主要凋亡基因对细胞凋亡的调控

细胞凋亡是生物体内广泛存在的一种重要的生命过程,是多细胞动物调节机体发育、维护内环境稳定、有基因调控的细胞主动性死亡过程.对细胞凋亡的关注也转移到基因的表达和基因产物的活化方面,它与细胞分裂、细胞分化类似,受细胞内多种基因的控制,是一个级联式（cascade）基因表达的结果.已发现多种基因参与细胞凋亡的基因调控,其中包括Bcl-2和Bax、p53、Fas和FasL、 ced、c-myc、ICE等.本文就主要凋亡基因对细胞凋亡的调控进行了综述.     

左卡尼汀减轻大鼠肾缺血再灌注损伤及其机制的研究

目的 研究左卡尼汀对大鼠肾缺血再灌注损伤(IRI)的影响及其机制.方法 将Wistar大鼠分为3组:L组大鼠制成IRI模型,于夹闭肾动静脉前5 min及松开动脉夹后30 min,分2次经尾静脉注射左卡尼汀,各500mg/kg;I组大鼠制成IRI模型,仅注射生理盐水;C组仅分离双侧肾动、静脉,注射生理盐水.分别于再灌注后3、6和24 h处死各组大鼠.处死前经下腔静脉取血,检测血清肌酐(Cr)、尿素氮( BUN)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量.获取肾组织样本,进行病理学观察;应用逆转录聚合酶链反应检测肾组织核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的mRNA水平;蛋白质印迹法检测细胞核中Nrf2含量;免疫组织化学法检测肾组织中Nrf2的表达及定位.结果 再灌注后3h时,L组与I组血清Cr和BUN均高于C组(P＜0.01);再灌注后6h时,L组血清Cr和BUN高于C组(P＜0.01),而低于I组(P＜0.01);再灌注后24 h时,L组血清Cr和BUN仍低于I组(P＜0.05).再灌注后6和24 h时,L组与I组SOD水平低于C组(P＜0.05),MDA水平高于C组(P＜0.05).再灌注后各时间点,L组SOD水平均高于I组(P＜0.05),MDA水平均低于I组(P＜0.05).再灌注后24 h时,L组肾组织病理改变较I组轻.再灌注后6h时,I组Nrf2、HO-1、γ-GCS的mRNA相对含量均高于C组(P＜0.05),而L组各基因mRNA的相对含量高于I组(P＜0.05).L组细胞核内Nrf2的相对含量高于I组(P＜0.05).结论 左卡尼汀可减轻大鼠肾脏IRI,其机制可能与激活Nrf2-ARE通路,进而增强下游抗氧化基因的表达有关.     

活体红色荧光成像评估Ag85A／BDNA疫苗联合抑瘤效应的实验研究

目的：探讨可视、直观评估Ag85A／BDNA疫苗联合抑瘤效应的科学方法。方法：采用红色荧光蛋白基因DsRed—Express标记小鼠膀胱癌细胞BTT739,经G418抗性筛选获得稳定表达RFP的细胞克隆BTT739-RFP,将BTT739～RFP细胞接种到615小鼠皮下,建立可视化膀胱癌移植瘤模型。将建模成功的32只小鼠随机分为pVAX1-Ag85A／B联合组：BCG组;空白质粒（pVAX1）;生理盐水（NS）。建模后第7、14、21天注射相应的药物。分别于给药前即第7和第28天进行活体荧光成像,进行统计学处理。并于第28天检测血清特异性抗体水平和脾淋巴细胞的增殖活性。结果：构建了稳定表达RFP的BTT739细胞;成功建立可视化膀胱癌模型,成瘤率100％;经治疗后,pVAX1-Ag85A／B组的荧光强度明显低于pVAX1组和NS组,与BCG组无统计学差异。pVAX1-Ag85A／B组的抗体滴度为1：1000,BCG免疫组的抗体滴度为1：800。pVAX1-Ag85A／B组和BCG组均可提高淋巴细胞增殖活性,二者差异无统计学意义。结论：应用Ag85A／BDNA疫苗可提高膀胱癌小鼠的免疫功能,其效果与BCG差异无统计学意义;活体红色荧光体外成像的评估体系与细胞水平的分析一致。     

温针配合中药离子导入治疗神经根型颈椎病临床研究

目的:观察温针配合中药离子导入治疗神经根型颈椎病的临床疗效。方法:将110例椎神经根型颈椎病患者随机分为治疗组55例和对照组55例。治疗组采用温针配合中药离子导入治疗,对照组采用药物配合牵引治疗,两组在治疗3个疗程后由专人进行疗效评定。结果:治疗组临床治愈率为49%,总有效率为94.5%;对照组临床治愈率为23.6%,总有效率为83.6%,治疗组总有效率及临床治愈率均优于对照组;两组痊愈患者中疗程与疗效比较显示,治疗组1个疗程和2个疗程内痊愈率均高于对照组,说明温针配合中药离子导入能明显的缩短治疗神经根型颈椎病的疗程。治疗组疗效明显优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:温针配合中药离子导入治疗神经根型颈椎病疗效显著,值得临床推广应用。     

血清瘦素水平与原发性高血压的相关性研究

目的　探讨瘦素、肥胖、胰岛素抵抗与血压的相互关系 ,评价瘦素在高血压发病中的作用。方法　 5 6 0名非糖尿病的成年男性 ,测定空腹血脂、瘦素、真胰岛素 (TI)浓度以及空腹和餐后 2h血糖。胰岛素敏感性以稳态模型抵抗指数 (HOMA R)评价。结果　空腹瘦素水平与体重指数 (BMI)、腰臀比 (WHR)、TI和HOMA R、血压以及甘油三酯和胆固醇均显著相关 (均为P <0 0 1)。在调整年龄、BMI、WHR和HOMA R后 ,瘦素仍与收缩压呈正相关 (r=0 11,P <0 0 5 ) ,而且高血压者 (除外服用降压药者 )的瘦素水平也显著高于非高血压者 (几何均值 6 4 μg/L对 4 7μg/L ,P <0 0 0 1)。肥胖、胰岛素抵抗和高瘦素血症均能明显增加高血压的检出率。Logistic回归分析也显示瘦素水平的升高与高血压的发病密切相关。结论　瘦素与肥胖型高血压的发病相关。     

地奥司明片联合金玄痔科熏洗散治疗炎性外痔的临床观察

为观察地奥司明片联合金玄痔科熏洗散治疗炎性外痔的临床疗效,我们对150例炎性外痔患者分别采用地奥司明片联合金玄痔科熏洗散（治疗组）、单用地奥司明片（对照Ⅰ组）或金玄痔科熏洗散（对照Ⅱ组）治疗,各50例。治疗后3d、7d,比较三组患者水肿、疼痛改善情况。结果显示,治疗组总显效率明显高于对照Ⅰ组和Ⅱ组,P〈0．01;且治疗后疼痛、水肿评分方面,治疗组明显低于对照Ⅰ组和Ⅱ组,P〈0．05。结果表明,地奥司明片联合金玄痔科熏洗散治疗炎性外痔效果显著,优于单用地奥司明片、金玄痔科熏洗散。     

腹腔镜胆囊切除术后迟发性胆漏的临床分析

目的:探讨腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy,LC)术后迟发性胆漏的发生原因及处理措施。方法:回顾分析LC术后10例迟发性胆漏患者的临床资料。结果:迷走胆管漏6例,均行腹腔镜探查术,于胆囊床迷走胆管上WECK夹,并缝扎,经通畅引流治愈。2例胆总管侧壁漏行胆总管修补加"T"管引流治愈。2例胆囊管撕裂致残端漏经腹腔镜探查腹腔引流,行内镜逆行胰胆管造影术(endoscopic retrograde cholangiopancreatography,ERCP)和内镜鼻胆管引流(endoscopic naso-biliary drainage,ENBD)治愈。结论:LC术后迟发性胆漏有特定的发生原因,是可以减少或避免的。建立通畅的腹腔引流和胆管引流或行腹腔镜探查结合ERCP+ENBD是治疗LC术后迟发性胆漏的可行方法。     

MMP-3和TIMP-3在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的 研究基质金属蛋白酶3(MMP-3)及其抑制物组织基质金属蛋白酶抑制剂3(TIMP-3)在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义.方法 通过免疫组化Elivision法检测48例膀胱移行细胞癌组织及20例正常膀胱组织中的MMP-3和TIMP-3的表达.结果 MMP-3和TIMP-3在正常膀胱组织中不表达,随着肿瘤分级和分期的增高,MMP-3表达增高,但差异无统计学意义(P＞0.05).TIMP-3表达降低,但在肿瘤分级中差异有统计学意义(P＜0.05).结论 MMP-3的高表达,TIMP-3的低表达与膀胱移行细胞癌的恶性程度有关,在膀胱移行细胞癌的发生发展中起重要作用,可作为临床判断膀胱移行细胞癌的恶性程度及预后的重要参考指标.     

血瘀证量化诊断及病证结合研究

目的　探讨血瘀证量化诊断的方法和血瘀证证候实质。方法　对临床预试验血瘀证症状体征及客观指标进行t检验和回归分析。结果　 ( 1) 182例血瘀证与非血瘀证患者内皮素、一氧化氮、纤溶酶原激活物 t检验均有显著性差异。 ( 2 ) 170例血瘀证与非血瘀证患者血红蛋白、甘油三酯、总胆固醇、内皮素、一氧化氮、纤溶酶原激活物 6因素的逐步回归显示其贡献度的顺序为内皮素 >血红蛋白 >纤溶酶原激活物 >一氧化氮 ,甘油三酯及总胆固醇未能入选。 ( 3)对 6 0 1例患者血瘀证症状体征 4 0因素逐步回归分析 ,当F =6时选出的 18因素对血瘀证诊断贡献度最大 ,并得一回归方程。将数量化资料代入回归方程进行检验 ,总符合率为 94 .2 4 %。结论　通过多中心、前瞻性、大规模、随机对照的临床流行病学调查和临床试验 ,可以得出病证结合规范且量化的由症状、体征和客观指标构成的标准化中医证候。     

Expression of aquaglyceroporins in nonalcoholic hepatocyte steatosis and its significance

目的 研究水甘油通道蛋白(aquaglyceroporins)AQP3、AQP7、AQP9基因在油酸钠诱导的脂肪变性肝细胞模型中的表达变化及其意义.方法 以常规培养的人肝癌HepG2细胞为对照,采用油酸钠诱导HepG2细胞脂肪变性,建立非酒精性脂肪变性肝细胞模型,利用油红O染色及细胞内甘油三酯含量测定检测肝细胞脂肪变性程度,并分别于0、12、24、48 h采用实时荧光定量PCR与Western blot方法检测水甘油通道蛋白AQP3、AQP7、AQP9基因的表达.结果 油红O染色观察及肝细胞内甘油三酯含量测定显示HepG2细胞在油酸钠处理12 h后即开始出现脂肪变性,随着刺激时间延长,脂肪变性程度逐渐加重,肝细胞内甘油三酯含量在48 h组(79.76±0.75)较0h组明显升高(P＜0.05).模型组中,AQP3mRNA水平12h时表达开始减低,48 h时(0.39±0.08)表达最低,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05);AQP7mRNA表达与对照组相比略有升高,差异无统计学意义(P＞0.05);而AQP9 mRNA表达水平自12 h(1.59±0.11)即开始增加,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05).模型组中,AQP3蛋白水平12 h时表达开始减低,24、48 h组[ (0.016±0.002),(0.012±0.001)]与对照组相比差异具有统计学意义(P ＜0.05);AQP7蛋白表达与对照组相比较差异无统计学意义(P＞0.05);AQP9蛋白水平12 h表达开始增高,24、48 h[(0.050 ±0.002)、(0.079 ±0.002)]组与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 肝细胞脂肪变性模型中水甘油通道蛋白AQP3表达下调、AQP9表达上调、AQP7表达无明显差异,提示不同亚型的水甘油通道蛋白可能通过不同的机制参与了肝细胞非酒精性脂肪变性.