VEGF上调survivin和bcl-2表达及抑制乳腺癌细胞凋亡的机制探讨

目的研究血管内皮细胞生长因子(VEGF)对乳腺癌细胞株MCF-7的凋亡及凋亡相关基因survivin和bcl-2表达的影响,探讨VEGF自分泌作用抑制肿瘤细胞凋亡的机制.方法构建VEGF165真核表达质粒,采用脂质体转染VEGF165 cDNA MCF-7细胞, 通过RT-PCR及ELISA方法鉴定转染克隆MCF-7/hVEGF165细胞中VEGF mRNA及蛋白的表达,Western blot 方法比较MCF-7/hVEGF165及MCF-7、MCF-7/pcDNA3细胞中survivin、bcl-2蛋白表达,流式细胞仪分析细胞凋亡和细胞周期.结果 MCF-7/hVEGF165细胞VEGF mRNA表达量增加,细胞培养上清中VEGF蛋白浓度为(354.50±31.93)ng/L,高于MCF-7细胞的(178.54±16.52)ng/L和MCF-7/pcDNA细胞的(190.75±13.32)ng/L(P<0.01).与MCF-7、MCF-7/pcDNA3组相比较,MCF-7/hVEGF165细胞凋亡百分数显著下降(P<0.05),分别为(2.47±0.51)% (MCF-7/hVEGF165),(7.74±1.56)%(MCF-7/pcDNA3)和(7.35±0.33)%(MCF-7);survivin和bcl-2蛋白表达增高了近3倍,但各组细胞周期变化不明显(P>0.05).结论 VEGF诱导凋亡抑制基因suvivin和bcl-2高表达,可能在自分泌VEGF抑制MCF-7凋亡中发挥重要作用.     

超负荷心肌肥厚心肌细胞的凋亡和增殖

在超负荷心肌肥厚过程中存在心肌细胞的凋亡和增殖,心肌细胞的凋亡可能是代偿性肥厚向心衰转变的决定因素,凋亡的发生机制涉及外在因素和一些内源性细胞通路。另一方面,心肌肥厚中既有心肌细胞的肥大,亦存在心肌细胞的增殖,心肌细胞的增殖与细胞周期素(Cyclin)、细胞周期依赖激酶(Cdk)、Cdk抑制因子(CdkI)、bcl2、p53及端粒等因子有关,心肌细胞的凋亡和增殖通过一些因子相关联。     

T型钙通道在心肌肥厚大鼠心肌细胞钙内流中的作用

目的研究T型钙通道在心肌细胞钙离子内流中的作用及其对心脏兴奋收缩耦联的可能影响。方法测定选择性T型钙通道阻滞剂米贝拉地尔对培养的SD乳大鼠心室肌细胞和二肾一夹心肌肥厚大鼠心室肌细胞[Ca2+]i的影响。结果血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激使乳大鼠心室肌舒张期细胞[Ca2+]i增高,收缩期细胞[Ca2+]i降低,[Ca2+]i上升和下降的时间延长。米贝拉地尔1.25～5μmol·L-1浓度依赖性降低AngⅡ引起的细胞[Ca2+]i变化。在心肌肥厚模型大鼠,咖啡因刺激后,[Ca2+]i增幅和最高[Ca2+]i明显降低。而米贝拉地尔25mg·kg-1·d-1(灌胃给药7～9周)组加入咖啡因刺激后细胞内[Ca2+]i增幅和最高[Ca2+]i明显增高。结论T型钙通道异常开放可以引起心肌细胞内钙超载。阻断T型钙通道,可能通过改善肌浆网摄取及释放钙的功能而抑制心肌细胞钙超载。     

氯诺昔康复合芬太尼在上腹部手术自控镇痛中的平衡应用

目的:观察氯诺昔康复合芬太尼用于上腹部手术患者自控静脉镇痛(PCIA)的有效性和不良反应.方法:选择择期上腹部手术患者120例,随机分成三组:F组用芬太尼0.6mg 氟哌利多5mg,100mL·48h-1,L组用氯诺昔康48mg 氟哌利多5mg,100mL·48h-1,M组用氯诺昔康32mg 芬太尼0.2mg 氟哌利多5mg,100mL·48h-1.手术结束后,给予负荷剂量8mL,接镇痛泵由患者行PCIA.记录三组患者在1,4,8,16,24及48h等时间点的镇痛(VAS)、镇静(OAA/S)评分及不良反应.结果:F组的基本无痛率(65%)优于L组(55%)与M组(60%),但总的优良率三组间无统计学差异(P>0.05).F组尿潴留、呼吸抑制、恶心呕吐、嗜睡、和皮肤瘙痒等不良反应明显高于L组与M组(P<0.05).结论:氯诺昔康镇痛效果明显,与芬太尼合用于上腹部手术的PCIA镇痛,可减少芬太尼的不良反应,提高镇痛质量.     

HPLC测定腰痛灵栓中桂皮醛的含量及对麝香酮的鉴别

目的建立腰痛灵栓中桂皮醛的含量测定及麝香酮鉴别的方法.方法采用RP-HPLC,以乙腈-0.1%磷酸(38:62)为流动相,在检测波长285 nm处测定桂皮醛含量;以2,4-二硝基苯肼为衍生试剂,乙腈-0.1%磷酸(90:10)为流动相,在检测波长365 nm处鉴定麝香酮.结果桂皮醛平均回收率为98.75%,RSD=2.22%;样品中麝香酮衍生物得到良好分离.结论桂皮醛HPLC含量测定方法可行;麝香酮HPLC鉴别方法可行.     

交泰丸对对氯苯丙胺酸致失眠大鼠血清细胞因子的影响

[目的]观察交泰丸对与下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴相关的细胞因子的影响,从而探讨交泰丸"交通心肾"的配伍机理.[方法]选用SD大鼠50只,随机分为正常对照组、模型组、泻心组(单用黄连15 g)、补肾组(单用肉桂1.5 g)、交通心肾组(m黄莲:m肉桂=15 g:1.5 g),每组10只;采用对氯苯丙胺酸(PCPA)一次性腹腔注射(300 mg/kg)复制失眠模型后,正常对照组与模型组分别用生理盐水灌胃(2.5 g·kg-1·d-1),其他各组以不同配伍比例的药液分别灌胃(2.5 g·kg-1·d-1).采用酶联免疫吸附法检测各组血清中白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量.[结果]模型组大鼠血清中IL-1、TNF-α的含量均减少,与正常对照组比较有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01);泻心组大鼠IL-1、TNF-α的含量有所升高,补肾组大鼠IL-1、TNF-α含量降低,甚至低于模型组,但与模型组比较均无显著性差异(P＞0.05);交通心肾组大鼠IL-1、TNF-α的含量升高,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05).[结论]交泰丸"交通心肾"治疗失眠的作用可能与通过黄连与肉桂的配伍改变了与睡眠有关的细胞因子的含量,从而调节HPA轴的分泌活动有关.     

PARG基因沉默对肿瘤局部B220+ DEC205+ DC的影响

目的： 探讨聚（腺苷二磷酸核糖）水解酶［Poly(ADP-ribose)glycohydrolase,PARG］基因沉默对肿瘤局部B220+ DEC205+ DC增殖分化的影响及其在大肠癌转移中的作用。方法：以PARG-shRNA慢病毒载体转染CT26细胞为实验组,未转染CT26细胞和空载体CT26细胞为对照组,分别在小鼠脾包膜下接种形成肝转移模型;Western blot法检测脾脏移植瘤中PARG、PARP、NF-κB蛋白的表达;免疫荧光双标法检测脾脏中B220+DEC205+DC的表达;ELISA法检测各组小鼠血清中IL-10、TGF-β的表达。结果：PARG基因沉默后,脾脏移植瘤体积缩小,肝脏转移癌结节数目减少,差异有统计学意义(P<0.05);脾脏移植瘤中PARG、PARP、NF-κB蛋白的表达量明显较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05);脾脏组织中的B220+ DEC205+ DC较对照组明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）;血清中IL-10、TGF-β的表达较对照组显著降低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论： PARG基因沉默可抑制小鼠结肠癌CT26细胞肝转移,可能与PARG沉默后下调PARP,并下调NF-κB的活性,从而影响NF-κB依赖性因子IL-10、TGF-β的表达,进而影响B220+DEC205+DC的增殖分化有关。     

妊娠期糖代谢异常对母儿影响的探讨

目的 探讨孕妇血糖异常情况与母儿结局的关系.方法 将2003年1月～2007年12月期间血糖异常孕妇86例为实验组,随机选择同期血糖无异常者119例为对照组,对两组剖宫产、胎膜早破、早产、羊水过多、羊水过少、胎儿窘迫、新生儿高胆红素血症、新生儿窒息、巨大儿、新生儿畸形的发生率进行比较.结果 与对照组相比,血糖异常组的剖宫产率(x2=30.488,P=0.000)、巨大儿发生率(x2=5.869,P=0.015)明显高于对照组,有非常显著性差异;其余各项两组间比较无显著性差异(P＞0.05).结论 妊娠期血糖异常对母儿有较大影响,及时正确诊断和合理控制血糖可显著减少妊娠期母耍并发症的发生.     

卵巢黏液性肿瘤中附壁结节3例临床病理分析

目的观察卵巢黏液性肿瘤中附壁结节的临床表现、组织病理学和免疫表型特征,强调诊断标准并探讨病因机制。方法分析3例卵巢黏液性肿瘤中附壁结节的临床资料、组织学形态及其免疫学表型,并复习相关文献。结果3例卵巢黏液性肿瘤中附壁结节的病例1为良性的肉瘤样附壁结节,以两种细胞成分为主：其一为纤维组织细胞样单核细胞,呈卵圆形或梭形,部分细胞形态较一致、温和,部分细胞出现高度的核异型性,核分裂多见并可见病理性核分裂象;另一种细胞为散在分布的破骨样巨细胞,常围绕于小的出血腔隙周围。病变中见出血坏死区,并伴明显的炎症反应背景;病例2为恶性的肉瘤性附壁结节,其组织学形态与肉瘤样附壁结节极其相似,但体积大,并出现血管浸润。该2例中的单核细胞表达vimentin,灶性表达AE1／AE3,多核巨细胞表达CD68为主。病例3为恶性的化生性癌性附壁结节,其中的瘤细胞为化生性或低分化癌成分,以表达上皮性标记如AE1／AE3和CK7为主,同时也表达vimentin。结论卵巢黏液性肿瘤中附壁结节为罕见的伴发病变或肿瘤,具有广泛的病理形态图像谱,不同类型的卵巢黏液性肿瘤中附壁结节有完全不同的预后及治疗原则,正确的诊断具有重要的临床意义。     

全器械吻合法在全胃切除术后胃肠道重建中的应用(附56例报告)

目的评价机械吻合在全胃切除后消化道重建中的应用价值。方法回顾性分析56例胃恶性肿瘤患者全胃切除后应用管状吻合器吻合进行消化道重建的临床资料。结果本组每例手术时间为70～180min,平均手术时间90．5min。无手术死亡。术后无一例发生吻合口瘘（食管空肠吻合处）;4例发生吻合口溃疡,2例发生吻合口狭窄,吻合口狭窄率为3．57％,吻合口溃疡发生率为7．10％。结论全机械吻合在全胃切除术中具有操作简便、安全可靠、疗效确切,可缩短手术时间,减少术后吻合口瘘及吻合口狭窄率等优点,值得推广应用。