环氧合酶-2抑制剂对白血病细胞HL-60的化疗增敏作用及机制

 目的　观察环氧合酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对白血病细胞株HL-60的化疗增敏作用,并对其机制进行初步探讨。方法　MTT法评估塞来昔布、多柔比星及二者联合对HL-60细胞的生长抑制效应;流式细胞术（FCM）检测细胞的凋亡;反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测Survivin基因的表达;Western blotting检测Survivin蛋白的表达。结果　多柔比星联合塞来昔布5和10 μmol／L对HL-60细胞的半数抑制浓度（IC50）分别为0.25及0.16 μg／ml,明显低于多柔比星单用的IC50（0.48 μg／ml）;多柔比星0.10 μg／ml联合10 μmol／L塞来昔布下调Survivin基因mRNA及蛋白的表达;联合塞来昔布5和10 μmol／L的凋亡率[分别为（13.07±1.66）%及（22.36±1.84）%]较多柔比星0.10 μg／ml单用[（5.72±1.25）%]明显增加（P＜0.01）。结论　COX-2抑制剂塞来昔布对白血病细胞株HL-60具有明显的化疗增敏作用,其初步机制涉及下调Survivin的表达,增加细胞凋亡。     

联合门静脉／肠系膜上静脉切除的胰头癌根治术

目的探讨胰头癌侵犯门静脉（portalvein，PV）和（／或）肠系膜上静脉（superior mesentericvein，SMV）时根治切除的可行性。方法回顾分析11例PV／SMV受侵的胰头癌患者临床资料，均行扩大胰十二指肠切除术。其中7例行血管壁部分切除，3例行血管节段性切除及对端吻合，1例行受侵血管切除＋人工血管移植。脾静脉与SMV端侧吻合4例，脾静脉结扎3例。消化道重建采用Child术式。结果本组PV阻断时间平均为18．1（9～32）min。全组患者术后均未发生血管栓塞、肠坏死、肝衰竭等并发症，均康复出院。11例均获随访，时间6～20个月，3例术后1年内死亡，4例术后1—2年死亡，患者平均生存时间15（7～20）个月。结论对单纯侵犯PV／SMV的胰头癌施行联合PV／SMV切除的胰头癌扩大根治术是安全可行的。     

胰管空肠连续吻合联合肠腔外引流预防胰十二指肠切除术后胰瘘

目的 对胰十二指肠切除术的胰肠吻合缝合技术和置管引流方法进行改进,以防止胰瘘的发生.方法 对2004年6月至2007年9月138例胰十二指肠切除术患者的胰肠吻合采用降落伞式胰管空肠连续吻合和吻合口下方肠腔减压外引流的临床资料进行回顾性分析.结果 降落伞式胰管空肠连续吻合时间平均11min,手术时间明显缩短,全部病例均未出现胰肠吻合口漏,术中出血平均353±61ml,平均住院日19.2d.6例患者出现肺部感染,3例上消化道出血考虑为应激性溃疡,2例患者出现胃排空障碍,均保守治疗痊愈,无手术死亡.结论 降落伞式胰管空肠连续吻合和吻合口局部肠腔减压外引流,操作简便、省时、并发症少,是胰肠吻合术的一种有效改进.     

Effects of Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells on TGF-β and MCP-1 in Injured Lung of Rats

The primary objective of the present study is to investigate the therapeutic effect of bone marrow-derived mesenchymal stem cells （MSCs） on bleomycin （BLM）-induced lung injury of rats and the effect on transforming growth factor-β （TGF-β） and monocyte chemoattractant protein-1 （MCP-1）. MSCs were isolated from SD rats. The recipients rats were divided randomly into four groups： lung injury group, MSC treatment group, MSC control group and normal control group. Rats of lung injury group and MSC treatment group were perfused with BLM of 5mg/kg （0.2-0.3ml） intratracheally, others were perfused with normal saline. After twelve hours, rats of MSC treatment group and MSC control group were injected MSCs of 0.5×10^6per rat into tail vein. Haematoxylin-eosin staining was used to observe the morphology in lung tissue. ELISA was used to detect the contents of TGF-β and MCP-1 in serum and bronchoalveolar lavage fluid （BALF）. Collagen content of the lung tissue was assessed by hydroxyproline （HYP） concentration. It was found that the thickness of alveolar wall and lung interstitium were significantly reduced in the rats of MSC treatment group compared with the lung injury group. HYP content in lung interstitium, TGF-β and MCP-1 in serum and BALF were increased significantly in rats of lung injury group two weeks after BLM perfusion, but they were reduced significantly in the rats of MSC treatment group compared with the injured rats. These observations provide evidence that MSCs engraftment could alleviate bleomycin-induced lung injury and fibrosis in rats and the therapeutic effects might relate with the decrease of TGF-β and MCP-1.     

参麦注射液联合氢化可的松治疗老年脓毒性休克的临床研究

目的探索参麦注射液联合氢化可的松对老年脓毒性休克的治疗效果。方法选取2015年7月—2018年7月沧州市人民医院收治的脓毒性休克患者102例,随机分为对照组(51例)和治疗组(51例)。对照组静脉滴注注射用氢化可的松琥珀酸钠,200 mg加入生理盐水250 mL,1次/d;治疗组在对照组基础上静脉滴注参麦注射液,100 mL/次,1次/d。两组患者均持续治疗5天。观察两组患者临床疗效,同时比较治疗前后两组患者白细胞计数、APACHEⅡ评分、乳酸、降钙素原和脑钠肽水平及随访结果。结果治疗后,对照组和治疗组临床有效率分别为76.47%和86.27%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者白细胞计数、C-反应蛋白水平及APACHEⅡ评分均明显降低(P0.05),且治疗组白细胞计数、C-反应蛋白水平及APACHEⅡ评分明显低于对照组(P0.05)。治疗后,两组患者乳酸、降钙素原和脑钠肽水平均显著降低(P0.05),且治疗组乳酸、降钙素原和脑钠肽水平明显低于对照组(P0.05)。治疗组ICU住院时间、14 d死亡率及28 d死亡率上均优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论参麦注射液联合氢化可的松可明显改善老年脓毒性休克患者早期生理生化指标,提高整体生存率。     

大鼠急性肺栓塞后hnRNP-E1的表达及胶原代谢的变化

目的 研究大鼠急性肺栓塞模型肺组织中异源性核糖核蛋白E1(heterogeneous nuclear ribonucleoprote E1, hnRNP-E1)的表达变化及其对胶原代谢的影响.方法 建立大鼠急性肺栓塞模型,分别在急性肺栓塞后1、2、7和21 d开胸取出肺组织,然后提取肺组织的总RNA和总蛋白,以正常大鼠为对照组,采取半定量RT-PCR的方法研究hnRNP-E1在mRNA水平表达的变化;采用Western blot方法进一步验证hnRNP-E1在蛋白水平表达的变化.采用Northern blot法分析大鼠肺组织中Collagen α1(Ⅰ)(COL1A1)和Collagen α1(Ⅲ)(COL3A1)在肺栓塞后mRNA水平的表达变化;采用羟脯氨酸(HYP)和Masson染色观察急性肺栓塞3周后肺组织内的胶原沉积状况.结果 在大鼠急性肺栓塞后的不同时间点,hnRNP-E1的mRNA水平和蛋白水平的表达均有显著升高.大鼠急性肺栓塞后肺组织中COL1A1的mRNA表达水平有明显升高,但是COL3A1的mRNA表达水平无显著变化.HYP分析和Masson染色均显示急性肺栓塞3周后肺组织内的胶原沉积明显增加.结论 大鼠急性肺栓塞后肺组织内hnRNP-E1的表达升高,可能促进了COL1A1的蛋白表达和胶原在肺部的沉积.     

大鼠急性肺栓塞后SMP-30表达下降及其对细胞凋亡的影响

目的：研究大鼠急性肺栓塞模型肺组织中衰老标记蛋白质30(SMP-30)的表达变化及其对Fas诱导的细胞凋亡的影响。方法:建立大鼠急性肺栓塞模型，分别在急性肺栓塞后1、8、24和48 h进行支气管肺泡灌洗，然后开胸取出肺组织。常规提取肺组织的总RNA和总蛋白，以正常组为对照，采取半定量RT-PCR的方法研究SMP-30在mRNA水平表达的变化；采用Western blotting方法进一步验证SMP-30在蛋白水平表达的变化；采用免疫组织化学方法检测大鼠肺组织中SMP-30以及肺泡巨噬细胞中IL-8在肺栓塞前后表达的变化及其组织分布情况；采用TUNEL法研究急性肺栓塞后组织细胞的凋亡情况；最后采用ELISA法检测急性肺栓塞后肺泡灌洗液中sFasL的浓度变化。结果:在大鼠急性肺栓塞后的不同时点，SMP-30的mRNA水平和蛋白水平均逐渐降低，在24和48 h下降最为明显。免疫组化研究表明SMP-30主要分布在支气管黏膜上皮细胞和肺泡上皮细胞，急性肺栓塞后SMP-30在上述细胞内的表达均明显降低。TUNEL染色发现随着SMP-30表达的降低，肺组织内出现明显的细胞凋亡现象，同时肺泡灌洗液中sFasL的浓度升高，肺泡巨噬细胞内IL-8的表达也明显升高。结论:大鼠急性肺栓塞后肺组织内SMP-30的表达明显降低，可能促进Fas－FasL细胞凋亡系统的活化。     

大鼠急性肺栓塞后cytokeratin-19表达下降

目的研究急性肺血栓栓塞大鼠的肺组织中细胞角蛋白19(cytokeratin-19,CK-19)及其分解产物CYFRA21-1的表达变化。方法建立大鼠急性肺血栓栓塞模型并做肺泡灌洗。用半定量RT-PCR法和Western blot法检测CK-19的mRNA和蛋白表达;免疫组化方法检测CK-19在肺组织内的分布;放免法检测血清和肺泡灌洗液中CYFRA21-1的水平;检测动脉血氧饱和度。结果急性肺栓塞后CK-19mRNA和蛋白质水平均逐渐降低;肺泡上皮细胞CK-19的表达明显下降;血清和肺泡灌洗液中CYFRA21-1水平升高;动脉血氧饱和度呈明显下降趋势。结论急性肺栓塞不仅导致CK-19表达降低,而且分解代谢增强,因此CYFRA21-1的检测对于判断急性肺栓塞的严重程度及预后具有重要意义。     

大鼠急性肺血栓栓塞后血中DBP、RBP和TTR表达降低

目的探讨急性肺血栓栓塞时维生素D结合蛋白(DBP)、维生素A结合蛋白(RBP)和甲状腺素转运蛋白(TTR)的表达变化及对代谢的影响。方法用颈静脉插管注入血栓的方法制备大鼠急性肺栓塞模型。用Western blot检测DBP、RBP和TTR蛋白水平,RT-PCR法检测肝组织中DBP、RBP和TTR的mRNA水平,放射免疫法测定FT4和25(OH)D3的血清浓度,微量荧光法测定维生素A的血清浓度。结果急性肺栓塞后血清中DBP、RBP和TTR的蛋白水平,肝组织中DBP、RBP和TTR的mRNA水平均逐渐降低;而血清中这3个结合蛋白的配体FT4、25(OH)D3和维生素A的水平明显升高。结论急性肺栓塞后血清中DBP、RBP和TTR的蛋白水平降低是由于肝细胞合成减少所致,从而释放出更多的配体。升高的25(OH)D3、维生素A和FT4分子在急性肺栓塞后的一系列病理生理变化中将发挥重要作用。