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991.
目的 研究转染survivin反义mRNA对Jurkat淋巴瘤细胞生长的影响以及转染后淋巴瘤细胞对化疗药物的敏感性。方法 构建survivin反义mRNA真核表达质粒pcDNA3.1-反义(As)survivin;利用脂质体转染法将其转入高表达survivin mRNA T淋巴母细胞淋巴瘤Jurkat细胞系,用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)、免疫组织化学SP法、Western印迹法检测细胞中survivin表达;用细胞计数、流式细胞术(FCM)检测其细胞生长曲线、细胞凋亡指数,并进行光镜、电镜形态学观察;并对转染pcDNA3.1-Assurvivin前后Jurkat细胞分别加入4-羟基-环磷酰胺(CTX)、甲氨蝶呤(MTX)72h后,常规MTT检测细胞存活率。结果 RT—PCR检测转染pcDNA3.1-Assurvivin后48h、5和6周Jurkat细胞survivin mRNA表达,发现survivin mRNA表达皆低于对照组;转染后survivin蛋白表达也明显降低。转染pcDNA3.1-Assurvivin后Jurkat细胞生长倍增时间(52h)明显延长;用FCM检测细胞凋亡发现,转染pcDNA3.1-Assurvivin后Jurkat细胞凋亡指数[20.2%(48h)]明显高于对照组(转染空质粒和未转染组,2.1%和1.3%);5和6周为6.2%和6.8%,明显高于未转染细胞(1.3%和1.0%)。光镜、电镜观察见转染细胞出现较多凋亡细胞及一些变性肿胀细胞;MTT检测结果显示Jurkat细胞转染前后,经化疗药物4-羟基-环磷酰胺和甲氨蝶呤作用,转染细胞的抑制率明显大于未转染组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 survivin基因对Jurkat细胞系的生长起着重要的作用,抑制survivin基因表达在T淋巴母细胞淋巴瘤治疗中可能有重要的意义,该基因似可能作为治疗的靶点。  相似文献   
992.
目的:探讨了冠心病患者治疗前后血清SOD、ET及T淋巴细胞亚群水平。方法:分别应用放免法和单克隆抗体法对42例冠心病患者进行了血清SOD、ET及T淋巴细胞亚群水平检测,并与35名正常健康人作比较。结果:冠心病患者在治疗前血清ET水平显著地高于正常人组(P<0.01),而SOD和CD4/CD8比值明显地低于正常人组(P<0.01),经治疗后一个月则与正常人组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:检测冠心病患者血清SOD、ET及T淋巴细胞亚群水平对判断病情及其预后均具有一定的临床实用价值。  相似文献   
993.
目的 建立一种去除胰岛β细胞的α细胞大鼠模型.方法 12周龄SD大鼠分为3组(n=8):正常对照组(NC)、模型1组(M1)和模型2组(M2),M1和M2组大鼠分别腹腔注射1次链脲佐菌素(STZ)100和150 mg/kg,5 d后处死大鼠,胰腺组织匀浆检测胰岛素(Ins)和胰高糖素(Glc)的含量;胰腺组织HE染色,Ins、Glc经免疫组织化学染色并图像定量分析.结果 去β细胞大鼠(M1和M2组)胰岛丽积约为正常大鼠的1/7,β细胞面积占胰岛面积比例由正常状态的74.3%分别下降到5.4%和5.2%,胰腺匀浆液Ins的含量不到正常的3%,而Glc的含量略有上升.NC组Glc阳性细胞位于胰岛周边,数量较少,M1和M2组Glc阳性的α细胞由周边向中央聚集,α细胞面积占胰岛面积比例由16.4%分别上升到76.5%和74.4%.结论 STZ一次大剂量腹腔注射可获得完全去除胰岛β细胞的大鼠模型,且不影响α细胞的形态和功能,建立胰岛α细胞大鼠模型.  相似文献   
994.
This study compared depressive symptomatology among Chinese psychiatric outpatients versus the general Chinese population, and across 3 cultural groups--Chinese, Chinese American, and Caucasian American students--by use of the Center for Epidemiological Studies-Depression Scale (CES-D; L. S. Radloff, 1977) and the Chinese Depression Scale (N. Lin, 1989), translated from the CES-D. Results indicate that Chinese patients (n = 112) endorsed a higher proportion of somatic symptoms than nonpatients (n = 112). The intercultural comparison found that Chinese students (n = 98) had the lowest levels of somatic depressive symptom endorsement compared to both U.S. groups (n = 198). These findings seem to suggest that the tendency toward somatic symptom reporting is not any greater among Chinese populations but may be a function of having a mental illness or of help seeking in China.  相似文献   
995.
In this study, we evaluated three PCR methods for epidemiological typing of Burkholderia (Pseudomonas) cepacia--PCR-ribotyping, arbitrarily primed PCR (AP-PCR) and enterobacterial repetitive intergenic consensus sequence PCR (ERIC-PCR)--and compared them with pulsed-field gel electrophoresis. The analysis was performed with 31 isolates of B. cepacia, comprising 23 epidemiologically unrelated isolates and 8 isolates collected from the same patient during two episodes of bacteremia. Pulsed-field gel electrophoresis, ERIC-PCR, and AP-PCR identified 23 distinct types among the 23 unrelated isolates, while PCR-ribotyping only identified 12 strain types, even after AluI digestion of the amplification products. Among the eight isolates collected from the same patient, all typing techniques revealed two clones of strains. The day-to-day reproducibilities of PCR-ribotyping and ERIC-PCR were good, while greater day-to-day variations were noted in the fingerprints obtained by AP-PCR. We conclude that all three PCR techniques are useful for rapid epidemiological typing of B. cepacia, but ERIC-PCR seems to be more reproducible and discriminative.  相似文献   
996.
Human stem cells derived from human fertilized oocytes, fetal primordial germ cells, umbilical cord blood, and adult tissues provide potential cell-based therapies for repair of degenerating or damaged tissues. However, the diversity of major histocompatibility complex (MHC) antigens in the general population and the resultant risk of immune-mediated rejection complicates the allogenic use of established stem cells. We assessed an alternative approach, employing chemical activation of nonfertilized metaphase II oocytes for producing stem cells homozygous for MHC. By using F1 hybrid mice (H-2-B/D), we established stem cell lines homozygous for H-2-B and H-2-D, respectively. The undifferentiated cells retained a normal karyotype, expressed stage-specific embryonic antigen-1 and Oct4, and were positive for alkaline phosphatase and telomerase. Teratomatous growth of these cells displayed the development of a variety of tissue types encompassing all three germ layers. In addition, these cells demonstrated the potential for in vitro differentiation into endoderm, neuronal, and hematopoietic lineages. We also evaluated this homozygous stem cell approach in human tissue. Five unfertilized blastocysts were derived from a total of 25 human oocytes, and cells from one of the five hatched blastocysts proliferated and survived beyond two passages. Our studies demonstrate a plausible "homozygous stem cell" approach for deriving pluripotent stem cells that can overcome the immune-mediated rejection response common in allotransplantation, while decreasing the ethical concerns surrounding human embryonic stem cell research.  相似文献   
997.
998.
音猬因子的功能受体斑片在培养神经干细胞中的表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
许汉鹏  胡沛臻  苟琳  张萍  鞠躬 《解剖学报》2002,33(6):561-565
目的 观察在培养的神经干细胞内是否有发育调控分子———音猬因子 (sonichedgehog)功能受体———斑片 (patched)表达。 方法 神经干细胞克隆在体外培养传代后 ,用patched的特异性引物对培养的神经干细胞进行RT PCR分析 ,PCR产物经克隆测序后 ,用地高辛标记克隆的探针 ,对神经干细胞进行原位杂交分析。 结果 神经干细胞克隆内大量的细胞均可表达sonichedgehog的功能受体patched ,patched阳性细胞间未见明显差别 ,克隆边缘与中央的patched分布也未见明显差别。 结论 sonichedgehog信号传导路可能在神经干细胞的增殖与分化过程中起重要作用。  相似文献   
999.
用透射电镜和扫描电镜方法观察了三磷酸腺苷(ATP)对人胃癌细胞系MGC-803的影响,结果表明,ATP能使MGC-803细胞的核仁由网状向环状改变,微丝的组装得到改善,细胞表面微绒毛减少。提示MGC-803细胞的恶性表型在ATP作用下可向正常方向逆转。  相似文献   
1000.
用原位杂交荧光显示法观察了人淋巴细胞在促癌变剂黄芫花提取物(WCE)和12-0-十四烷巳豆醇-13乙酸酯(TPA)处理后,间期核仁rDNA的定位与数量改变,并与丝裂原植物血细胞凝集素(PHA)的效应作了比较,同时用银染色法观察了核仁。对照组淋巴细胞核仁小,原位杂交的rDNA为少数明亮荧光斑和分散的荧光点。经促癌变剂WCE和TPA处理后,银染色的核仁增大,银染颗粒增多,表明rDNA转录活化。原位杂交证明rDNA信号数目明显扩增,许多荧光小点断续相连形成网织状结构,与PHA刺激核仁转录活化的表现一致。对核仁内所含银染颗粒和rDNA荧光斑点数均值的统计学分析表明,WCE、TPA和PHA各加药组均明显多于对照组。3个加药组之间无明显差别。提示两种促癌变剂皆具有刺激核仁rDNA扩增和转录活化的效应。  相似文献   
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