Erythrocyte membrane affinity chromatography,solid-phase extraction and UPLC-QTOF-MS/MS to screen active ingredients of Buyang Huanwu decoction

Buyang Huanwu decoction (BHD) is a well-known traditional Chinese medicine that has long been used to treat ischemic brain damage which is associated with hemorheology. To screen active ingredients in BHD responsible for reducing blood viscosity by reducing red blood cell (RBC) lesions to treat ischemic stroke, a method involving RBC membrane binding and solid-phase extraction (SPE) was developed in this study. The components of BHD interacting with RBC were analyzed by mass spectrometry and four compounds, calycosin, paeoniflorin, 6-hydroxy behenol-3,6-di-O-glucoside and calycosin-7-O-β-d-glucoside, showed binding affinity to RBCs. An erythrocyte activity assay revealed that the identified ingredients promoted the activities of Na⁺-K⁺-ATPase, sialic acid and superoxide dismutase and reduced the content of cholesterol on the RBC membrane, suggesting a mechanism underlying their anti-erythrocyte aggregation activity. Based on these results, the RBC membrane binding assay combined with SPE and mass spectrometry is a novel and effective approach for screening potentially anti-erythrocyte lesion constituents in traditional Chinese medicines.

A method that uses erythrocyte membrane and solid-phase extraction to isolate the specific compounds of Buyang Huanwu decoction was developed.     

泥鳅粉对训练小鼠游泳力竭24h后心肌S100A4蛋白表达的影响

目的从心肌S100A4蛋白表达变化探讨生泥鳅干预对游泳训练力竭小鼠心肌的作用。方法24只健康雄性ICR小鼠分为安静组(C)、运动组(T)、泥鳅运动组(N),T组和N组游泳训练3w后进行力竭运动,24h后取材检测血清CK-MB,HE染色光镜下观察心肌组织,免疫组化法检测心肌P53和S100A4蛋白的表达。结果①N组力竭游泳时间显著地长于T组(<0.01),血清CK-MB活性显著地低于T组和C组(<0.05)。②T组的心肌细胞界限模糊、可见心肌纤维断裂和间质水肿,而N组无明显病理表现。③与C组比较,T组心肌P53蛋白的表达显著增高(﹤0.05);S100A4蛋白N组显著增高(﹤0.05)。结论负荷游泳训练并力竭24 h后小鼠的心肌细胞存在损害,生泥鳅干预能上调S100A4表达和减弱P53表达而降低损害。     

血清IL-8、IL-10、PCT在小儿肺炎支原体肺炎治疗中的临床应用

目的探讨血清中白介素-8(IL-8)、白介素-10(IL-10)和降钙素原(PCT)在小儿肺炎支原体肺炎发病中的临床价值。方法用ELISA法和化学发光法检测62例肺炎支原体肺炎患儿治疗前后及50例同期幼儿园和小学生健康体检者血清中IL-8、IL-10和PCT水平,结合临床相关检查资料,对检测结果采用SPSS18.0统计软件进行统计学分析,各组实验数据以均数±标准差(±)表示,各实验组间比较计量资料的t检验,<0.05为有统计学意义。结果 MPP组治疗前：IL-8(16.38±9.63 pg/ml)、IL-10(13.59±8.41 pg/ml)、PCT(0.68±0.52 mg/L)与对照组IL-8(4.66±3.92 pg/ml)、IL-10(5.67±3.03 pg/ml)、PCT(0.29±0.16 mg/L)浓度比较有显著性差异(<0.05);MPP组治疗6~8d后IL-8(5.15±4.49 pg/ml)、IL-10(6.42±5.06 pg/ml)、PCT(0.31±0.18 mg/L)浓度较治疗前均有明显下降,有显著性差异(<0.05),与健康对照组比较,两者差异无统计学意义(>0.05)。结论 MPP患儿入院治疗前、治疗后血清IL-8、IL-l0,PCT含量的变化对疾病的进展和疗效有一定指导意义,提示IL-8、IL-10和PCT在MPP发病机制中起重要作用。     

Exomic analysis of myxoid liposarcomas,synovial sarcomas,and osteosarcomas

Bone and soft tissue sarcomas are a group of histologically heterogeneous and relatively uncommon tumors. To explore their genetic origins, we sequenced the exomes of 13 osteosarcomas, eight myxoid liposarcomas (MLPS), and seven synovial sarcomas (SYN). These tumors had few genetic alterations (median of 10.8). Nevertheless, clear examples of driver gene mutations were observed, including canonical mutations in TP53, PIK3CA, SETD2, AKT1, and subclonal mutation in FBXW7. Of particular interest were mutations in H3F3A, encoding the variant histone H3.3. Mutations in this gene have only been previously observed in gliomas. Loss of heterozygosity of exomic regions was extensive in osteosarcomas but rare in SYN and MLPS. These results provide intriguing nucleotide‐level information on these relatively uncommon neoplasms and highlight pathways that help explain their pathogenesis. © 2013 Wiley Periodicals, Inc.     

Design,synthesis, and biological evaluation of thieno[3,2‐d]pyrimidine derivatives as potential simplified phosphatidylinositol 3‐kinase alpha inhibitors

A series of thieno[3,2‐d]pyrimidine derivatives as phosphatidylinositol 3‐kinase (PI3K) inhibitors was designed using the combination strategy. The synthesis and biological evaluation of the derivatives demonstrated their potent inhibition of PI3K, culminating in the discovery of 7 and 21 . Determination of a co‐crystal structure of 7 complexed with PI3Kα provided the structural basis for the high enzymatic activity. Furthermore, cellular investigation of compounds 7 and 21 revealed that they efficiently suppressed cancer cell lines proliferation through inhibition of intracellular PI3K/AKT/mammalian target of rapamycin pathway. The results provided potent simplified inhibitors of PI3K with a promising overall profile and a chemical series for further optimization to progress into vivo experiments.     

经口内镜下肌切开术对贲门失弛缓症患者食管动力的影响

目的探讨经口内镜下肌切开术(peroral endoscopic myotomy,POEM)初次治疗对贲门失弛缓症(achalasia,AC)患者术后食管动力的影响。方法纳入2012年1月至2016年6月期间于首都医科大学附属北京友谊医院就诊并行POEM治疗的AC患者,按研究设计完成各项检查、POEM治疗及随访观察,比较各型AC患者的POEM治疗成功率以及POEM治疗前后食管动力的改变。结果POEM术后6个月随访时,Ⅰ型AC患者的症状缓解率为100.0%(13/13),Ⅱ型为95.5%(42/44),Ⅲ型为90.1%(10/11)。与术前比较,术后1~6个月内下食管括约肌静息压[10.5(6.9,15.8)mmHg比24.6(18.3,35.1)mmHg,1 mmHg=0.133 kPa]、4 s整合松弛压[6.0(3.7,8.8)mmHg比21.8(15.3,28.0)mmHg]、上食管括约肌静息压[43.4(33.7,57.3)mmHg比45.3(33.2,71.1)mmHg]、上食管括约肌残余压[1.5(0.0,4.6)mmHg比3.9(1.1,6.9)mmHg]均明显改善(P均<0.05)。术后6个月,食管腔扩张的最宽直径较术前明显减小[(3.0±0.7)cm比(3.9±1.1)cm,P<0.001],总Eckardt评分较术前明显降低[1(0,2)分比6(5,8)分,P<0.001]。POEM术后,Ⅰ型AC患者食管体部均未出现蠕动恢复,Ⅱ型AC患者中有4例(9.1%,4/44)较术前恢复弱蠕动或期前收缩,Ⅲ型AC患者中10例(90.9%,10/11)较术前出现正常蠕动波、期前收缩或弱蠕动的比例增加。结论POEM术后不仅食管胃交界部流出道梗阻得到改善,而且食管体部动力也一定程度上发生改变,其中部分患者体部动力有一定恢复;但是这种变化在3个AC亚型表现不同,Ⅲ型最明显,其次是Ⅱ型,Ⅰ型则无明显改变。     

Ⅳ型肝门部胆管癌内镜治疗支架选择分析

目的 探究Bismuth分型Ⅳ型肝门部胆管癌内镜治疗支架的选择方法及经验。方法 回顾性分析2010年9月—2018年9月在兰州大学第一医院普外科就诊并接受经内镜逆行胰胆管造影术（endoscopic retrograde cholangiopancreatography, ERCP）治疗的65例Ⅳ型肝门部胆管癌患者临床资料。按照内镜引流方式不同分为3组:经内镜胆道内支架放置术（endoscopic retrograde biliary drainage,ERBD）组38例、ERBD+内镜下胆道金属支架置入 (endoscopic metal biliary endoprosthesis, EMBE)组23例、EMBE组4例;根据胆道造影方式不同分为造影剂组(n=26)、空气造影组（n=22）及无胆道造影组(n=17）。比较术后急性胆管炎发生率、总胆红素显著下降率及住院期间死亡率等指标。结果 3种引流方式相比,ERBD组、ERBD+EMBE组和EMBE组的急性胆管炎发生率分别为23.7%（9/38）、52.2%（12/23）和75.0%（3/4）,差异有统计学意义（χ2=7.499,P=0.006）。3组住院期间死亡率分别为5.3%（2/38）、13.0%（3/23）和50.0%（2/4）,差异有统计学意义（χ2=7.729,P=0.021）;两两比较,ERBD组和EMBE组之间差异有统计学意义（χ2=8.406,P=0.004）。3种造影方式相比,造影剂组、空气造影组和无胆道造影组的急性胆管炎发生率分别为57.7%（15/26）、27.3%（6/22）和17.6%（3/17）,差异有统计学意义（χ2=8.407,P=0.015）;两两比较,造影剂组和无胆道造影组之间差异有统计学意义（P=0.012）。结论 对于Ⅳ型肝门部胆管癌,胆道双塑料支架置入能显著降低患者术后急性胆管炎发生率及住院期间死亡率,可作为首选支架方案;术中造影剂的使用会增加术后急性胆管炎发生率,应慎用造影剂。     

结直肠侧向发育型肿瘤癌变的内镜学特征

目的 探讨结直肠侧向发育型肿瘤（laterally spreading tumor,LST）癌变的独立预测因素。方法 回顾性收集于2013年6月—2019年3月在首都医科大学附属北京友谊医院因结直肠LST行内镜治疗患者的性别、年龄、体重指数、吸烟史、病变的内镜学特征和病理学特点。用单因素分析寻找癌变的影响因素,对于其中差异有统计学意义的因素再纳入多因素Logistic回归分析。结果 共纳入了323例患者341处病变。假凹陷型LST的癌变率最高[85.48%（53/62）],其次为结节混合型[76.97%（117/152）],均显著高于颗粒均一型[29.51%（18/61）,P均＜0.001]和扁平隆起型[24.24%（16/66）,P均＜0.001]。单因素分析显示,假凹陷型（P＜0.001,OR=18.40,95%CI：7.46～45.42）、结节混合型（P＜0.001,OR=10.45,95%CI：5.30～20.58）、位于直乙部位（P＜0.001,OR=2.33,95%CI：1.47～3.69）、直径≥2 cm（P＜0.001,OR=2.60,95%CI：1.60～4.00）是病变发生癌变的危险因素。多因素Logistic回归分析表明,假凹陷型（P＜0.001,OR=17.51,95%CI：7.06～43.43）、结节混合型（P＜0.001,OR=8.25,95%CI：4.07～16.73）、直径≥2 cm（P=0.032,OR=1.80,95%CI：1.05～3.08）是结直肠LST发生癌变的独立预测因素。结论 当LST为假凹陷型、结节混合型或直径≥2 cm时病变发生癌变的风险高,需要采取整块切除的方式治疗。     

无痛肠镜与常规肠镜检查的前瞻性对照研究

目的探讨无痛肠镜和常规肠镜检查在临床工作中的选择。方法362例自愿接受无痛肠镜检查患者（无痛肠镜组）和323例自愿接受常规肠镜检查患者（常规肠镜组）纳入对照研究,均于检查结束后完成问卷调查,统计分析2组检查完成情况、操作时间、检查费用、不适反应发生情况以及问卷调查结果。结果无痛肠镜组和常规肠镜组检查完成率分别为98．9％（358／362）和89．8％（290／323）（P=0．337）,操作时间分别为（5．60±3．25）min和（7．71±5．70）min（P〈0．001）,平均检查费用分别为人民币886．54元／人和386．00元／人（P〈0．001）,操作相关不适反应总发生率分别为13．3％（48／362）与83．6％（270／323）（P〈0．001）,患者满意度评分分别为4（3-4）分和3（2-3）分（P〈0．001）,操作者满意度评分分别为4（34）和4（4-4）分（P〈0．001）。无痛肠镜组和常规肠镜组愿意再次接受相同检查方式检查的患者数分别为354例（97．79％）和225例（69．66％）（P〈0．001）,常规肠镜组愿意再次接受常规肠镜检查的相关因素分析结果显示男性患者（P=0．035）、无腹部手术史者（P〈0．001）、检查过程中未出现腹痛者（P=0．015）更愿意再次接受常规肠镜检查。结论常规肠镜检查虽然耗时较长,但可避免麻醉风险,且检查所需费用较低,仍是目前国内结直肠疾病检查不可欠缺的重要方法。内镜医师在选择肠镜检查方式时,不仅要考虑患者术中耐受,更要根据患者实际情况严格把握适应证,在充分利用现有医疗资源的前提下使患者得到及时的诊治。     

Laimer纤维在贲门失弛缓症患者中的表现情况

目的探讨Laimer纤维在贲门失弛缓症（AC）患者中的发生情况及其形态学特征。方法收集107例行经口内镜下肌切开术（POEM）治疗的AC患者的病例资料,重新筛查每例患者的POEM手术视频,根据患者性别、年龄段、AC内镜下Ling分型及Laimer纤维所在部位分类统计Laimer纤维发现率并行对比分析。结果44例存在Laimer纤维,发现率为41．12％（44／107）。不同性别、不同年龄段AC患者中发现率比较差异均无统计学意义（P〉0．05）;LingIIb型发现率最高（46．15％,12／26）,其次为I型（45．83％,22／48）,Ⅲ型无发现,Ling各型发现率比较差异无统计学意义（X2=2．042,P=0．564）;Laimer纤维均位于食管下段括约肌中,食管右侧壁发现率最高（36．45％,39／107）,其次为食管左侧壁（3．74％,4／107）,食管前壁无发现,食管各部位发现率比较差异有统计学意义（X2=107．468,P=0．000）,但是食管不同部位黏膜隧道开口者发现率比较差异无统计学意义（X2=7．055,P=0．070）。结论Laimer纤维较为普遍存在于AC患者食管下段括约肌中,且多见于食管右侧壁,但与AC的发病关系以及对食管下段括约肌功能的影响尚需进一步研究验证。