单磷酸阿糖腺苷联合布地奈德治疗小儿毛细支气管炎的临床研究

目的探讨单磷酸阿糖腺苷联合布地奈德治疗小儿毛细支气管炎的临床疗效。方法选取2014年9月—2016年9月沈阳医学院附属中心医院儿科收治的毛细支气管炎患者151例,随机分成对照组(75例)和治疗组(76例)。对照组雾化吸入吸入用布地奈德混悬液,0.5 mg加入生理盐水3 m L,1次/d,10 min/次。治疗组在对照组的基础上静脉滴注注射用单磷酸阿糖腺苷,0.1 g加入5%葡萄糖溶液100 m L中,1次/d。所有患者均治疗1周。观察两组患者临床效果,对比两组治疗前后症状消失时间、住院时间、炎性指标以及不良反应情况。结果治疗后,对照组和治疗组总有效率分别为84.00%和96.05%,两组总有效率比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,治疗组患儿的退热时间、湿啰音消失时间、喘息消失时间和咳嗽消失时间以及住院时间均明显短于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患儿肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)以及IL-8指标均明显降低(P0.05);且治疗组的降低程度明显优于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论单磷酸阿糖腺苷联合布地奈德治疗小儿毛细支气管炎,在临床症状消失时间、住院时间以及炎症因子水平改善方面上均优于单独使用布地奈德治疗,具有一定的临床推广应用价值。     

百两金皂苷A的微生物转化及其产物的细胞毒活性研究

目的利用燕麦曲霉Aspergillus avenaceus AA 3.4454对百两金皂苷A进行微生物转化,并对转化产物进行细胞毒活性研究。方法将百两金皂苷A放置燕麦曲霉液体培养基中,28℃、160 r/min条件下共培养3 d后,利用多种柱色谱分离转化产物,采用核磁共振等波谱手段鉴定结构;采用MTT法测定转化产物对肿瘤细胞系的细胞毒活性。结果从百两金皂苷A的燕麦曲霉液体发酵液中分离出3个主要转化产物,其结构分别鉴定为西克拉明皂苷元A-3β-O-{α-D-半乳吡喃糖基-(1→4)-[β-D-木吡喃糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]-α-L-阿拉伯吡喃糖苷}(1)、西克拉明皂苷元A-3β-O-{α-D-半乳吡喃糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-[β-D-木吡喃糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)]-α-L-阿拉伯吡喃糖苷}(2)、西克拉明皂苷元A-3β-O-{β-D-木吡喃糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]-[α-D-半乳吡喃糖基-(1→3)]-α-L-阿拉伯吡喃糖苷}(3)。结论首次利用燕麦曲霉对百两金皂苷A进行微生物转化并分离得到在糖链的不同位置增加了α-D型半乳糖的转化产物,3个转化产物均为新化合物,均具有一定的细胞毒活性,且转化产物1对大细胞肺癌细胞的细胞毒活性略优于底物。     

NRAGE在小肝细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨NRAGE在小肝细胞癌中的表达情况及其临床意义。方法:采用免疫组化技术检测160例原发性小肝细胞癌组织及配对癌旁非癌组织中NRAGE的表达,分析NRAGE表达与小肝细胞癌患者临床病理指标及预后的关系。结果:NRAGE在小肝细胞癌组织中阳性表达率明显高于配对癌旁组织(63.13%vs.14.38%,P0.05)。NRAGE表达增高与患者年龄、术前AFP水平、完整包膜和复发密切相关(均P0.05)。单因素分析显示,微血管癌栓、术前AFP水平、子灶、完整包膜、复发、浆膜浸润、巴塞罗那分期、分化程度和NRAGE表达是小肝细胞癌患者的预后影响因素(均P0.05)。多因素分析结果显示,NRAGE表达与微血管癌栓、术前AFP水平、复发、巴塞罗那分期是影响小肝细胞癌患者预后的独立危险因素(均P0.05)。NRAGE高表达小肝细胞癌患者5年生存率明显低于低表达患者(35.63%vs.54.23%,P0.05)。结论:NRAGE在小肝细胞癌组织中表达增高,NRAGE高表达患者预后差。     

膝关节盘状半月板损伤关节镜治疗的疗效及术后疼痛的影响因素分析

目的:探讨膝关节盘状半月板损伤关节镜治疗的疗效及术后疼痛的影响因素。方法:选择82例盘状半月板损伤患者,均接受关节镜手术治疗,术后1年根据Ikeuchi膝关节评价等级评价疗效,分析术后疼痛影响因素。结果:82例患者中疗效为优46例(56.10%),良28例(34.15%),可7例(8.54%),差1例(1.22%),疗效优良率为90.24%。将74例术后疗效优良者纳入无疼痛组,余8例患者纳入疼痛组,两组患者比较在性别、体质量指数、Watanabe分型、手术方式比较差异无统计学意义(P>0.05);但疼痛组患者年龄、术前症状时间及术后负重时间≤1周的比例大于无疼痛组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:关节镜治疗膝关节盘状半月板损伤具有确切的临床疗效,患者年龄、术前症状持续时间及术后负重时间与术后疼痛有关。     

Wnt/β-catenin信号通路中Wnt基因对肾癌细胞的生物学影响

目的探讨Wnt基因对肾透明细胞癌Caki-2细胞的生物学影响。方法细胞分3组:Caki-2组(空白对照)、shRNA+Wnt+Caki-2组(慢病毒沉默Caki-2细胞中的Wnt基因)、空载体组(实验对照),CCK-8法观察不同时间各组细胞的增殖情况;透射电镜观察沉默Wnt基因对Caki-2细胞凋亡的影响;Transwell小室方法检测各组细胞侵袭能力的变化;实时PCR观察Wnt/β-catenin信号通路中下游基因的变化和凋亡相关基因的变化。结果 shRNA+Wnt+Caki-2组出现了细胞增殖抑制,其增殖能力与其他2组相比差异有统计学意义(P<0.05)。sh RNA+Wnt+Caki-2组表现出明显的细胞凋亡变化,出现凋亡小体。侵袭实验显示,shRNA+Wnt+Caki-2组迁出的细胞数明显低于其他2组(P<0.05);shRNA+Wnt+Caki-2组中Wnt mRNA、β-catenin mRNA和Bcl-2 mRNA的表达水平均低于其他2组(P<0.05)。结论慢病毒沉默Wnt基因,影响了肾透明细胞癌Caki-2细胞的增殖,促进了细胞的凋亡,抑制了Caki-2细胞的侵袭。     

茯黄颗粒利尿作用的实验研究

目的 研究茯黄颗粒对盐水负荷模型大鼠的利尿作用。方法 以大鼠盐水负荷模型为研究对象,以氢氯噻嗪片为阳性对照,以大鼠药后6 h内的排尿量、尿液Na⁺、K⁺、Cl^-含量和尿液pH值为检测指标,评价茯黄颗粒的利尿作用。结果 与正常对照组比较,茯黄颗粒2.16 g·kg^-1组药后2 h内大鼠尿量和6h尿液Na⁺含量明显增加;茯黄颗粒4.32 g·kg^-1组药后4 h内大鼠尿量和6 h尿液Na⁺、K⁺、Cl^-含量明显增加;茯黄颗粒各剂量组对大鼠尿液pH值均未见明显影响。结论 茯黄颗粒具有明显的利尿作用,其作用机制可能与促进Na⁺、K⁺和Cl^－的排泄有关。     

改良侧卧位经皮肾镜取石术对肾结石患者血流动力学的影响及其疗效分析

目的观察改良侧卧位经皮肾镜取石术(PCNL)对肾结石患者血流动力学的影响及其疗效。方法将108例PCNL 患者分为俯卧位组52例和改良侧卧位组56例。检测两组患者在截石位、改变体位、改变体位30 min以及术毕4个时段的血压、心率及血氧饱和度;比较两组患者的手术疗效及并发症的发生率。结果在改变体位30 min及术毕时,两组患者的血压较截石位均下降(P＜0.05),俯卧位组血压下降更为显著(P＜0.05);且俯卧位组患者血氧饱和度在改变体位30 min及术毕时段 较截石位下降且低于改良侧卧位组(P＜0.05)。改良侧卧位组手术时间、碎石取石时间、血红蛋白下降水平及术后并发症发生率均低于俯卧位组(P＜0.05);改良侧卧位组结石清除率高于俯卧位组(P＜0.05)。结论改良侧卧位PCNL对肾结石患者血流动力学影响小,且具有结石清除率高,出血少及手术并发症低等优点。     

参芪利心汤对心力衰竭大鼠心肌细胞的保护作用及机制研究

目的研究参芪利心汤对阿霉素诱导心力衰竭大鼠心肌细胞的保护作用及机制。方法雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、依那普利(2.1 mg/kg)组以及参芪利心汤低、中、高剂量(9.975、19.950、39.900 g/kg)组,除对照组外,其余大鼠ip阿霉素诱导心力衰竭模型;各给药组ig相应药物,对照组和模型组ig等体积蒸馏水,1次/d,连续4周。给药结束后,采用心脏彩色多普勒超声仪测定各组大鼠左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening,LVFS)以及每搏心输出量(stroke volume,SV);采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠心肌组织病理变化;采用透射电镜观察各组大鼠心肌细胞超微结构;采用ELISA法检测各组大鼠血浆N端B型利钠肽(N-terminal B-type natriuretic peptide,NT-pro BNP)及心肌组织三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)含量;采用流式细胞仪检测各组大鼠心肌细胞凋亡情况;采用qRT-PCR法检测各组大鼠心肌组织B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2associated X protein,Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(peroxisome proliferator activated receptorγcoactivator-1α,PGC-1α)m RNA表达情况;采用Western blotting法检测各组大鼠心肌组织Bcl-2、Bax、Caspase-3和p53蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠LVEF、LVFS和SV显著降低(P0.01),血浆NT-pro BNP含量显著升高(P0.01),心肌组织ATP含量显著降低(P0.01),心肌细胞凋亡率显著升高(P0.01);心肌组织Bcl-2和PGC-1αmRNA表达水平显著降低(P0.01),Bax和Caspase-3 mRNA表达水平显著升高(P0.01);心肌组织Bcl-2蛋白表达显著降低(P0.01),Bax、Caspase-3和p53蛋白表达水平显著升高(P0.01)。与模型组比较,参芪利心汤中、高剂量组和依那普利组大鼠LVEF、LVFS和SV均显著升高(P0.01);血浆NT-pro BNP含量显著降低(P0.01),心肌组织ATP含量显著升高(P0.01),心肌细胞凋亡率显著降低(P0.01);心肌组织Bcl-2和PGC-1αmRNA表达水平均显著升高(P0.01),Bax和Caspase-3 mRNA表达水平均显著降低(P0.01);心肌组织Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P0.01),Bax、Caspase-3和p53蛋白表达水平均显著降低(P0.05、0.01)。结论参芪利心汤能够改善心力衰竭大鼠的心肌结构、能量代谢及心功能,并减少心肌细胞凋亡,其作用机制可能与调控PGC-1α和线粒体凋亡通路相关蛋白表达有关。     

补肾助孕方治疗复发性流产的分子作用机制分析

目的 基于网络药理学研究补肾助孕方治疗复发性流产（RSA）的主要成分、作用靶点及作用通路,应用分子对接和体外细胞实验验证,从而揭示其潜在作用机制。方法 首先,中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）,中医药研究综合数据库（TCMID）检索和收集既往文献补肾助孕方的活性成分,应用DrugBank数据库,SwissTargetPrediction数据库等平台查找预测药物作用靶点,检索人类基因注释数据库（GeneCards）,人类孟德尔遗传数据库（OMIM）中等数据库获得复发性流产靶点,将药物与疾病预测靶点取交集。应用Cytoscape 3.7.1软件绘制“补肾助孕方-化合物-靶点-复发性流产”网络,蛋白质相互作用平台（STRING）平台构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络,分析获取核心网络。其次,采用R语言软件对共同靶点分别行基因本体（GO）功能富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。最后,使用Autodock Vina 1.1.2软件用来行分子对接及体外细胞实验验证补肾助孕方对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）通路的激活作用。结果 发现补肾助孕方的49个潜在活性成分可能靶向133个复发性流产相关作用靶点。GO功能富集分析获得470个细胞生物学过程,主要涉及血管形态发生、发育、细胞增殖、氧化活性等生物学过程。KEGG通路富集分析获得103条信号通路（P<0.05）,主要与PI3K/AKT信号通路、糖基化终末产物/糖基化终末产物受体（AGE/RAGE）信号通路、肿瘤坏死因子（TNF）信号通路相关。分子对接提示补肾助孕方关键活性成分山柰酚与核心蛋白蛋白激酶B1（AKT1）,血管内皮生长因子A（VEGFA）的Vina得分最低且相近。体外细胞实验证实,补肾助孕方可通过活化PI3K/AKT信号通路,上调VEGFA的表达及下游AKT1蛋白的表达水平,促进血管的生成。结论 该研究初步揭示补肾助孕方作用于血管形态发生发育、细胞增殖,明显激活PI3K/AKT通路进而上调VEGFA的表达,最终促进母胎界面血管生成利于妊娠早期胎盘的形成及早孕的维持,起到治疗RSA的作用,为后续新药研发供思路。     

短期反复行GS-TAE治疗伴动门脉瘘肝细胞癌的临床观察

目的:探讨短期反复行明胶海绵肝动脉栓塞术对伴动门脉瘘的肝细胞癌的疗效。资料与方法:经CT、MRI诊断肝细胞癌,血管造影确认均有动门脉瘘形成的患者14例,其中男13例,女1例,将明胶海绵碎块与抗癌药混合并行肝动脉栓塞术,明胶海绵颗粒直径均选择在0.5~1mm之间,栓塞次数3~5次,栓塞间隔3~5周。结果:12例治疗后癌灶范围缩小(85.7%),全部14例A-P shunt消失,患者生存时间4~26个月。9例同时伴有门脉癌栓,治疗后8例门脉癌栓缩小或回缩(88.9%),其中1例门脉癌栓甚至完全消失。结论:短间隔反复明胶海绵肝动脉栓塞术是治疗伴动门脉瘘的肝细胞癌的有效方法。