去势手术联合激素注射对绵羊腰椎骨密度及微观结构的影响

目的 评价去势手术联合激素注射对绵羊腰椎骨密度（bone minerat density,BMD )及微观结构的作用。方法 将10只健康成年绵羊随机分为假手术组（n=5 )和实验组（n=5 )。假手术组仅显 露双侧卵巢;实验组行双侧卵巢切除术（ovariectomy,OVX),且术后1月开始肌肉注射甲基强的松龙 (0.45mg/kg ?d）,注射时间共为10月。测量术前和术后1年两组中绵羊腰椎的BMD。术后1年,处 死所有绵羊并取出绵羊腰椎标本,通过micro-CT技术对微观结构进行三维重建及空间参数的测量分析,通过组织学观察评价绵羊腰椎微观结构的病理改变。结果 术前两组平均BMD之间的差异无统 计学意义（P>0. 05 ),假手术组手术前后的平均BMD无显著变化（P >0. 05 );术后1年实验组平均 BMD显著下降（P <0.05 ),从术前的1. 13 ±0. 13 g/cm2下降为术后的0. 83 ±0. 11 g/cm2,平均下降 26. 5%,且术后1年实验组中平均BMD显著低于假手术组（P <0.05 )。实验组的组织骨密度 (TMD )、骨体积分数（BVF )、骨小梁厚度（Th. Th )和骨小梁数目（Th..N)均显著低于假手术组,差异均 具有统计学意义（P <0. 05 );实验组的骨表面积体积比（BS/BV )和骨小梁间隙（Th. Sp)均显著高于假手术组,差异均具有统计学意义（P <0.05 )。三维重建及组织学观察发现：与假手术组相比,实验组中骨小梁数量减少,排列稀疏、骨小梁多处断裂,失去正常的髓腔结构。术后1年实验组中的骨组织微观结构显著差于假手术组。结论 去势手术联合激素注射的方法可以显著降低绵羊腰椎的BMD, 可以显著破坏绵羊腰椎的微观结构,显著降低绵羊腰椎的骨质条件。去势手术联合激素注射的方法 可用于建立骨质疏松动物脊柱模型。     

中国先天性双侧输精管缺如患者CFTR基因全部外显子突变检测

目的:探讨我国先天性双侧输精管缺如患者CFTR基因检测的必要性。方法:采用PCR技术结合DNA直接测序的方法检测9例先天性双侧输精管缺如患者CFTR基因全部外显子的突变情况,并在NCBI和Cystic Fibrosis Mutation Database在线比对。结果:除非编码区突变和已经报道的SNP位点之外,9例先天性双侧输精管缺如患者中4例新发现4种不同于西方人已知突变类型的外显子区突变,均为杂合子错义突变。结论:中国先天性双侧输精管缺如患者CFTR基因外显子区存在不同于西方人的突变,有必要对中国先天性双侧输精管缺如患者进行CFTR基因突变检测。     

胸段硬膜外阻滞复合全身麻醉在高血压患者腹腔镜手术中的应用

目的:比较胸段硬膜外复合全身麻醉与全身麻醉在腹腔镜手术中对高血压患者血流动力学的影响.方法:60例原发性高血压患者()均分为硬膜外复合全麻组(Y组)和全麻组(Q组),在腹腔镜下行胆囊切除术.分别记录入室时、诱导后、插管即刻、插管后5分钟、拔管即刻、拔管后5分钟的SBP、DBP、HR.结果:Y组患者各时点的SBP、DBP均显著低于Q组(P＜0.01).结论:硬膜外复合全身麻醉比全身麻醉对患者血流动力学影响要小.     

不同方案治疗慢加急性乙型肝炎肝衰竭的疗效研究

目的探讨慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者最优化的临床治疗方案。方法收集2008年1月—2010年1月在福建医科大学附属传染病医院住院治疗的302例慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者,所有患者分为A组（内科治疗）57例,B组（内科＋抗病毒治疗）80例,c组（内科＋抗病毒＋人工肝治疗）124例,D组（内科＋抗病毒＋人工肝＋中医治疗）41例。观察患者治疗基线、治疗第1、4、8、12周及治疗结束时的肝功能、。肾功能、凝血酶原活动度（胛A）、HBVDNA等指标,并在治疗结束后随访48周观察其存活情况。应用Kruskal—Willis H检验比较治疗后的临床疗效,应用Cox比例风险回归模型进行生存分析。结果治疗4周后四组间的临床疗效差异无统计学意义（H=3．213,P=0．360）,治疗12周后的临床疗效差异有统计学意义（H=8．722,P=0．033）。四组1年病死率分别为36．84％（21／57）、32．50％（26／80）、26．61％（33／124）和24．39％（10／41）。C组治疗方法的死亡风险是B组的0．566倍（P=0．036）;D组治疗方法的死亡风险是B组的0．396倍（P=0．016）。结论在内科治疗的基础上加用核苷（酸）类药物及人工肝单纯血浆置换术可明显提高慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者的生存率。     

肾集合管癌临床及病理分析

目的 分析肾集合管癌(collecting duct carcinoma,CDC)的临床及病理特点. 方法 1999年1月至2010年12月收治CDC患者11例,男6例,女5例.年龄22～67岁,平均55岁.主要症状为血尿、腰腹痛.实验室检查无阳性发现.CT检查示肿瘤直径2.1～8.5 cm,平均5.6 cm.肿瘤位于肾髓质或同时伴有肾皮质、肾盂浸润,边界不清,病变肾脏外形增大,但肾脏轮廓基本存在,增强后呈不均匀轻～中度强化. 结果 8例行根治性肾切除术,3例行姑息性肾切除术.肿瘤切面呈灰白色,浸润性生长;以腺管乳头状结构为主,部分肿瘤细胞呈靴钉状突向腺腔内,肿瘤间质纤维组织增生明显,有较多淋巴细胞及浆细胞浸润;免疫组化染色检查UEA-1、EMA、PNA、HMW-CK表达阳性,而CD10表达阴性.10例获得随访,随访时间0.3 ～8.0年,平均2.8年.随访期间死亡7例,平均生存期为12.5个月,2例无瘤生存分别9个月和8年,1例仍在化疗中,1例失访. 结论 CDC是一种非常少见的肾癌类型,确诊主要依据病理学检查,肿瘤恶性程度高,进展迅速,预后差.     

尿道下裂中阴茎下曲的外科矫正

目的 探讨尿道下裂患儿中阴茎下曲的分类诊断及其针对性治疗的重要性与意义.方法 对中山大学附属第一医院1989 -2011年诊治的尿道下裂合并阴茎下曲的患儿进行随机抽样回顾与对照研究.患儿分两组:A组为传统组(232例),术前仅依据临床症状或人工刺激诱发勃起诊断阴茎下曲,术中经验性地进行下曲纠正,未进行客观评估,下曲纠正方法包括阴茎脱套、浅深筋膜松解、尿道板离断等;B组为研究组(25例),术前依据临床症状和人工刺激诱发勃起诊断阴茎下曲外,均严格实行术中阴茎海绵体盐水注射人工勃起试验对阴茎下曲进行分类诊断、针对性治疗以及矫正效果评估.根据病因病理不同,将阴茎下曲分为皮肤型、筋膜型、尿道型、海绵体型及阴茎头型.下曲纠正方法除了针对性选用A组的术式外,接受不同方式白膜折叠术者占24％(6/25). 结果 A组术后阴茎下曲持续或复发者86例(37％),痛性勃起者25例(11％),患者或家属对下曲改善满意与基本满意者183例(79％),随访时年龄≥18岁者25例,IIEF-5评分＜21分者7例(28％).B组阴茎下曲单一类型者7例(28％),合并类型者18例(72％),术后随访无下曲持续与复发,无痛性勃起,患者或家属对下曲改善满意度为100％.两组阴茎下曲疗效差异有统计学意义(P＜0.05).B组中折叠组(6例)矫正前后阴茎勃起时长度分别为(4.58±1.59)、(6.16±2.54) cm;非折叠组(19例)分别为(4.01±1.18)、(5.82±1.51)cm,两组术后阴茎勃起长度均较术前明显增加(P＜0.05),但组间比较差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 应重视尿道下裂患儿阴茎下曲的分类病因病理诊断,针对性地选用下曲纠正治疗方式能进一步提高尿道下裂治疗效果.尿道下裂中阴茎下曲的病因病理改变可单一也可合并存在.阴茎下曲纠正术能增长阴茎长度,与其他阴茎下曲矫正术相比,阴茎背侧白膜折叠术对阴茎长度的影响无明显差异.     

人前脑啡肽基因修饰人胚胎肾细胞的构建

目的 构建人前脑啡肽基因(hPPE)修饰的人胚胎肾细胞(HEK293细胞).方法 重组质粒pcDNA3.1(+)/hPPE经限制性内切酶HindⅢ和Not Ⅰ进行双酶切获得hPPE基因,运用基因重组技术将hPPE基因与表达载体同源重组,转染293T细胞进行慢病毒包装、扩增、纯化,测定病毒滴度,再将重组的慢病毒载体转染HEK293细胞.用Western blot法检测hPPE基因在HEK293细胞中的表达.结果 重组慢病毒载体阳性克隆测序结果和基因库的hPPE基因序列完全一致.含有hPPE基因的慢病毒载体,滴度为2.07×108TU/ml.转染慢病毒载体后的HEK293细胞,在荧光显微镜下未见到GFP荧光.转染Ubc-GFP-L.V.空病毒载体的HEK293细胞,可见到较强的荧光.Western blot法检测到经慢病毒载体转染后的HEK293细胞中hPPE基因表达呈阳性.结论 成功构建了hPPE基因修饰的HEK293细胞,使hPPE基因可在HEK293细胞中稳定表达.     

ERβ对小鼠阴茎海绵体血管内皮保护作用的实验研究

目的:初步探讨雌激素受体β(ERβ)对小鼠阴茎血管内皮的保护作用.方法:随机选取ERβ基因敲除(ERβKO)雄性小鼠和相应野生型雄性小鼠各12只,随机分为4组:正常对照组、ERβKO组、野生型+TNFα处理组和ERβKO +TNFα处理组.ERβKO组及正常对照组腹腔注射生理盐水,野生型+TNFα处理组和ERβKO+TNFα处理组给予TNFα 6μg/(kg·d)腹腔注射,连续14 d.观察阿朴吗啡诱导的自发勃起反应;制备阴茎组织切片,内皮细胞标志物CD34、vWF免疫组化染色观察海绵窦内皮细胞变化,TUNEL法检测海绵体组织细胞凋亡情况.结果:与正常对照组相比,ERβKO组勃起潜伏期延长(P＜0.05),但勃起次数无显著差异;ERβKO+ TNFα组与野生型+ TNFα组潜伏期显著延长(P＜0.05),勃起次数显著减少(P＜0.05),以ERβKO +TNFα组变化更显著.免疫组化结果显示,与正常对照组(CD34:3.00±0.00,vWF:2.75±0.50)比较,海绵体组织CD34、vWF蛋白表达在ERβKO组(CD34:2.25±0.50,vWF:2.00±0.00)、ERβKO +TNFα组(CD34:0.25±0.50,vWF:0.33±0.58)、野生型+TNFα组(CD34:1.50±0.58,vWF:1.25±0.50)均显著减少(P＜0.05),且ERβKO +TNFα组比野生型+TNFα组减少更显著(P＜0.05).仅在ERβKO +TNFα组海绵体发现凋亡细胞.结论:ERβ基因敲除后,尤其在内皮损伤因素TNFα作用下,小鼠阴茎血管内皮细胞减少,提示ERβ对阴茎海绵窦内皮具有保护效应.     

骨髓基质干细胞联合血管束植入构筑血管化组织工程骨

目的 研究兔骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)联合动静脉血管束植入异种脱蛋白松质骨(xenogeneic deproteinised cancellous bone,XDCB)构筑血管化组织工程骨,为构建组织工程化骨提供新的思路.方法 从兔髂嵴抽骨髓培养制备兔BMSCs,将第3代BMSCs种植于多孔XDCB并进行成骨诱导2周.手术中分离兔隐动、静脉血管束(vascular bundle,VB),以备穿过有孔的XDCB中.取24只新西兰大白兔,其中12只游离双侧兔隐动静脉血管束,共24侧;另外12只兔仅切开股骨外皮肤植入异种骨,共24侧.实验分4组(n=12),A组为单纯材料植入皮下组(XDCB组),B组为干细胞植入材料组(XDCB+ BMSCs组),C组为血管束植入材料组(XDCB+ VB组),D组为干细胞+血管束植入材料组(XDCB+ BMSCs+VB组),各组交叉配对.分别于术后2、4、8周行大体解剖、碱性磷酸酶(ALP)活性检测、茜素红(ARS)染色、组织切片等检查,观察各组移植物血管化情况.结果 D组血管化组织工程骨组可见到血管新生、部分新生骨情况优于B组,也优于C组,而A组的异种骨中未测及相应血管化及成骨效能.结论 BMSCs联合动静脉血管束植入XDCB构筑的血管化组织工程骨有一定的成骨效能,并且可见到材料内部血管化,为构建组织工程化骨提供了新的思路.     

脾切除对肝大部分切除术后细菌移位的影响

目的 观察脾切除对大鼠肝大部分切除术后细菌移位的影响.方法 将SD大鼠随机分为3组:假手术组(SO组),2/3肝切除组(PHx组),肝切除加脾切除组(PHx +Sp组).85只大鼠中30只用于测定门静脉压力,55只用于分析细菌移位、血浆内毒素、血浆D-乳酸、肠组织病理学及免疫功能.结果 PHx组门静脉压力(13.34±0.64) cmH2O(1 cmH2O=0.098 kPa)显著高于SO组(7.64±0.44) cm H2O和PHx+ Sp组(10.30±0.69) cm H2O(P＜0.01).PHx组的细菌移位率高于SO组(65.00％比6.67％;P ＜0.01),也明显高于PHx+ Sp组(25.00％;P ＜0.05).大鼠血浆内毒素中位数SO组为0.00 ng/L,PHx组为4.05 ng/L,PHx +Sp组为1.47 ng/L(P ＜0.01).血浆D-乳酸在SO组和PHx+ Sp组也较PHx组低(分别为1.68、23.36、39.09 g/L,P＜0.01).结论 脾切除能降低肝大部分切除大鼠门静脉压力,增强肠黏膜屏障功能,减少内毒素和细菌移位的发生.