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高效液相-荧光检测法测定兔血浆羟基喜树碱方法的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 :为了测定羟基喜树碱在人体内的血药浓度 ,建立高效液相 -荧光检测法以测定兔血浆中羟基喜树碱的含量。方法 :色谱柱为DiscoveryC18(15cm× 4 6cm ,5 μm) ,流动相为柠檬酸缓冲液 -乙腈 - 75nmol·L-1磷酸二氢钾 (70∶2 3∶7) ,75nmol·L-1磷酸二氢钾中含 1%三乙胺。流速为 1 0mL·min-1,柱温为 4 0℃ ,荧光检测波长为λex36 3nm和λem5 30nm。结果 :该方法的线性范围为 13 76 5 6~ 195 7 4 4 6 8ng·mL-1(r =0 9993) ;提取回收率和方法回收率分别为 80 90 %~ 10 3 5 9% ,10 2 72 %~ 10 8 16 % ;日内RSD≤ 7 4 9% ,日间RSD≤ 9 4 0 %。最低检测限为 5 2ng·mL-1。结论 :主效渡相—荧光法专属性强 ,重现性好 ,操作简便 ,可用于羟基喜树碱的药代动力学研究和血药浓度监测。 相似文献
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人血管内皮细胞生长因子基因克隆、表达与纯化 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究人血管内皮细胞生长因子121(hVEGF121)基因在pET-24a(+)中的表达,获得高效表达、具有生物学活性的rhVEGF121。方法提取人原髓白血病细胞(HL60)总RNA,RT-PCR扩增hVEGF121基因,经DNA序列分析后,克隆于高效原核表达载体pET-24a(+),并转化到大肠杆菌B121(DE3)中,经IPTG诱导表达,超滤复性,DEAESephamseFastFlow阴离子交换和SephacryS-100分子筛色谱纯化后,以HUVEC测定其生物学活性。结果SDS-PAGE结果显示,目的蛋白质以包涵体形式存在,表达量达菌体总蛋白质的20%,纯化后rhVEGF121纯度达95%以上,生物学活性检测证实,具有刺激HUVEC增殖的功能。结论在原核系统中实现了hVEGF121的高效表达。 相似文献
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成牙骨质细胞体外矿化培养相关蛋白的时序性表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 检测骨涎蛋白(BSP)、硷性磷酸酶(ALP)、及牙骨质特异性蛋白—牙骨质附着蛋白(CAP)在成牙骨质细胞(CB)体外矿化培养过程中的时序性表达,并研究这一过程中CB的形态和生物学特征。方法 将CB接种在盖玻片上。分别培养6、12h、1-6d后,取出盖玻片,应用免疫细胞化学的方法检测这三种蛋白在CB上的表达。结果 CB接种在盖玻片6h后,在CB胞浆内三砘蛋白都有表达;在2、3d,细胞聚集形成分层状,BSP、ALP表达减弱,CAP不表达;4d后,聚集的细胞增殖并分化,形成具有矿化功能的细胞结节。此时,3种蛋白的表达强弱不等,BSP、ALP在结节细胞表达强,在周围细胞表达弱,而CAP只在结节细胞表达,在周围细胞不表达。之后的10-16d,细胞结节进一步形成矿化结节。结论 本实验揭示了CB在体外增殖、分化及矿化过程中,CAP,BSP和ALP的表达情况及细胞形态的变化。为CB在体内的增殖、分化、矿化及CB在体内形成牙骨质的研究提供了一些参考。 相似文献
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平滑肌是胃肠运动的基础,其收缩和舒张涉及电-机械偶联和药物-机械偶联。其中有钙离子和其他信号分子的参与。本文通过电生理特性,钙和钙动员,收缩装置和途径,信号转导途径和交叉对话来总结信号转导在胃肠平滑肌中的作用。 相似文献
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金属硫蛋白在食管鳞癌中的表达及其与增殖凋亡的关系 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:探讨金属硫蛋白在食管鳞癌中的表达及其与癌细胞增殖、凋亡的关系。方法:采用免疫组化法检测92例食管鳞癌组织中的金属硫蛋白(MT)、增殖细胞核相关抗原(Ki-67抗原)的表达,并用TUNEL法检测细胞凋亡指数。结果:92例食管鳞癌标本中65例MT呈阳性表达,阳性率为70.6%,明显高于正常食管粘膜上皮组织(3/20,P<0.01);MT表达与食管鳞癌患者年龄、性别、浸润深度及病变长度无关,而与组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移密切相关,MT与Ki-67抗原表达强度呈正相关,Pearson列联系数=0.227(P<0.05)。随MT表达强度的增加,癌组织凋亡指数逐渐降低。结论:MT表达与食管鳞癌的发生、发展密切相关,MT能促进癌细胞增殖,抑制细胞凋亡,可作为食管鳞癌治疗的新靶点。 相似文献
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目的探讨微小剂量肝素降低新生儿重度窒息并发全身炎症反应综合征(SIRS)的作用和机制,并观察其副作用。方法对我科2001年1月~2005年10月间94例重度窒息新生儿(不含新生早产儿窒息病例)作回顾性分析。治疗组48例,常规综合治疗基础上加用低分子肝素钠5U/(kg·次),皮下注射,每12h1次,连用3d。对照组46例,采用综合治疗。就组间1周内SIRS的发生率作对照分析。结果治疗组1周内SIRS发生率和对照组间存在比较显著差异(P<0.05〉,而新生儿颅内出血、上消化道出血、和皮下出血的发生情况比较无显著差异性(P均>0.05)。结论早期应用微小剂量肝素可有效降低重度窒息新生儿SIRS的发生率而不致增加继发器官出血的机会。 相似文献