功能FEV1、FEV1/FVC、RV/TLC、DLCO及PCO2上无统计学意义。结论:调补肺肾方治疗慢阻肺合并气管支气管软化症疗效肯定,值得进一步研究。     

89例下肢瘢痕癌的诊治体会

目的：总结下肢瘢痕癌的临床特点及其诊治方法。方法：回顾性分析中南大学湘雅医院烧伤重建外科 1998年1月至2017年12月收治的89例下肢瘢痕癌患者的临床资料,包括人口统计学、致伤因素、癌变潜伏期、病变部 位、溃疡面积、病理类型、骨质侵犯、淋巴结转移情况、手术方式、修复方法与预后等。结果：89例下肢瘢痕癌患 者中,男70例,女19例;最常见致伤因素依次为火焰烧伤(42例)、创伤(19例)、烫伤(12例)。病变最常见于小腿(31 例),其次为大腿(11例)、足跟(11例);溃疡面积为1.5~600.0 cm2 。其中鳞状细胞癌80例、疣状癌8例、肉瘤1例。术前 发现腹股沟淋巴结肿大78例,行腹股沟淋巴结清扫49例,单纯淋巴结活检、切除29例;9例发现淋巴结转移,8例有 骨质侵犯;24例行截肢术,53例行病灶扩大切除皮片移植术,12例行病灶扩大切除皮瓣修复术。65例得到随访,8例 出现复发,其中截肢者2例,扩大切除者6例,且肿瘤复发与手术方式无关(P>0.05)。结论：下肢瘢痕癌复发转移率较 高,需早期发现、早期诊断,应尽早手术治疗并定期随访;腹股沟淋巴结肿大较常见,需行淋巴结活检、切除或清 扫;局部扩大切除、植皮或皮瓣修复是其主要治疗方法,但癌肿较大、侵犯较深且下肢瘢痕广泛、畸形严重者可考 虑截肢。     

基于微信平台的骨科临床实习教学设计与实践

目的　评价基于微信平台的骨科临床实践教学的设计实施效果。方法　选取2015年9月至2017年8月在我院骨科实习的62名临床医学专业本科生为教学对象;随机分为实验组和对照组,每组31人。对照组按照大纲要求实施传统教学;实验组在传统教学基础上,进行相关课程的微信资源制作、推送、交流学习。出科时两组学生均行理论和操作考试、综合素质评定、对教师教学工作的评价以及问卷调查;运用SAS 9.0进行统计,组间比较行t检验或CMH-卡方检验。结果　实验组学生的理论考试成绩[（87.52±5.45） vs. （82.61±7.70）]、操作考试成绩[（94.36±2.60） vs. （92.26±3.01）]、综合素质评分[（95.94±1.61） vs. （93.42±2.81）]、对教师教学的评分[（94.58±2.06） vs. （92.55±1.69）]均优于对照组,且差异有统计学意义（P<0.05）。问卷调查显示,实验组在自身学习动力（P=0.035）、文献学习情况（P=0.013）、课程安排（P=0.007）、教师教学满意度（P=0.029）、对专业的认可度（P=0.040）方面的评价优于对照组。结论　基于微信平台的骨科临床实践教学有效可行,有助于提高学生的学习主动性,帮助学生掌握有效的学习策略,值得推广应用。     

光镜组织切片结合数字切片在显微形态学实验教学中的应用

组织学教学需要将理论与实验紧密结合起来,促进学生学习机体的微观形态及相关功能。通过对比总结传统光镜组织切片与新兴数字切片的优势与局限,在显微形态学实验中采用光镜组织切片与数字切片相结合的教学;将每次实验课程(3~4学时)划分成教学录像观看、光镜组织切片与数字切片相结合观察、课程内容讨论、随机随堂测验四部分。该教学增加了学生的学习兴趣与能动性,提升了教师的教学效率,提高了整体教学质量。