Taqman-探针荧光定量PCR鉴定副溶血弧菌方法的建立

目的 建立一种Taqman荧光定量PCR鉴定副溶血弧菌的方法。方法 以副溶血弧菌标准株(ATCC-VPJS421)和其它常见致病菌标准株为研究对象,通过Gene Bank获取toxR基因的序列,采用生物信息学软件设计特异性PCR引物及Taqman探针,在SLAN 96P荧光定量PCR仪进行扩增检测,评价该检测方法的特异度和灵敏度。结果 ①设计的引物能够扩增出特异性条带; ②扩增体系中0.5 μl探针的扩增效果优于1.0 μl探针; ③Taqman-探针荧光定量PCR检测方法对副溶血弧菌toxR基因的检测灵敏度为10^-1 mg/L; ④在检测粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、霍氏肠杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、溶藻弧菌、创伤弧菌、梅氏弧菌和弗尼斯弧菌等10种常见致病菌时未出现阳性扩增,特异度为100%。结论 成功建立Taqman探针荧光定量PCR鉴定副溶血弧菌的方法,该方法特异度、灵敏度均较好,适用于副溶血弧菌的快速检测,具有良好的应用价值。     

胫神经和腓总神经损伤修复后相应脊髓节段神经元细胞Bcl-2、Bax蛋白表达差异的实验研究

目的比较大鼠下肢同一平面胫神经、腓总神经损伤修复后相应脊髓节段神经元细胞Bcl-2、Bax蛋白表达差异。方法雄性SD大鼠90只随机分为3组:A组为对照组,B组为胫神经切断缝合组,C组为腓总神经切断缝合组。分别于术后1、3、7、14、28 d取大鼠L4~6节段脊髓进行HE染色,计算脊髓前角运动神经元数量,采用免疫组化检测Bcl-2、Bax蛋白表达差异,并计算Bcl-2/Bax比值。结果 A组术后脊髓组织未见明显异常,B、C组术后可见脊髓组织结构紊乱,神经元细胞水肿、坏死。术后1、3、7、14 d,B、C组脊髓前角运动神经元数目均小于A组(P0.01)。术后3、7、14、28 d,B组脊髓前角运动神经元数目显著多于C组(P0.01)。B、C组Bcl-2蛋白表达出下降后上升的趋势,分别于术后3、7 d下降至低谷;B、C组Bax蛋白表达呈现出先上升后下降趋势,均于术后3 d上升至高峰;B、C组Bcl-2/Bax比值呈现出先下降后上升趋势,术后3、7、14、28 d,B组Bcl-2/Bax比值显著高于C组(P0.01)。结论大鼠下肢同一平面胫神经和腓总神经损伤后都会导致近端脊髓神经元细胞出现凋亡,但是和腓总神经损伤相比,胫神经损伤后对近端神经元退变死亡的影响较小。     

卵巢癌患者组织中miR-135b的表达及临床意义

目的 探讨miR-135b在卵巢癌组织中的表达及意义。方法 选取2015年1月～2017年12月在解放军第一七四医院和南方医科大学深圳医院接受手术的卵巢病变患者的卵巢组织,包括28例卵巢癌组织和10例卵巢良性肿瘤组织,所有的组织均经过病理确认。运用荧光定量PCR(RT-PCR)的方法检测28例卵巢癌及10例卵巢良性肿瘤组织中miR-135b的表达水平,并分析其与卵巢癌患者年龄、组织学类型、分化程度、临床分期及淋巴结转移的关系。结果 ①28例卵巢癌组织中miR-135b 的表达量(1.90± 0.53)与10例卵巢良性肿瘤组织中miR-135b表达量(1.45±0.45)比较,差异有统计学意义(t=2.03,P<0.05); ②19例≥50岁卵巢癌患者组织中miR-135b的表达量(1.97±0.51)和20例浆液性囊腺癌组织中miR-135b的表达量(1.96±0.50)分别与9例<50岁卵巢癌患者组织中miR-135b的表达量(1.77±0.57)和8例黏液性腺癌组织中miR-135b的表达量(1.77±0.61)比较,差异均无统计学意义(t=0.743～0.846,均P<0.05)。20例中低分化组织中miR-135b的表达量(2.05±0.54),17例临床分期Ⅲ～Ⅳ期组织中miR-135b的表达量(2.10±0.46)和15例有淋巴结转移的组织中miR-135b的表达量(2.10±0.53)均分别高于8例高分化组织中miR-135b的表达量(1.55±0.25),11例临床分期I～II组织中miR-135b的表达量(1.60±0.49)和13例无淋巴结转移的组织中miR-135b的表达量(1.68±0.44)比较,差异均有统计学意义(t=5.036～7.517,均P<0.05)。结论 miR-135b在卵巢癌组织中高表达,miR-135b 的表达水平与卵巢癌的分化程度、临床分期和淋巴结转移有关。     

思维导图在脑卒中介入溶栓术后健康教育中的应用研究

目的评价思维导图在脑卒中患者介入溶栓健康教育中的应用效果。方法将2018年1—9月贵州省人民医院介入科收治的112例脑卒中溶栓患者随机分为观察组(n=56)和对照组(n=56)。对照组由护士实施常规的健康教育,观察组结合思维导图进行健康教育,比较两组患者的疾病相关知识知晓情况、服药依从性及住院满意度。结果干预后观察组患者对于脑卒中疾病相关知识的知晓率、服药依从性及住院满意度均高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论利用思维导图开展脑卒中介入溶栓术后健康教育,有利于促进患者掌握疾病相关知识,对提高健康宣教的有效性及患者遵医行为和住院满意度有积极作用。     

战创伤涂膜剂对厌氧菌体外抗菌实验研究

目的测定战创伤涂膜剂对产气荚膜梭菌（有芽孢菌）和脆弱拟杆菌（无芽孢菌）标准菌株的最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）和最低杀菌浓度（minimum bactericidal concentration,MBC）。方法应用培养基将涂膜剂、氯已定甲硝唑乳膏稀释至不同浓度,分别加入产气荚膜梭菌和脆弱拟杆菌悬液,控制菌液浓度为10^5 efu／ml,厌氧培养后观察细菌生长情况,确定两药的MIC和MBC并进行比较。结果涂膜剂体外对脆弱拟杆菌、产气荚膜梭菌MIC均为1μg／ml,MBC分别为1μg／ml、2μg/ml。氯已定甲硝唑乳膏对脆弱拟杆菌、产气荚膜梭菌MIC分别为4μg／ml、1μg／ml,MBC为8μg／ml、2μg／ml。两药杀菌率均〉99％。结论涂膜剂对有芽孢和无芽孢类厌氧菌有良好的抑落、杀菌作用。     

多发性骨髓瘤肾损害早期评估的探讨

目的 探讨血半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(血Cys-C)、尿半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(尿Cys-C)、尿视黄醇结合蛋白(RBP)、尿中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)在早期评估多发性骨髓瘤(MM)肾损害中的作用及在MM不同病理类型肾损害中的变化特点.方法 根据肾少球滤过率估计值将MM患者分成两组,A组为肾功能正常组,B组为肾功能损害组.以同期性别和年龄相匹配的健康志愿者为对照.检测患者血Cys-C、尿Cys-C、尿RBP、尿NGAL及血清肌酐(Scr)、尿微量蛋白(MAU)、尿α1-微球蛋白(α1-MG),同时对血Cys-C、尿Cys-C、尿RBP、尿NGAL异常且有意愿的患者行肾穿刺活检.结果 ①A组MM患者与健康对照组相比,血Cys-C、尿RBP、尿Cys-C、尿NGAL均高于健康对照组(P值均＜0.05).6例实验指标异常的A组患者行肾穿刺活检术,活检结果提示均有不同程度的肾损害,且血Cys-C、尿Cys-C、尿RBP、尿NGAL异常率分别为66.7％、66.7％、66.7％、83.3％.②24例实验指标异常的MM患者行肾穿刺活检术,其中淀粉样变性组6例,管型肾病(CN)组12例,免疫球蛋白沉积病(MIDD)组6例.CN组与MIDD组、淀粉样变性组相比,尿Cys-C、尿NGAL明显升高(P＜0.05).MIDD组与CN组、淀粉样变性组相比,尿RBP明显升高(P =0.043).淀粉样变性组与CN组、MIDD组相比,MAU明显升高(P =0.006).结论 与传统指标相比,血Cys-C、尿Cys-C、尿RBP、尿NGAL能更有效地早期评估MM患者肾损害.淀粉样变性组患者MAU明显升高,CN组患者尿Cys-C、尿NGAL明显升高,MIDD组患者尿RBP明显升高.     

TSP-1在肾透明细胞癌与外周血中的表达及临床意义

目的 检测并分析凝血酶敏感蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)在肾透明细胞癌患者肾癌、癌旁组织、正常肾组织及外周血中的表达及临床意义.方法 收集47例肾透明细胞癌患者的标本包括:47例肾癌组织、41例癌旁组织、38例正常肾组织、35例患者外周血标本,制备组织抽提液及外周血清.运用ELISA法检测三种组织及血清中TSP-1的表达,并结合临床资料分析其临床意义.结果 TSP-1在肾癌组织、癌旁组织、正常肾组织三者间的表达水平分别为36.44±4.80ng/mL、42.55±4.12ng/mL、46.55±1.55ng/mL,依次递增,三种组织间的表达水平,两两比较均有统计学差异(P均＜0.01).TSP-1在肾癌组织中的表达,随着肾癌TNM分期与Fuhrman分级的提高而均降低,且都呈负相关(r=-0.84,P＜0.01;r=-0.70,P＜0.01).结论 TSP-1在肾透明细胞癌组织中低表达,可能在抑制肿瘤血管形成过程中起重要作用;TSP-1在肾透明细胞癌组织中的表达与肾癌的TNM分期和Fuhrman分级关系密切,可作为评判肾透明细胞癌发展及恶性程度的指标.     

CT引导经皮肺穿刺活检检测晚期非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变

目的研究CT引导经皮肺穿刺活检获得组织检测非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的可行性。方法入组40例晚期或局部晚期无法手术的NSCLC患者,采用18 G自动活检枪,经CT引导行肺穿刺活检获取肿瘤组织,行EGFR基因检测,观察术后并发症,分析检测结果。结果 40例病例均经穿刺活检获得足够的病变组织进行组织学诊断和基因突变检测,EGFR基因突变率为37.5%(15/40),其中腺癌患者突变率为50.0%(12/24),非腺癌患者突变率为18.8%(3/16),两者间差异有统计学意义;3例患者穿刺后出现气胸,3例患者出现咯血;无血胸、纵隔气肿、感染及针道种植等并发症;EGFR基因突变患者使用吉非替尼治疗获得良好疗效。结论 CT引导的经皮肺穿刺活检技术简便、安全,是晚期NSCLC获得肿瘤组织检测EGFR基因突变的可靠方法,能够用于预测晚期NSCLC的靶向治疗效果。     

成人镜像右位心及合并畸形彩色多普勒超声心动图特征研究

目的:探寻成人镜像右位心及合并畸形彩色多普勒超声心动图(CDE)特征。方法:应用CDE检查31例成人镜像右位心及合并畸形,寻找CDE特征,所有病例均经心导管对照,21例手术证实。结果:根据CDE特征对29例做出正确诊断,诊断准确率93.5%,误诊2例。成人镜像右位心及合并畸形CDE特征明显:①成人镜像右位心合并11种先天性心脏病,其中ILL型右心室双出口(22.6%)、IDD型矫正性大动脉转位(19.4%)和法乐四联症(19.4%)多见,心室双入口(12.9%)和室间隔缺损(6.5%)少见,两腔心、二尖瓣闭锁、三尖瓣闭锁、全肺静脉异位引流、孤立性双腔右心室和孤立性二尖瓣裂隙(各3.2%)更少见;②成人镜像右位心无论合并那种先天性心脏病均为心房反位;③成人镜像右位心合并右心室双出口大动脉均为左转位;合并矫正性大动脉转位大动脉均为右转位;⑷成人镜像右位心合并肺动脉狭窄(93.5%)多见,肺动脉高压(6.5%)少见。肺动脉狭窄时,彩色多普勒血流显像显示过肺动脉五彩镶嵌射流束血流信号;⑤合并房间隔缺损和室间隔缺损时,彩色多普勒血流显像显示过房间隔或室间隔左向右或双向五彩镶嵌分流束血流信号。结论:成人镜像右位心及合并畸形CDE特征明显,应用CDE对成人镜像右位心及合并畸形可做出正确诊断,但检查者必须熟练掌握本病解剖。在探查手法上与正常位心脏明显不同,检查前阅读X线正位胸片对CDE正确诊断有帮助,并可提高检查效率。     

MR IVIM-DWI 及 DCE-MRI 对直肠癌系膜淋巴结良恶性的诊断价值

目的：探讨 MR 体素内不相干运动扩散加权成像(IVIM-DWI)及动态增强磁共振成像(DCE-MRI)在鉴别直肠癌直肠系膜淋巴结转移的应用价值。方法38例经病理确诊为直肠癌的患者,术前行 IVIM-DWI 及 DCE-MRI 检查。比较转移性淋巴结(n=28)与非转移性淋巴结(n=27)的短径、短径-长径比、IVIM-DWI 参数值[表观扩散系数(ADC)、单纯扩散系数(D)、伪扩散系数(D?)和灌注分数(f)]及 DCE-MRI 半定量参数值[曲线上升斜率(Slope)、最大上升斜率(Maxslope)、对比增强比(CER)、对比剂清除率(Washout)、达峰时间(TTP)、前90 s 增强曲线下面积(iAUC90)和前180 s 增强曲线下面积(iAUC180)]。结果转移性与非转移性淋巴结在平均短径(8.87 mm±2.829 mm vs 6.83 mm±1.075 mm)、D 值[(0.824±0.113)×10-3 mm2/s vs (1.033±0.244)×10-3 mm2/s)]、CER(1.588±0.664 vs 1.054±0.419)、iAUC90(22.89±9.83 vs 13.59±5.34)和 iAUC180(49.38±20.19 vs 30.31±11.67)上差异有统计学意义(P ≤0.001);在短径-长径比、ADC 值、D?值、f 值及 Slope、Maxslope、Washout、TTP 上无统计学差异(P >0.05)。鉴别转移性及非转移性淋巴结的最佳阈值(各自的曲线下面积、敏感性、特异性)分别为：短径=7.1 mm(0.744、64.2%、85.1%)、D=0.906×10-3 mm2/s (0.821、81.5%、75.0%)、CER=1.05(0.749、85.7%、62.9%)、iAUC90=13.42(0.780、85.7%、62.9%)及 iAUC180=49.65(0.770、50.0%、100%)。结论IVIM-DWI 及 DCE-MRI 在鉴别直肠癌直肠系膜转移性及非转移性淋巴结的诊断中具有一定的意义。