手术应激对成年和婴幼鼠吞噬受体表达及其细菌杀灭能力的影响

目的 吞噬作用是宿主固有免疫抵御外来入侵病原微生物的一个关键因素.手术应激可产生机体免疫抑制,增加感染的危险.本研究旨在探讨手术应激对成年鼠和婴幼鼠吞噬受体表达及其细菌杀灭能力的影响,分析吞噬体成熟及杀菌机制,进而为临床干预提供依据.方法 取婴幼(1～2周龄)和成年(8～10周龄)Balb/C小鼠各40只,分为对照组和手术应激组.腹腔灌洗法分别取术后24 h和对照组腹腔巨噬细胞,流式细胞仪测定巨噬细胞表面吞噬受体FcγR和CR3的表达;巨噬细胞与活菌共同孵育不同时间,计数细菌菌落生长数,计算胞内细菌杀灭数.结果 经流式细胞仪测定,对照组婴幼鼠巨噬细胞吞噬受体CR3和FcγR荧光强度分别为261.77±22.75和38.42±4.29,较对照组成年鼠(453.33±23.80、43.07±12.01)表达低(P＜0.05);手术应激后,婴幼鼠表达(49.87±3.04、9.57±0.76)明显下降(P＜0.05),而成年鼠表达(263.00±9.33、45.43±1.98)下降不明显.与细菌共培养30 min和60 min后,细菌吞噬率分别为43.75％±4.70％和61.29％±10.94％,较成年鼠(58.34％±8.87％和76.02％±3.64％)低(P＜0.05),手术应激后,婴幼鼠细菌吞噬率(38.06％±12.90％和56.15％±11.00％)亦有所下降.结论 婴幼鼠较成年鼠吞噬受体表达低,细菌杀灭能力弱.手术应激后,婴幼鼠吞噬受体的表达进一步降低,吞噬功能明显受损,细菌杀灭能力进一步下降,从而增加了术后感染的风险.     

ALL-2005方案治疗儿童T系急性淋巴细胞白血病35例疗效总结

目的研究ALL-2005方案治疗儿童T系急性淋巴细胞白血病(T-ALL)的疗效。方法对2005年5月-2009年4月初发的35例T-ALL患儿采用ALL-2005方案进行分层治疗及疗效分析。结果 T-ALL患儿35例,男30例(86%),女5例(14%),发病时中位年龄8.3(2.0～15.6)岁。其中>10岁患儿14例,占40%。起病时外周血白细胞≥50×109/L者24例,占69%,起病时6例患儿有纵隔增宽。泼尼松治疗第8天时泼尼松试验反应好者22例(63%)。诱导治疗第35天有29例获完全缓解(83%),骨髓微小残留病(MRD)≤0.01%者共20例(67%)。治疗第55天时MRD≤0.01%共26例(87%)。4例复发,3例失访,6例死亡(包括3例复发和3例第1疗程未缓解而放弃治疗者)。随访至2011年6月31日,中位随访时间39(1～71)个月,5年无事件生存率为73.5%。结论 ALL-2005方案治疗儿童T-ALL疗效较好。     

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目的分析儿童咯血病因构成、临床特点及支气管镜表现。方法收集2002年1月至2011年3月于北京儿童医院住院治疗的104例咯血患儿临床资料,分析其临床特点、影像学特点和支气管镜表现,总结儿童咯血的病因构成。结果 104例中特发性肺含铁血黄素沉着症24例、支气管炎29例、肺炎11例、支气管扩张症7例、支气管内膜结核3例、支气管异物5例、支气管动脉肺动脉瘘6例、肺静脉闭塞或缺如3例、疑诊支气管-肺血管发育异常10例(未行血管造影确诊)、肺囊性腺瘤样畸形1例、支气管黏液表皮样癌1例、支气管炎性假瘤1例、韦格纳肉芽肿1例、未分化结缔组织病1例、抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)相关性小血管炎1例。结论儿童咯血病因复杂,需要结合咯血特点、影像学和支气管镜检查进行诊断和鉴别诊断,急慢性下呼吸道感染、特发性肺含铁血黄素沉着症和先天性支气管肺血管发育异常是引起儿童咯血主要病因。     

三维超声在筛查新生儿发育性髋关节异常中的探索性应用

目的 探索三维高频超声髋关节检查技术在诊断新生儿发育性髋关节异常(DDH)中的应用价值.方法 2010年6月至2010年12月,采用PHILIPS IU22超声诊断仪,二维加三维高频线阵探头,对768例新生儿行髋关节超声筛查.新生儿7d内行超声波髋关节筛查,采用Graf法及股骨头覆盖率比值测量髋关节,并结合三维成像图评判髋关节发育情况.结果 本组受检新生儿768例(1 536髋),其中女婴398例,男婴370例,新生儿平均受检时间为出生后5.8d.正常的髋关节共1 412髋,占91.92％;髋关节不稳定共99髋,占6.45％;髋关节发育不良19髋、半脱位4髋、脱位2髋,共占1.63％.结论 Graf的髋关节额状面成像技术,可以对新生儿髋关节进行清晰的超声成像,并进行了定性、定量分析,诊断DDH,但标准图像的获得是测量和诊断的关键,它会受操作者的技术影响.三维超声成像技术,可观察髋关节空间结构,旋转X、Y、Z轴,更可从不同角度观察髋关节的发育情况,提供髋关节解剖形态和关节功能的信息,并能早期显示髋关节解剖结构,这点是传统X线片不能比拟的优势,图像更加直观,加上高频超声波检查的无放射性损害,重复性强,因此二维和三维超声二者相结合诊断发育性髋关节异常,更符合临床上治疗髋臼发育不良的时间越早越好的需求.     

儿童急性白血病Notch1和Jagged1的基因表达

目的：探讨儿童急性白血病（AL）骨髓或外周血单个核细胞中Notch1和Jagged1基因表达及其在AL发病中的可能作用。方法：收集2009年2月至2011年7月初诊的47例AL患儿和20例正常或非恶性血液病儿童（对照组）骨髓或外周血单个核细胞,采用二步法半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测骨髓或外周血中Notch1和Jagged1基因表达情况。47例AL患儿中,急性淋巴细胞白血病（ALL）32例,其中B-ALL 26例,T-ALL 6例;急性髓细胞白血病（AML）15例。结果：ALL组及AML组Notch1基因阳性率高于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。T-ALL患儿Notch1 基因表达水平高于B-ALL患儿,差异有统计学意义（P<0.01）。ALL组及AML组Jagged1基因阳性率与对照组比较差异无统计学意义,但ALL组及AML组Jagged1表达水平均高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：Notch1在儿童不同类型ALL中的表达有明显差异,T-ALL 患儿中的Notch1表达明显高于B-ALL患儿;在儿童AL细胞中,普遍存在Notch1信号的活化;Notch1在AML儿童中异常表达,提示Notch1在AML儿童中也起着重要作用。Jagged1在ALL及AML儿童中异常表达,但需要收集更多资料论证。     

过氧化物酶体增殖物活化受体γ激动剂抑制血管紧张素Ⅱ诱导的肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白-1的表达

目的探讨氧化应激对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白-1（MCP—1）表达的影响，观察过氧化物酶体增殖物活化受体γ（PPARγ）激动剂对AngⅡ诱导的MCP—1表达的抑制作用。方法体外培养人肾小球系膜细胞。分为正常对照组、不同水平AngⅡ（1、10、100nmol／L）刺激组及乙酰半胱氨酸（NAC，10μmol／L）和罗格列酮（10μmol／L）预处理30min后加入AngⅡ（100nmol／L）刺激组。应用实时定量聚合酶链反应（PCR）检测各组MCP—1的表达，荧光探针2′，7′-二氯二氢荧光素乙酰乙酸（DCFDA）检测细胞内活性氧的变化。结果1．AngⅡ呈剂量依赖性的诱导肾小球系膜细胞MCP-1表达，1、10和100nmol／LAngⅡ刺激12h后MCP—1表达是对照组的1．80、2．51和3．57倍。2．AngⅡ可呈剂量依赖性诱导肾小球系膜细胞活性氧（ROS）的产生，1、10和100nmol／LAngⅡ刺激60min，ROS产生分别是对照组的1．82、2．92和4．08倍。3．Losartan完全阻断了AngⅡ诱导的ROS产生，而PD123319对AngⅡ诱导的ROS产生无抑制作用。4．抗氧化剂NAC显著抑制AngⅡ诱导的肾小球系膜细胞MCP—1表达。5．PPARγ受体激动剂罗格列酮10μmoL／L可显著抑制AngⅡ诱导的系膜细胞ROS产生和MCP-1表达。结论AngⅡ通过诱导氧化应激促进肾小球系膜细胞MCP-1表达；PPARγ／激动剂通过抑制氧化应激阻断AngⅡ诱导的MCP—1表达。     

微剂量肝素早期干预对危重新生儿伴全身炎症反应综合征预后的影响

目的观察早期使用微剂量肝素对危重新生儿伴全身炎症反应综合征(SIRS)的治疗效果及预后的影响。方法对符合诊断标准的84例新生儿SIRS患儿随机分组进行前瞻性对照研究,对照组39例,给予原发病及保护重要脏器等常规治疗;治疗组45例,在常规治疗基础上早期加用微剂量肝素皮下注射按5～10U/kg,6h1次,共用3d。结果两组治疗前后比较,治疗后血小板计数明显升高,CRP、D-D水平明显下降。治疗组与对照组比较,SIRS的持续时间缩短(χ2=5.655,P=0.017),多脏器功能不全(MODS)发生率有显著减少、病死率均明显降低(P<0.05)。结论微剂量肝素早期干预可缩短新生儿SIRS持续时间,降低MODS的发生率及病死率。     

儿童胃息肉与幽门螺杆菌感染的关系

目的探讨儿童胃息肉与幽门螺杆菌(Hp)感染的关系。方法对本院2002-2006年经胃镜活检及病理诊断的36例胃息肉患儿Hp感染情况进行分析。并与同期胃镜检查无异常且病理报告正常的35名对照组儿童Hp感染情况进行比较。结果胃息肉组Hp感染率为16.67%(6/36例),对照组Hp感染率为14.29%(5/35例)。二组比较无显著性差异。6例Hp检查阳性胃息肉患儿经根除Hp治疗,0.5 a后复查胃镜发现4例炎性息肉消失。结论Hp感染与儿童胃息肉无明显相关性。但胃炎性息肉的发生可能与Hp感染有关。根除Hp治疗可使部分炎性息肉消失。     

高氧致慢性肺疾病早产鼠肺组织水通道蛋白-5及表面活性蛋白-A、B基因表达的意义

目的 探讨慢性肺疾病(CLD)早产鼠肺上皮细胞特异性标志物表面活性蛋白A、B(SP-A、SP-B)通道蛋白-5(AQP5)基因表达规律及其意义.方法 将80只早产鼠随机分为模型和对照组(每组40只),采用高体积分数氧诱导慢性肺疾病模型,于实验后1、3、7、14、21 d应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测其肺组织SP-A、SP-B及AQP5 mRNA表达.结果 生后初期2组SP-A、SP-B及AQP5均无统计学差异(Pa＞0.05),7 d实验组SP-A及SP-B明显高于对照组(Pa＜0.05),14 d时显著高于对照组(Pa＜0.01),21 d时仍明显高于对照组(Pa＜0.05);同时间点与对照组比较,AQP5均维持在较低水平(Pa＜0.05).结论 高体积分数氧诱导早产鼠的Ⅱ型肺泡上皮细胞(AEC-Ⅱ)向Ⅰ型肺泡上皮细胞(AEC-Ⅰ)分化障碍可能是CLD肺上皮修复异常的重要机制.     

落新妇甙对心脏移植排斥反应中活化T细胞蛋白激酶C信号传导通路的影响

目的用小鼠心脏移植急性排斥反应体外模型,探讨落新妇甙对心脏移植排斥反应中活化T细胞蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)信号传导通路的影响。方法分离BALB/C小鼠心肌细胞(2×10~5/ml)和C57BL/6小鼠的脾细胞(1×10~6/ml),前者做刺激细胞,后者做反应细胞,进行混合细胞培养,建立小鼠心脏移植急性排斥反应体外模型。实验分4组:对照组,心肌细胞与脾细胞混合培养;落新妇甙组,在对照组基础上加入落新妇甙(15μg/ml);落新妇甙加PKC激动剂组,在对照组基础上加入落新妇甙(15μg/ml)和PKC激动剂PMA(10nmol/L);落新妇甙加PKC抑制剂组,在对照组基础上加入落新妇甙(15μg/ml)和PKC抑制剂CHE(10μmol/L)。TUNEL法检测T淋巴细胞凋亡情况。RT-PCR和Western blot法检测T细胞PKC、NF-κB,caspase-3和Bcl-2表达情况。结果落新妇甙组T细胞凋亡指数和caspase-3明显高于对照组(P<0.01),PKC、NF-κB和Bcl-2表达显著低于对照组(P<0.01)。落新妇甙加PKC抑制剂组T细胞凋亡指数和caspase-3显著高于落新妇甙组,PKC、NF-κB和Bcl-2表达显著低于落新妇甙组(P<0.01)。落新妇甙加PKC激动剂组T细胞凋亡指数,caspase-3、PKC、NF-κB和Bcl-2表达与对照组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论落新妇甙诱导心脏移植排斥反应中活化T细胞凋亡与其抑制PKC信号传导通路有关。