PC12细胞化学缺氧复氧损伤与缺氧诱导因子1表达的关系

目的 研究缺氧诱导因子1(HIF1)在PC12细胞化学缺氧复氧损伤中的作用。方法 在培养液中加入和去除氯化钴模拟化学缺氧和复氧，以乳酸脱氢酶(LDH)漏出和细胞超微结构改变作为细胞损伤指标，观察化学缺氧和复氧后不同时间细胞损伤和HIF1 α蛋白变化。结果 在氯化钴模拟化学缺氧实验中，LDH漏出明显增加，8h达高峰，随后逐渐下降，电镜结果与LDH改变相一致，HIF1 α蛋白表达在化学缺氧后2，4，8和12h均明显增加，8h达高峰，提示化学缺氧8h后细胞损伤逐渐减轻可能与HIF1 α蛋白水平升高有关。在模拟复氧实验中，LDH和细胞形态学改变都显示化学复氧8h细胞损伤最为严重，而HIF1 α蛋白表达在化学复氧4和8h均明显下降，提示细胞化学复氧损伤可能与HIF1 α蛋白水平下降有关。结论 HIF1对神经细胞化学缺氧复氧损伤具有保护作用。     

黄栌药学研究概况

在广泛文献检索基础上,综述了黄栌的种属、成分、药理、临床应用等资料,为深入开发利用提供参考依据。     

rhTNF-α对成骨向分化前后的人脂肪基质细胞分泌血管生成相关生长因子的影响

目的：研究在重组人肿瘤坏死因子（recombinant human tumor necrosis factor alpha,rhTNF-α）刺激下人脂肪基质细胞（human adipose tissue-derived stromal cells, hADSCs）增殖的改变及成骨向分化前后血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、成纤维细胞生长因子2（fibroblast growth factor-2,FGF-2）和胰岛素样生长因子1（insulin-like growth factor-1,IGF-1）分泌的变化。方法：采用吸脂术获得的第4代hADSCs,以终浓度为0、1、5、10、50、100 μg/L的rhTNF-α刺激hADSCs,分别在48、72、96 h后行MTT法检测不同浓度rhTNF-α对hADSCs增殖的影响;并以该浓度梯度的rhTNF-α刺激hADSCs,24 h后收集上清,以ELISA法检测VEGF、FGF-2和IGF-1的分泌情况;在成骨向诱导的第1、3、7、14天收集细胞上清,ELISA法检测上述3种生长因子分泌的变化,收集细胞上清前24 h更换培养基,并在相应孔中加入rhTNF-α,使其终浓度为10 μg/L。所有ELISA数据均以相应培养孔的细胞数进行校正。结果：rhTNF-α能促进hADSCs的增殖,其作用表现为一定的浓度和时间依赖。相比于对照组,48 h时,10 μg/L rhTNF-α对增殖的促进作用并不明显,但96 h时则表现为促进作用（P<0.01）,而100 μg/L rhTNF-α在48 h表现为抑制作用（P<0.01）,96 h时则表现为明显的促进作用（P<0.01）。相对于对照组,rhTNF-α可以显著促进hADSCs分泌VEGF、FGF-2和IGF-1（P<0.01）;hADSCs经成骨向诱导后,上述3种生长因子的分泌有增加的趋势;不同成骨向分化阶段的hADSCs用10 μg/L rhTNF-α刺激后,在诱导第1天,rhTNF-α显著促进VEGF的分泌（P<0.01）,但对FGF-2和IGF-1的分泌无显著性影响;在诱导第3天和第7天,rhTNF-α对VEGF（P<0.01）、FGF-2（P<0.05）和IGF-1（P<0.05）的分泌均有促进作用;但在第14天则抑制VEGF（P<0.01）、FGF-2（P<0.05）和IGF（P<0.05）的分泌。结论：一定浓度的rhTNF-α对hADSCs的增殖有促进作用;hADSCs分泌VEGF、FGF-2和IGF-1具有rhTNF-α的浓度依赖;在不同成骨向分化阶段,rhTNF-α对hADSCs分泌VEGF、FGF-2和IGF-1这3种生长因子的作用不同。     

罗哌卡因与布比卡因用于腰麻硬膜外联合阻滞的效疗比较

目的：比较0．75％盐酸罗哌卡因与0．75％盐酸布比卡因在腰麻硬膜外联合阻滞中的效果。方法：50例择期妇科手术患者（ASAⅠ～Ⅱ级）随机分为两组（n=25）。分别用0．75％罗哌卡因2ml和0．75％布比卡因2ml行蛛网膜下腔阻滞。观察两组感觉、运动阻滞起效及恢复时间和用药后的不良反应。结果：两组感觉阻滞起效时间、恢复时间无明显差异。运动阻滞起效时间罗哌卡因明显慢于布比卡因（P〈0．05），运动恢复时间明显快于布比卡因（P〈0．05）。结论：0．75％罗哌卡因用于腰麻能达到完善的麻醉效果，感觉阻滞与0．75％布比卡因相似，运动阻滞起效慢，但恢复迅速。     

鸡蛋中卵黄高磷蛋白的提取

建立了一种简单且适合于批量提取鸡蛋中的卵黄高磷蛋白的方法．先分离出其它水溶性蛋白质,再将沉淀物脱去脂肪,然后用１０％的ＮａＣｌ溶液（ｐＨ７．０）从所得的颗粒中提取卵黄高磷蛋白．每１００ｇ蛋黄提取１ｇ卵黄高磷蛋白粗制品,含氮１１．２２％,含磷７．７％,氮磷含量比值３．６４．卵黄高磷蛋白在ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００图谱上有两个主峰,分别是α－ＰＶ和β－ＰＶ,相对分子质量为１６００００和１９００００．在聚丙烯酰胺凝胶电泳上出现相对应的两条谱带．经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳后,则出现相对分子质量从１０４～９×１０４左右的多条谱带,预示卵黄高磷蛋白是由多亚基组成的     

HPA-1a抗体SPR技术定量检测方法的建立

目的:建立针对人类血小板抗原(HPA)-1a抗体的表面等离子体共振(SPR)技术定量检测方法.方法:以氨基偶联法在芯片表面偶联重组蛋白,采用SPR方法检测不同浓度的标准抗血浆样本,优化实验条件,在检测范围内绘制标准曲线,并分析其敏感性、特异性、准确性和精密度.结果:利用SPR技术建立针对HPA-1a抗体的定量检测方法,...     

慢性肝炎和肝炎后肝硬化患者能量代谢的研究

目的了解慢性肝炎（慢肝）与肝炎后肝硬化（肝硬化）患者的物质能量代谢与摄入特点，以有效指导营养治疗。方法采用间接测热法对60例慢肝（慢肝组）和60例肝硬化患者（肝硬化组）的静息能量消耗水平进行测定，分别与Harris—Benedict公式计算的基础能量消耗和膳食调查计算的食物能量摄入进行比较；分析静息能量消耗与营养评价指标的相关性。结果肝硬化组的静息能量消耗（77±21）kJ·kg^-1·d^-1，低于基础能量消耗（95±16）kJ·kg^-1·d^-1（t=-6．49，P〈0．01），能量摄入（102±33）kJ·kg^-1·d^-1，是静息能量消耗的1．42±0．61倍，其中蛋白质摄入（0．84±0．31）g·kg^-1·d^-1，是静息蛋白质消耗[（1．11±0．42）g·kg^-1·d^-1的0．85±0．52倍，呈负氮平衡（-6．29±4．62）；慢肝组的静息能量消耗[（93±18）kJ·kg^-1·d^-1]与基础能量消耗[（98±8）kJ·kg^-1·d^-1]比较，差异无统计学意义（P〉0．05），能量摄入为（127±34）kJ·kg^-1·d^-1，是静息能量消耗的1．41±0．43倍，其中蛋白质摄入（1．02±0．29）g·kg^-1·d^-1，是静息蛋白质消耗（0．87±0．34）g·kg^-1·d^-1的1．31±0．61倍，呈负氮平衡（-2．02±4．07）；与慢肝组比较，肝硬化组的静息能量消耗、能量及三大能量营养素摄入量、血清白蛋白和前白蛋白水平均显著低下（P〈0．01），体重下降明显（P〈0．01），负氮平衡严重（P〈0．01）；肝硬化组的能量摄入与静息能量消耗和基础能量消耗的比值呈正相关（P〈0．05），血清前白蛋白与蛋白质氧化率呈负相关（P〈0．05）。结论肝硬化患者的静息能量消耗呈低代谢状态；负氮平衡是慢肝与肝硬化患者的共同营养问题；早期预防慢性肝病患者的营养不良能够改善其远期预后。     

沙门氏菌胞周蛋白二硫键异构酶DsbA对乙肝疫苗HBsAg'a'表位构象的作用研究

目的:研究沙门氏菌胞周蛋白二硫键异构酶DsbA对乙肝疫苗HBsAg'a'表位构象的形成作用.方法:将沙门氏菌胞周蛋白二硫键异构酶DsbA基因克隆于PET32b载体上,与乙肝疫苗HBsAg'a'表位载体共转BL21菌,运用流式细胞仪和荧光显微镜观察HBsAg'a'表位构象的形成.结果:在没有沙门氏菌胞周蛋白二硫键异构酶D...     

HER-2基因原位杂交方法学探讨

目的 尝试用新型自动化原位杂交仪(HS400Pro)建立规范化、标准化操作步骤.方法 可有效降低实验所需探针浓度、提高杂交效率.对5例已知HER-2阳性的乳腺癌存档蜡块,采用动态杂交技术行2种不同DNA探针标记(DIG和FITC),分别用手工和HS400Pro全自动杂交检测系统对比检测结果.结果 探针用专利杂交液按1∶40稀释后,采用新型自动化原位杂交仪37℃杂交12 h与手工37℃杂交18h结果一致.说明该仪器可以基本替代手工开展ISH.结论 自动化原位杂交仪的使用是实现ISH自动化、标准化、规范化的好方法.但要继续扩大检测样本量,找出HS400Pro的最佳杂交条件.     

The effect of folic acid on genetic damage induced by ethanol in human lymphoblast cell line

目的:探讨叶酸(folic acid,FA)对乙醇(ethanol,EtOH)诱发的人成淋巴细胞遗传损伤的影响.方法:人成淋巴细胞株GM12593培养在含有不同FA浓度(20、200、2 000 nmol/L)的RPMI-1640培养基中,并同时在每种FA浓度的培养体系中分别加入0.09％、0.36％和1.34％ (V/V)的EtOH,8 d后用细胞松弛素B(cytochalasin B,CB)处理28 h,胞质阻断微核细胞组分析(cytokinesis-block micronucleus cytome assay,CBMN Cyt)比较不同培养条件下的细胞遗传损伤,包括微核化双核细胞(micronucleated binueleated cell,MNed BNC)、核芽(nuclear bud,BUD)、核质桥(nucleoplasmic bridges,NPB)的频率差异.结果:乙醇在受试细胞中诱发MNed BNC、BUD和NBP频率显著升高(P＜0.01);2 000 nmol/L的叶酸能显著降低由乙醇诱发的MNed BNC、BUD和NBP频率(P＜0.01).结论:乙醇对细胞遗传物质具有损伤效应,叶酸对乙醇的遗传毒性具有防护效应.