重组人乳头瘤病毒6型病毒样颗粒的免疫原性分析

目的　研究重组人乳头瘤病毒 6型 (humanpapillomavirustype 6 ,HPV 6 )病毒样颗粒(virus likeparticle ,VLP)的免疫原性。方法　重组杆状病毒在昆虫细胞中表达制备的HPV 6L1VLP(L1 VLP)和HPV 6L1+L2VLP(L1+2 VLP)经鉴定后 ,用于免疫BALB/c小鼠 ,对诱导的体液免疫和细胞免疫反应进行了检测。结果　电镜观察显示L1 VLP和L1+2 VLP二者形态上无明显差异 ,为圆形颗粒 ,直径约 5 0nm ,SDS PAGE和Westernblot分析表明 ,L1+2 VLP中L1和L2蛋白摩尔比例为 4∶1。用ELISA法测定免疫小鼠血清抗体滴度 ,加佐剂L1 VLP免疫组和加佐剂L1+2 VLP免疫组血清针对HPV 6L1VLP的滴度在 1∶10 0 0 0以上 ,高于未加佐剂组免疫血清滴度 (1∶2 0 0 0 ) ,L1+2 VLP免疫诱导出了特异于L2抗原的抗体。血清抗体主要识别HPV 6构象依赖性抗原表位 ,与HPV 11抗原显示出一定的交叉反应 ,而与HPV 16无明显交叉反应。免疫小鼠脾淋巴细胞体外经HPV 6L1VLP再激活后出现了特异性增殖反应 ,3H TdR掺入值与未免疫组之间差异有显著性 (P <0 .0 1) ,L1 VLP和L1+2 VLP两组间差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,L1 VLP和L1+2 VLP免疫组刺激指数 (SI)分别为 6 .4和 6 .2 ,阴性对照组SI为 1.1。HPV 6L1VLP再刺激特异地诱导免疫组脾淋巴细胞IL 2和IL 10分     

Ultrastructural evidence for neurogenically mediated changes in blood vessels of the rat dura mater and tongue following antidromic trigeminal stimulation.

We investigated the effects of unilateral electrical trigeminal ganglion stimulation (0.1 or 1.0 mA, 5 Hz, 5 ms, 5 min) on the morphology of blood vessels within the rat dura mater and tongue using light and transmission electron microscopy. Stimulation at both intensities caused changes which were confined to the ipsilateral post-capillary venules except in the tongue where arterioles were affected as well. Changes were more marked after 1.0 mA. Dramatic increases in the numbers of endothelial pinocytotic vesicles were found along the luminal and abluminal surfaces ipsilateral to the stimulation. Tight junctions remained largely intact, except that injected ferritin particles were occasionally trapped inside these junctions. Cytoplasmic microvilli and endothelial blebs were sometimes present as well. Approximately 80% of the examined dural post-capillary venules showed one or more of these endothelial changes. Horseradish peroxidase injected intravenously 5 min prior to stimulation was detected in the extracellular space surrounding dural blood vessels and within pinocytotic vesicles. Ferritin injected similarly, was also localized in post-capillary venule walls, interstitial spaces, intraendothelial vesicles and in vacuoles. Platelet accumulation and aggregation were present in approximately 10% of post-capillary venules in dura and tongue. These changes were associated with mast cell secretion, but neither vascular nor mast cell activation was observed in adult rats in whom C-fibers were destroyed during the neonatal period with capsaicin. The present observations provide morphological evidence which supports findings from previously reported albumin tracer studies suggesting enhanced transport and endothelial activation following electrical stimulation of small caliber afferent fibers.     

恶性疟原虫FCC1/HN株环子孢子蛋白的原核表达、纯化及其对肝细胞靶向作用的观察

目的从恶性疟原虫FCC1／HN株基因组中扩增得到环子孢子蛋白(circumsporozoite protein,CSP)的全长编码基因,克隆至原核表达载体pET-32c中进行表达纯化,观察重组环子孢子蛋白对肝细胞的结合能力,探讨其作为原发性肝癌基因治疗的靶向分子的可行性。方法根据恶性疟原虫3D7株环子孢子蛋白的编码序列设计一对引物,利用聚合酶链反应(PCR)技术从恶性疟原虫FCC1／HN株基因组中扩增出CSP的全长编码基因,将其克隆到载体pGEM-T中,通过基因测序加以证实;进一步亚克隆至原核表达载体pET-32c中,在大肠杆菌BL21中用IPTG诱导表达,表达产物用Ni2+螯合柱亲和纯化,采用免疫印迹技术(WB)对纯化的融合蛋白进行免疫反应性检测;采用免疫组化(IHC)技术观察重组环子孢子蛋白对不同组织细胞的结合能力。结果从恶性疟原虫FCC1／HN株基因组中成功扩增到1263 bp的全长CSP基因,该基因在原核系统中经诱导表达出一相对分子质量(Mr)约62×103大小的融合蛋白,表达产物以包涵体的形式存在;通过Ni2+亲和柱纯化获得重组CSP融合蛋白;WB表明,重组CSP融合蛋白能被疟原虫阳性血清特异性识别;免疫组化结果显示重组CSP融合蛋白能够与肝癌和正常肝细胞特异性地结合,与其他组织来源的细胞则未见反应。结论CSP是疟原虫子孢子表面主要的蛋白,重组环子孢子蛋白作为原发性肝癌基因治疗的靶向分子具有一定的潜在应用价值。     

外源性五羟色胺大鼠肺出血模型及其与浓度关系

目的　通过外源性五羟色胺 (5 -HT)气管滴入建立新生大鼠肺出血模型及其与浓度关系 .方法　模型制作 :日龄 4～ 5天Wistar二级大鼠 5 0只 ,随机分为 4组 :生理盐水对照组 (A组 )及 3种不同浓度外源性 5 -HT实验组(B、C、D组 ) :经气管导管分别滴入生理盐水和不同浓度 5 -HT ,4小时后处死 ,观察肺大体及组织病理改变 ,将肺出血程度分为 5级 :Ⅰ正常 ;Ⅱ肺水肿 ;Ⅲ点状肺出血 ;Ⅳ局灶性肺出血 ;Ⅴ弥漫性肺出血 ,选择出制作肺出血模型的最佳的浓度 .结果　不同浓度 5 -HT气管内滴入均能引起不同程度肺出血 ,但随着浓度增加 ,B、C、D三组间的肺出血程度无差异 (p >0 .0 5 ) ,其中D组死亡率 30 % ,对照组及B组和C组均无死亡 ,死亡鼠肺为弥漫性出血 .结论　 5 -HT可致大鼠肺出血 ,以 1× 10 -5mol/ml浓度为宜 ,随着 5 -HT浓度增加 ,大鼠死亡率增加 ,但肺出血发生率无差异     

冠状动脉血管直径测量方法的研究

心脏是人体生命活动的重要器官，能否正常工作主要是由心血管系和心传导系决定。冠状动脉是给心脏供血的唯一途径，心肌能否得到足够的营养、保持连续有节奏地运动，完全取决于冠状动脉是否能不断地供给其营养。冠状动脉直径的测量以及血管直径参数对于反映心脏功能和疾病的诊断具有重要意义。文中提出一种新型的、简便的血管直径测量方法，利用计算得到的血管直径，我们就可以判别心血管狭窄位置。     

中枢神经系统感染患儿血脑屏障与脑脊液白蛋白指数的变化

目的探讨中枢神经系统感染患儿血脑屏障（blood-brain barrier,BBB）与脑脊液（cerebrospinal-fluid,CSF）白蛋白指数的变化。方法采用溴甲酚绿法和免疫比浊法检测18例化脓性脑膜炎患儿急性期、恢复期及22例病毒性脑炎患儿急性期血清和CSF中白蛋白水平,并计算出CSF白蛋白指数。与正常对照组比较。结果化脓性脑膜炎、病毒性脑炎患儿急性期CSF白蛋白、CSF白蛋白指数显著高于正常对照组（P〈0.001）,且化脑组显著高于病脑组（P〈0.001）。化脑组恢复期患儿CSF白蛋白、CSF白蛋白指数与对照组无明显差异（P〉0.05）。结论监测CSF白蛋白和CSF白蛋白指数的水平可作为化脓性脑膜炎和病毒性脑炎早期诊断、鉴别诊断,以及判断BBB损伤程度的参考指标。     

品管圈对精神分裂症患者约束率及护理满意度的影响

目的总结和分析精神分裂症患者的护理中采用品管圈活动的临床效果。方法以本院于2017年8月—2019年6月收治的122例精神分裂症患者为研究对象,随机分为品管圈组和常规护理组,各61例。其中常规护理组患者选择传统的常规护理方法,而品管圈组患者则采取品管圈活动。比较两组患者的护理效果,对比指标主要有患者的约束率和护理满意度。结果品管圈组患者各项评价指标均优于常规护理组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论精神分裂症患者采用品管圈活动的总体临床效果较好,可提高患者的约束率,总体满意度高。     

2013年-2017年我国血站收入的结构变动情况分析△

目的：对我国不同类型血站的收入状况进行问卷调查和深度访谈,分析近年来我国血站收入结构变动情况及特征,找到影响血站收入结构变动的主要项目,合理优化血站收入结构。方法：2018 年8月采用普查的方法对全国353家（32 家血液中心、321 家中心血站）的收入状况进行问卷调查,同时选取山东省6地市中心血站的负责人进行深度访谈。对收集的血站收入数据,运用结构变动方法进行分析。 结果：2013年-2017年公益一类血站收入的结构变动度为24.22%,财政补助收入、事业收入是构成公益一类血站收入变动的主要来源,其中财政补助收入的贡献率53.20%;2013年-2017年我国公益二类血站收入的结构变动度为16.79%,财政补助收入、事业收入是构成公益二类血站收入变动的主要来源,其中贡献率最大的是事业收入49.99%。结论：财政补助收入、事业收入是影响血站收入结构变动的主要项目,两类血站的日常运营与建设对财政补助收入高度依赖,公益二类经营收入增幅不明显,发展不足。     

夜间最低血氧饱和度联合睡眠相关量表筛查儿童阻塞性睡眠呼吸暂停的应用

目的 评价夜间最低血氧饱和度(LSaO₂)联合OSA-18量表和针对儿童的改良版Epworth嗜睡量表(ESS-CHAD)初筛儿童阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)的准确性,以探讨更简便、快捷、可行的基层医院初筛疑似儿童OSA的方法。方法 纳入2020年8月13日—2021年2月8日就诊于本院耳鼻咽喉头颈外科睡眠监测中心完成整夜多导睡眠监测的儿童139例作回顾性分析研究,其家长在医生协助下完成OSA-18量表和ESS-CHAD。分析LSaO₂和两种量表及三者联合早期初筛疑似儿童OSA的诊断价值。结果 LSaO₂预测儿童是否患OSA的最佳界值为90.5%(P<0.00, AUC=0.82)。OSA-18和ESS-CHAD依据不同界值分别诊断儿童OSA的灵敏度最高,分别为74.8%、22.7%。LSaO₂/OSA-18,LSaO₂/ESS-CHAD、OSA-18/ESS-CHAD诊断儿童OSA的灵敏度最高,分别为88.2%、68.1%、77.3%。 结论 LSaO₂有诊断儿童OSA的临床价值,OSA-18量表较ESS-CHAD初筛疑似儿童OSA有更高的灵敏度,但特异度低,LSaO₂联合OSA-18量表诊断儿童OSA的灵敏度、特异度均较其他联合诊断方式高。在无法进行睡眠监测的基层医院可考虑应用LSaO₂ 与OSA-18量表结合的方式初步筛查儿童OSA。