结核分枝杆菌Ag85B/GST融合蛋白表达载体构建及在大肠杆菌中的表达

目的 构建结核分枝杆菌Ag85B／GSF融合蛋白表达质粒，并在大肠杆菌(E．coli)中诱导表达。方法 以质粒pUC18／Ag85B为模板，用PCR法扩增结核杆菌Ag85B基因，扩增的Ag85B上游含有EcoR Ⅰ酶切位点，下游含有SalⅠ酶切位点；将Ag85B基因定向插入质粒pGEX-4T-1中，构建原核表达质粒pGEX-Ag85B并转化E．coli B121，筛选阳性重组子，限制性内切酶切鉴定和DNA序列测定，异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达，SDS-PAGE和Westem blot鉴定结果。结果 成功构建原核表达质粒pGEX-Ag85B并表达出Mr约56000大小的Ag85B／GSY融合蛋白，表达量占总菌体的30％。结论 为进一步进行纯化Ag85B蛋白和研究其在膀胱肿瘤治疗中的作用奠定了基础。     

追寻现代性：民国上海言情文化的历史解读

本文将言情文化放到现代化都市社会发展和上海追求现代性的城市精神形成的过程中考察其社会、文化、心理上的各种关联,具体地展示了通俗文化作品是如何帮助中国的观众在虚拟的真实中思考、实验,及体验新型的性别与情爱关系,对民国上海言情文化的新认识将迫使我们重新审视中国近现代史研究中的一些重大问题,纠正历来精英观点对大众文化的排斥和偏见,正视言情文化的历史合理性和政治合法性,并在中国革命和现代化的过程中来理解上海都市文化的意义。     

大学生自我和谐与社交焦虑的相关研究

目的探讨大学生的自我和谐与交往焦虑的特点和关系。方法采用自我和谐量表和交往焦虑量表对310名大学生进行调查。结果男生在自我灵活性和自我和谐上得分低于女生（P〈0．01），研究生在自我灵活性上得分低于本科生（P〈0．01），理科生在社交焦虑上得分低于文科生（P〈0．05）；高自我和谐组在社交焦虑上得分低于低自我和谐组（P〈0．05）；从总体上看，社交焦虑与自我与经验的不和谐、自我刻板性、总体的自我和谐均呈正相关（P〈0．01）。结论大学生的自我和谐和社交焦虑之间均存在相关，自我和谐对社交焦虑具有良好的预测作用。     

Monitoring the protective effects of minocycline treatment with radiolabeled annexin V in an experimental model of focal cerebral ischemia.

Minocycline is an antibiotic now recognized to have antiapoptotic and antiinflammatory properties. Because of these properties, minocycline may be of benefit in reducing neuronal apoptosis from ischemia and subsequent postischemic inflammation if administered soon after a stroke. We now explore the feasibility of using (99m)Tc-annexin V, an in vivo marker of apoptosis, with SPECT to monitor the antiapoptotic effects of minocycline therapy. METHODS: CB6/F1 adult male mice underwent unilateral distal middle cerebral artery occlusion (dMCA) occlusion and were imaged and sacrificed at 1, 3, 7, or 30 d after injury. Animals were given minocycline (or vehicle) 30 min and 12 h after dMCA occlusion and then given 22.5 mg/kg twice daily for up to 7 d. Before imaging, behavioral tests were performed to evaluate the neurologic function. After imaging, brains were collected for histology and assessed for the degree of apoptosis and microglial activation. RESULTS: (99m)Tc-Annexin V uptake in injured hemispheres was significantly decreased 2- to 3-fold by minocycline at all time points. Minocyline reduced infarct size as seen histologically and improved behavioral indices as late as 30 d. Infarct volume as seen histologically correlated with radiolabeled annexin V uptake seen by SPECT. In situ fluorescent microscopy demonstrated that annexin V bound primarily to neurons at 1 and 3 d, with a shift toward microglia by 7 and 30 d. CONCLUSION: We found that minocycline significantly reduces neuronal apoptosis and infarct size and improves neurologic outcome in mice after acute focal cortical ischemia.     

重组骨形态发生蛋白-2结合软骨下钻孔治疗犬关节软骨全层缺损的实验研究

目的 研究重组骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)结合软骨下骨钻孔治疗犬关节软骨全层缺损的可行性，为临床应用提供实验依据。方法 依照软骨缺损处理方法的不同将64侧股骨髁随机均分为4组：①结合组：软骨下骨钻孔 胶原海绵吸附rhBMP-2充填软骨缺损；②BMP组：胶原海绵吸附rhBMP-2充填软骨缺损；③钻孔组：单纯软骨下骨钻孔；④对照组：不作处理或单纯用胶原海绵填塞。术后2、4、8、12周取材观察其大体、光镜、透射电镜、免疫组织化学情况。结果 除对照组仅有纤维组织修复外，其余3组均有不同程度的软骨修复，但结合组的修复在组织细胞形态、超微结构、Ⅱ型胶原含量等方面均明显优于其他两组。结论rhBMP-2结合软骨下骨钻孔能有效修复犬膝关节软骨的全层缺损，该技术可行，有望在临床应用。     

药物不良反应事件民事赔偿问题研究

在药物不良反应事件中，药品存在设计缺陷、制造缺陷或警示缺陷的，药品的生产者应当承担赔偿责任。医疗机构无视药物不良反应的警示说明导致不良反应发生的，应当承担医疗差错的赔偿责任。国家疏于药物监管导致不良反应发。生的，从法学理论上讲，也应当承担赔偿责任。     

准分子激光原位角膜磨镶术患者主客观因素与疗效的相关性分析

目的：通过对准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)患者主客观因素与疗效的相关性分析，了解临床影响术后视力的主观、客观因素。方法：对2002年间在我院行ASIK的164例患者325只眼(其中3例为单眼)进行连续性临床观察研究，分别进行术前、术后问卷式主客观因素调查，并对患者手术疗效进行相关性统计学分析。结果：患者术前对手术效果的期望值、手术中疼痛程度与手术后视力有显著相关性。结论：解除患者术前忧虑及避免术中疼痛对提高术后疗效有重要意义。     

内膜下血管成形术治疗下肢动脉硬化闭塞症的新进展

内膜下血管成形术是治疗下肢动脉硬化闭塞症的主要方法之一，本文详细叙述了近年来内膜下血管成形术的新发展，包括适应证的拓展，各项操作新技术的进展，在小腿动脉中的应用及并发症的正确处理。为今后此技术更加广泛地应用提供了思路。     

微囊化猪视网膜色素上皮细胞移植治疗帕金森病的实验研究(英文)

目的研究微囊化后的猪视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial,RPE)对帕金森病大鼠模型的移植疗效。方法原代培养RPE 并传代,高效液相色谱法测定培养液上清中多巴胺(dopamine, DA)和高香草酸(homovanillic acid, HVA)的含量,ELISA法检测脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(glial-derived neurotrophic factor, GDNF)的含量。用高压静电成囊装置制备海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊化细胞。6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine, 6-OHDA)毁损内侧前脑束 (medial fore-brain bundle,MFB)建立 SD 大鼠帕金森病模型。立体定向移植 RPE+ 微囊,检验旋转实验、免疫组化和脑内生化的变化。结果 RPE 培养上清液中DA、HVA、BDNF、GDNF 的含量稳定,微囊化后细胞长期存活,活性没有明显变化。6-OHDA毁损MFB建立大鼠帕金森病模型的成模率为83%。移植微囊化的RPE后有效率为33%。结论猪 RPE 体外培养生长旺盛,持续分泌 DA、BDNF 和 GNDF,微囊化不影响其分泌功能。RPE 移植对帕金森病大鼠有一定的治疗作用。     

保罗样激酶基因沉默体外抑制胶质瘤细胞侵袭与生长

目的观察保罗样激酶1基因(plk1)沉默对胶质瘤细胞株-H4体外生长的抑制作用,探讨plk1基因作为胶质瘤治疗靶点的可行性。方法化学合成小片断干扰RNA(siRNA)抑制plk1基因的表达,Western blot检测plk1蛋白质的表达变化,流式细胞仪检测H4细胞周期分布及凋亡程度的变化,体外侵袭实验检测H4细胞侵袭能力的变化,MTT法检测H4细胞增殖速度的变化。结果经siRNA作用48h后,plk1蛋白质水平明显降低;较多的H4细胞聚集于G2/M期附近(P<0.05);细胞凋亡明显上升(P<0.05);细胞体外侵袭能力下降(P<0.05);增殖速度明显缓于对照组(P< 0.05)。结论靶向plk1的siRNA可在体外抑制胶质瘤细胞H4的侵袭与增殖,plk1有可能成为新的潜在胶质瘤治疗靶点。