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99Tcm直接法标记血管抑素 总被引:4,自引:3,他引:1
目的: 探索用99Tcm直接标记血管抑素(angiostatin, AS)的方法,并研究标记产物的体外稳定性及其生物活性. 方法:制备的AS经鉴定后,分别用2-巯基乙醇(2-ME)和氯化亚锡(SnCl2)还原法进行标记,并用正交设计筛选最佳合成条件;对标记产物用纸层析法及Sephadex G-50层析柱分离测标记率;产物中分别加入牛血清白蛋白(BSA)、生理盐水及不同摩尔比的半胱氨酸(Cys)以观察其体外稳定性;用人脐静脉内皮细胞系ECV304观察其生物活性. 结果:2-ME法最佳标记条件为AS 100 μg,PB(0.5 mol*L-1, pH 7.3) 1 mL, 2-ME 100 μg, 亚甲基二膦酸盐(MDP)(用1 mL生理盐水溶解) 10 μL,加入99TcmO4- 185 MBq,标记率可达(97.0±1.5)%; SnCl2法为AS 100 μg,硼酸缓冲液(0.1 mol*L-1, pH 9.0) 1 mL, 20 g*L-1 SnCl2 (1 mol*L-1盐酸作为溶剂) 20 μL加入MDP药盒,用去氧水稀释至1 mL, 取20 μL,加入99TcmO4- 185 MBq,标记率可达(90.0±3.0)%. 产物在体外稳定;细胞培养观察其抑制内皮细胞生物活性与AS无显著差异. 结论:用99Tcm直接法标记AS简单高效,且对AS生物活性无明显影响. 相似文献
213.
血小板第4因子对辐射损伤小鼠免疫功能的保护作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨血小板第4因子(plateletfactor4,PF4)对辐射损伤小鼠免疫系统的影响。方法:雄性BALB/c小鼠随机分为3组,第1组(单纯照射组)、第Ⅱ组(PF4保护组)、第Ⅲ组(正常对照组),第Ⅱ组在照射前26h及20h腹腔注射PF440μg/kg,全身一次性5Gy60Co—γ射线照射后瑞氏染色法计数外周血淋巴细胞百分数。胸腺、脾脏制成细胞悬液计数后,MTT比色法测定胸腺及脾细胞增殖能力。结果:第Ⅱ组小鼠外周血淋巴细胞百分数下降趋势较第1组明显减慢。胸腺、脾细胞计数,第Ⅱ组明显高于第1组。淋巴细胞增殖试验,第Ⅱ组与第1组相比,小鼠胸腺及脾细胞的增殖能力明显增强。结论:PF4对免疫系统有辐射保护作用,可明显增强辐射损伤小鼠的免疫功能。 相似文献
214.
以光敏生物素标记的R3 cDNA克隆为模型,采用正交设计的方法,对影响核酸杂交反应的主要因素:杂交反应温度,反应时间,探针浓度及甲酰胺浓度作了综合性分析。当探针浓度为800μg/L,甲酰胺浓度为10mol/L,50℃杂交反应6h,可获得最高灵敏度(10pg)。 相似文献
215.
结核分枝杆菌Ag85B/GST融合蛋白表达载体构建及在大肠杆菌中的表达 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 构建结核分枝杆菌Ag85B/GSF融合蛋白表达质粒,并在大肠杆菌(E.coli)中诱导表达。方法 以质粒pUC18/Ag85B为模板,用PCR法扩增结核杆菌Ag85B基因,扩增的Ag85B上游含有EcoR Ⅰ酶切位点,下游含有SalⅠ酶切位点;将Ag85B基因定向插入质粒pGEX-4T-1中,构建原核表达质粒pGEX-Ag85B并转化E.coli B121,筛选阳性重组子,限制性内切酶切鉴定和DNA序列测定,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE和Westem blot鉴定结果。结果 成功构建原核表达质粒pGEX-Ag85B并表达出Mr约56000大小的Ag85B/GSY融合蛋白,表达量占总菌体的30%。结论 为进一步进行纯化Ag85B蛋白和研究其在膀胱肿瘤治疗中的作用奠定了基础。 相似文献
216.
目的探讨脑利钠肽(BNP)在评价功能性单心室患者行全腔静脉-肺动脉连接术(TCPC)后心功能中的价值及其意义。方法选择2004年4~11月间连续在我科随访的TCPC后患者11例(TCPC组),男7例,女4例;年龄8.2±4.1岁;随访时间2.1±1.6年。按照改良R oss标准对临床心功能评分。采集外周静脉血3m l,用酶标免疫法测定血浆BNP浓度。其中6例同期用磁共振成像(M R I)测定心功能,对BNP做相关因素分析。9人健康儿童作为正常对照(对照组)。结果(1)TCPC组血浆BNP水平为400pg/m l(IQR 200-690),较对照组的110 pg/m l(IQR 90-190)增高(P=0.003);(2)M R I测定结果:TCPC组6例患者舒张期末容量指数为65.76±8.65 m l/m2,收缩期末容量指数为31.90±6.36 m l/m2,心搏出量指数为39.09±11.76 m l/m2,射血分数(EF)为0.52±0.06,心脏指数(C I)为2.38±0.58 L/m in.m2,心肌质量指数为103.49±21.57 g/m2,心肌质量/心室舒张期末容量为1.57±0.24;(3)TCPC组BNP水平与手术时年龄呈明显正相关(r=0.632,P=0.041);BNP水平与上述M R I指标、R oss评分、性别、年龄、脉搏血氧饱和度(SpO2)及主心室类型等因素无关。结论TCPC后近2年神经内分泌系统仍处于应激状态,BNP增高可能与TCPC后特有的血流动力学状态有关;血浆BNP水平不能作为正确评估TCPC后心功能状态的指标。 相似文献
217.
218.
目的探讨输尿管镜配合双频双脉冲Nd:YAG激光碎石术治疗上尿路梗阻合并急性肾功能衰竭的可行性。方法34例输尿管结石引起梗阻患者在输尿管镜直视下采用双频双脉冲激光碎石。2例卵巢癌术后放疗造成腹膜后纤维化引起输尿管梗阻,3例输尿管结核造成输尿管狭窄引起输尿管梗阻,均在输尿管镜下放置D.J管。结果39例均得到满意疗效。结论输尿管镜配合双频双脉冲激光碎石是目前治疗上尿路梗阻并发急性肾功能衰竭的一种安全、微创、有效的方法。 相似文献
219.
老年人颅脑外伤后缺血性脑卒中发作特点及治疗 总被引:1,自引:1,他引:0
目的探讨老年人颅脑外伤后缺血性脑卒中发作特点及个性化治疗方案。方法针对7例颅脑外伤后急性期出现缺血性脑血管病症状的老年患者,通过脑血管造影检查分析其发病原因并根据不同的脑血管特点决定治疗方案。结果大多数患者(6/7)受伤前已存在不同程度的颅内外血管狭窄、血管壁溃疡以及附壁血栓形成等改变,提示脑缺血发作主要与这些病变为基础的脑血流下降、血栓脱落等因素密切相关。而外伤后脑灌注降低、脑血管痉挛是脑缺血发作的诱发因素。结论老年人外伤后的缺血性脑卒中发作主要与原有的脑血管基础疾病有关,预防和治疗老年人外伤后缺血性脑卒中发作,应基于这些病变特征并选择个体化治疗方案。 相似文献
220.
目的探讨老年慢性腰腿痛的常见病因及其治疗。方法选择1997年1月至2000年12月间162例老年慢性腰腿痛患者,椎间盘突出92例(其中合并腰椎管狭窄者63例),单纯腰椎管狭窄10例,腰椎峡部裂或滑脱者37例,骨质疏松者23例。结果47例患者经保守治疗后出院,但其中18例症状复发。115例患者行手术治疗,其中椎板间扩大开窗或半椎板切除髓核摘除75例,全椎板切除髓核摘除9例,单纯峡部植骨术8例,脊柱内固定者23例。97例手术患者获得随访,平均18个月,症状消失或明显缓解者65例,残留部分症状者29例,无改善者3例。结论脊柱退行性变是导致老年人慢性腰腿痛的主要原因,以腰椎间盘突出和椎管狭窄为主,治疗上先予保守治疗,效果差时可积极手术治疗。 相似文献