激光捕获显微切割结合RNA线性扩增技术在膀胱移行细胞癌相关基因研究中的应用

目的当对有间质细胞混杂的膀胱移行上皮细胞与膀胱移行细胞癌进行基因差异表达分析时,激光捕获显微切割技术(lasercap-turemicrodissection,LCM)是不可缺少的,然而从LCM所得的细胞中获取足够RNA量相当困难。本文首次将LCM与RNA线性扩增结合用于膀胱癌相关基因研究,目的是确定一条切实可行的技术路线,将膀胱移行上皮细胞从膀胱粘膜中分离出来,将膀胱癌细胞从肿瘤间质细胞中分离出来,并对其进行RNA体外线性扩增,以备进一步研究。方法采用LCM技术分别从正常膀胱粘膜及膀胱癌组织冰冻切片中获取膀胱移行上皮细胞及膀胱癌细胞,提取RNA,并对微量RNA进行体外线性扩增。然后用RT-PCR验证扩增前、后RNA中β-actin基因表达水平。结果对照实验I证实经LCM后RNA完整性较好;经对照实验Ⅱ初步确定设定条件下LCMshooting次数与可获得RNA量间对应关系。从膀胱粘膜种捕获膀胱移行上皮细胞25万shootings;从膀胱癌组织中获取癌细胞20万shootings。产物RNA扩增后获得片段大小为0.5-2.5kh的aRNA,且β-actin基因表达表达完整。结论LCM结合RNA体外线性扩增技术能成功地获取较为单一的研究目的细胞,扩增后RNA完整性较好,能用于进一步研究中。     

中医论治不寐

不寐，是指经常不能获得正常睡眠为特征的一种病症。表现为入睡困难，时常觉醒，睡而不稳或醒后不能再睡：晨醒过早，夜不能睡；睡眠时间不足5小时。临床常伴有心悸、多梦、健忘、记忆力下降、遗精、月经不调等证候群。近年来，对失眠的报道较多，但大多数各自为政，所用的治疗方法和用药是个人经验。现将近年来所报道的进行综述，以供临床用药参考。     

三七总皂苷注射液HPLC指纹图谱的比较分析

目的:用高效液相色谱法测定不同提取方法的三七总皂苷及注射液的指纹图谱.方法:乙腈-水二元梯度洗脱.ZORBAX Eclipse XDB-C18柱,0～6min,乙腈20%→30%;6～14min,乙腈30%→40%;14-25min,乙腈40%→30%;25～30min,乙腈30%→20%.流速1.0mL·min-1,检测波长203nm;进样量20μL,柱温为40℃.结果:三七总皂苷注射液的指纹图谱中发现并确定了7个共有峰,以三七皂苷R1为参比峰,其余6峰的相对保留时间分别为(1.146±0.1)%,(2.137±0.2)%,(2.204±1.1)%,(2.352±0.9)%,(2.447±0.8)%,(2.733±0.7)%,但相对峰面积差异显著.结论:不同提取方法的三七总皂苷原料及注射液存在差异,HPLC指纹图谱可用于其质量控制.     

人参皂甙Rg3对小鼠免疫功能的影响

目的:观察人参皂甙Rg3对正常小鼠免疫功能的影响.方法:体外实验测定小鼠脾淋巴细胞转化和NK细胞活性;整体实验给小鼠灌胃人参皂甙Rg3 7天后,测定小鼠炭粒廓清速率、免疫器官重量、血清溶血素含量和抗体生成细胞数.结果:人参皂甙Rg3体外对T淋巴细胞增殖无明显影响,但能增强NK细胞吞噬活性.人参皂甙Rg3能增加整体大鼠血清溶血素含量和抗体生成细胞数,但对小鼠免疫器官重量和炭粒廓清速率无明显影响.结论:人参皂甙Rg3能增强正常小鼠体液免疫功能,部分增强非特异性免疫功能,对细胞免疫无明显影响.     

单节段截骨治疗椎体形成不良型脊柱侧后凸畸形的疗效分析

目的：分析应用单节段截骨治疗椎体形成不良型脊柱侧后凸畸形（congenital kyphoscoliosis,CKS）的临床疗效。方法：回顾性分析2006年7月至2012年5月应用后路单节段截骨椎弓根钉内固定治疗19例椎体形成不良型CKS患者,平均19.2岁,其中9例行经椎弓根椎体截骨术（pedicle subtraction osteotomy,PSO）,10例行全椎体截除术（vertebra cloumn resection,VCR）。对比观察手术情况、影像学分析、疼痛视觉模拟评分（visual analogue scale,VAS）、美国脊髓损伤协会（American Spinal Injury Asso－ciation,ASIA）分级和并发症。结果：手术时间（302.1±43.2） min,术中出血（589.5±151.5） ml,平均融合节段6.0±1.5;术后侧凸角矫正率（79.7±9.2）%,局部后凸角矫正率（81.1±21.9）%,颈7垂线-骶骨中线距离（vertical line between the 7th vertebra and central sacra,C7-CSL）矫正率（82.7±12.5）%。上述指标在PSO组和VCR组间差异无统计学意义（P >0.05）。但术前局部后凸角VCR组62.2°±21.0°明显大于PSO组22.7°±22.0°,t=4.009,P=0.001。经过平均4.2年随访,所有患者脊柱侧凸角、局部后凸角及冠状面偏移未见明显进展,VAS改善（85.9±15.9）%,ASIA分级3例D均恢复至E。所有患者并发症发生率21.1%,1例硬脊膜损伤,2例单侧下肢麻木,1例慢性腰痛,随访期间所有患者植骨融合良好,无伤口感染、螺钉松动移位、内植入断裂发生。结论：一期后路单节段截骨椎弓根钉内固定治疗椎体形成不良型CKS安全可行,可获得良好的矫正效果,其中VCR术应用于脊柱矢状面矫形更有优势。     

原子荧光光谱法测定乌梅饮片中微量砷、汞的含量

目的:测定净乌梅和乌梅炭中微量砷、汞的含量.方法:采用原子荧光光谱法.结果:乌梅中砷的含量分别为0.0597～1.0001mg·g-1,汞的含量为0.0198～0.0300mg·g-1.结论:本方法操作简便,定量准确.     

扶正消瘤液对肿瘤化疗增敏作用的临床研究

观察中药复方在肿瘤化疗增敏方面的作用。将 6 9例晚期肿瘤患者随机分为治疗组和对照组 ,治疗组用中药复方扶正消瘤液配合化疗进行临床治疗 ,并与单纯化疗组进行对照。两组化疗方法相同。结果 ,治疗组有效率为 31.5 8% ,对照组有效率为 2 2 .5 8% ,统计学处理差异明显 (P<0 .0 5 )。治疗组治疗前后 TL c TR、NKc A、s IL-2 R及对照组治疗后相比均有显著性差异。结论 ,中药复方扶正消瘤液对晚期肿瘤化疗有一定的增敏作用。     

畲药食凉茶组方结合西药治疗痰湿壅盛型原发性高血压30例

目的观察畲药食凉茶组方结合西药治疗痰湿壅盛型原发性高血压的临床疗效。方法将60例患者随机分为治疗组和对照组(各30例),两组均采用西医常规疗法,治疗组同时加用畲药食凉茶组方。两组疗程均为2个月,观察中医证候疗效及血压、NO、ET水平变化情况。结果治疗组、对照组中医证候总有效率分别为93.3%、70.0%;组间中医证候疗效比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与本组治疗前比较,两组中医证候积分均明显下降(P<0.05);组间治疗后比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组收缩压、舒张压及NO、ET治疗前后组内比较,差异有统计学意义(P<0.05);组间治疗后比较,收缩压、舒张压及NO、ET差异均有统计学意义(P<0.05)。结论畲药食凉茶组方结合西药可有效用于痰湿壅盛型原发性高血压的治疗。     

广金钱草资源调查与药材质量评价

目的:对我国广金钱草资源进行调查,并对不同产地药材质量进行评价,为广金钱草资源的可持续利用、合理开发以及规范化种植提供科学依据.方法:资源调查采用查阅文献、走访调查和现地调查相结合的方法进行,药材质量评价采用高效液相色谱法测定夏佛塔苷含量并进行统计分析.结果:广金钱草野生药用植物资源正逐步减少,部分地区很难找到野生资源.人工栽培广金钱草技术不完善、药材质量参差不齐,影响广金钱草进一步的开发和综合利用.结论:应该加大保护资源的力度,保护广金钱草的生态环境,促进其种群恢复.同时,应该尽快建立GAP基地,完善人工栽培、加工技术,满足市场对广金钱草药材的需求.     

大鼠同种带瓣主动脉移植模型的建立和改进

目的 为了简化手术步骤，方便操作，提高手术成功率。方法 采用wistar大鼠(200～250g)为供体，sD大鼠(200～250g)为受体，行同种带瓣主动脉腹主动脉补片式异位移植36例。供体经修剪保留两个主动脉瓣叶及相应宽度瓣下附着心肌(0．5mm)和主动脉壁(5mm)，三定点连续缝合法移植于左肾静脉下方腹主动脉前壁。结果 手术成功率为94．4％。结论 实验结果提示：与腹主动脉间置式移植相比，本手法操作简单，成功率高，可满足类似实验要求。