可移植性人脑胶质瘤组织裸小鼠脑内移植及其MR显像研究

背景与目的:文献报道的胶质瘤动物原位移植模型,大多数是将细胞悬液立体定向接种于鼠脑内,操作繁杂,耗时长,难以在短时间内完成批量实验.本研究接种可移植性人脑胶质瘤组织于裸小鼠脑内,探讨建立人脑胶质瘤裸小鼠原位移植模型及其MR活体成像的可行性.方法:在套管针内,置入位于裸小鼠皮下生长的可移植性人脑胶质瘤组织2 mm3,经微型颅钻钻颅孔后经套管针推入裸小鼠右尾状核内,第30天在配有小鼠专用micro-23微线圈的1.5T MR机上进行头颅扫描和专用软件测量显像的肿瘤体积.继而取全脑作连续冰冻切片,HE染色,在光学显微镜下观察肿瘤病理特征,在体视显微镜目镜下用测微尺测量肿瘤.然后将上述两种方法测得的数据进行统计学分析,评价荷瘤鼠活体MR显像计算肿瘤体积的可行性.结果:经MR扫描的15只颅内接种肿瘤的小鼠,有14只的尾状核区域见到肿瘤显像;在脑切片上,与MR像相同部位见到了肿瘤组织.经脑切片测得的肿瘤体积[(23.19±10.18)mm3]和经MRI测得的肿瘤体积[(23.45±11.64)mm3]比较差异无统计学意义(P＞0.05).肿瘤模型制作成功率为93%(14/15),肿瘤模型MR显像成功率为100%(14/14).结论:经套管针定量植入胶质瘤组织于裸小鼠尾状核,制作可移植性裸小鼠人脑胶质瘤原位模型,具有操作便捷、省时、便于批量制作、致瘤率高等优点.配有小鼠专用微型线圈的1.5T MR机可用于荷瘤裸小鼠的头颅成像、在活体上对移植瘤进行定位和体积测量等研究.     

多学科联合集束化干预对输尿管镜碎石术后感染的效果

目的 探讨多学科联合集束化干预对输尿管镜碎石患者术后感染的效果.方法 选取安徽中医药大学第一附属医院泌尿外科输尿管镜碎石患者60例,按照随机数字表法分为观察组(多学科联合集束化干预)与对照组(常规护理),每组30例,分析并比较两组患者血白细胞(WBC)计数、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、尿白细胞(LEU)计...     

大鼠急性肝功能衰竭模型的建立及凝血功能的变化

目的：观察不同剂量D-氨基半乳糖（D-GalN）联合脂多糖（LPS）对大鼠急性肝衰竭模型的影响及凝血功能的变化,建立理想的急性肝衰竭大鼠模型。方法：SD大鼠随机分为正常组, D-GalN高、中、低剂量组,每组10只,除正常组外,其余各组注射不同剂量D-GalN联合LPS建立急性肝衰竭大鼠模型,观察大鼠的死亡率,检测大鼠0、12、24、48、72 h肝功能及凝血功能的水平;HE染色,观察肝脏病理的变化。结果：D-GalN高、中、低剂量组72 h内的死亡率分别为：60%、30%、10%;不同剂量组不同时间点血液中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）、凝血酶原时间（PT）、国际标准比率（INR）、血浆纤维蛋白原（FIB）含量与正常组比较均有明显差异（P<0.05）;但在高、中、低剂量组间比较,ALT、AST无统计学意义,TBIL、PT、INR、FIB均有统计学差异（P<0.05）。结论：凝血功能在肝衰竭模型建立中为更加稳定的检测指标,通过肝功能、凝血功能、病理形态综合诊断,中剂量D-GalN联合LPS腹腔注射48 h后建立的急性肝衰竭大鼠模型与临床肝衰竭症状比较一致,中剂量是理想的造模剂量。     

电针内关对缺血再灌注损伤大鼠心肌肌浆网钙泵活性及mRNA表达的影响

目的：观察电针内关对缺血再灌注损伤大鼠心肌SERCA活性及其基因表达的影响,并以神门穴、合谷穴作对比研究。方法：实验分为假手术组、心肌缺血再灌注模型组（模型组）、电针内关组、电针神门组、电针合谷组,用无机磷比色法测定SERCA活性、RT-PCR法分析SERCA基因表达。结果：与假手术组比,模型组SERCA活性及其基因表达均有非常显著性差异（P〈0.01）,电针内关组、电针神门组与模型组比较差异有显著性（P〈0.05,P〈0.01）,电针内关组优于电针神门组（P〈0.05,P〈0.01）。结论：电针内关上调心肌SERCA基因表达,增强SERCA活性是实现对再灌注损伤心肌组织保护作用的途径之一。电针内关与电针神门两组疗效差异说明经穴对靶器官机制调节作用与经脉（穴）脏腑间的特异联系密不可分。     

Retracted Article: Exosome-derived PTENP1 suppresses cisplatin resistance of bladder cancer (BC) by suppressing cell proliferation,migration and inducing apoptosis via the miR-103a/PDCD4 axis

Bladder cancer (BC) is a lethal cancer that threatens the health of millions of people. Chemotherapy drug resistance, for example, cisplatin (DDP) resistance, is a huge limitation for BC therapy. PTEN pseudogene-1 (PTENP1) has been identified as a significant biomarker of multiple cancers. Therefore, it is essential to illuminate the molecular mechanism of PTENP1 in BC cell DDP resistance and progression. Serum exosomes were isolated using an ExoQuick precipitation kit. Serum exosomes were round-shaped vesicles of 100 ± 60 nm in size. The expression of PTENP1 was down-regulated in serum exosomes isolated from cisplatin non-responsive patients compared with responsive patients. ROC curves certified the diagnostic value of PTENP1. Apparently, PTENP1 transfection inhibited DDP-resistant BC cell proliferation, migration, cisplatin resistance and facilitated apoptosis. Next, we discovered that PTENP1 was a sponge of miR-103a, while PDCD4 was a target of miR-103a. More importantly, PTENP1 regulated DDP-resistant cell viability, migration, apoptosis and cisplatin resistance by interacting with the miR-103a/PDCD4 axis. In addition, PTENP1 hindered tumor growth of cisplatin-resistant mice. Exosome-derived PTENP1 suppressed the DDP resistance of BC by inhibiting cell proliferation, migration and promoting apoptosis through regulating the miR-103a/PDCD4 axis, representing a targeted therapy for DDP-resistant BC patients.

Bladder cancer (BC) is a lethal cancer that threatens the health of millions of people.     

电针任脉和肌肉注射碱性成纤维细胞生长因子对脑缺血模型大鼠侧脑室下区原位神经干细胞增殖的影响

目的：近来的研究认为，针刺任咏治疗脑卒中的机制在于针刺任脉可能产生与干细胞增殖分化有一些联系的生长因子。脑缺血损伤后调动内源性神经干细胞试图自我修复的途径应是多元化的，针刺及外源性生成因子的给予为其不同的途径。实验拟观察电针任脉和肌肉注射碱性成纤维细胞生长因子对脑缺血模型大鼠缺血侧脑室下区5-溴-2＇-脱氧尿苷和5-溴-2’-脱氧尿苷／巢蛋白阳性细胞的表达的影响。 方法：实验于2004-09／2005-07在中山大学医学院解剖学实验室完成。①材料：选用成年健康雄性Wistar大鼠83只。将实验动物按随机抽签法分为5组：空白对照组6只、假手术组6只、模型组26只、电针任脉组23只、碱性成纤维细胞生长因子组22只。后3组又分为缺血后7，14和28d3个时间点进行观察。②干预：除空白对照组和假手术组外，其余大鼠采用线栓法制作局灶性脑缺血模型。再灌注后参考Longa神经病学评分标准，1～4分为造模成功。空白对照组不作任何处理：假手术组仅分离右侧颈总动脉并离断右颈外动脉，不予栓塞。电针任脉组大鼠于造模后第2天采用上海华谊医用仪器厂生产的G6805Ⅱ型电针仪针刺承浆、气海、关元3穴，针刺后加电，疏密波刺激（疏波30Hz，密波100Hz），强度6～15V，以身体相应部位出现轻微颤动为准，持续时间为20min。碱性成纤维细胞生长因子组：再灌后立即给药，肌注碱性成纤维细胞生长因子4000U／d．此后每天肌注碱性成纤维细胞生长因子，1次/d。模型组、假手术组大鼠于造模后第2天固定于针刺操作台上20min，不予针刺。空白对照组大鼠不作任何处理。③观察指标：通过免疫荧光方法测定侧脑室下区5-溴-2’-脱氧尿苷和5-溴-2’-脱氧尿苷／巢蛋白阳性细胞的表达。用Olympus FV500激光共聚焦显微镜系统，在200倍镜下，计数平?     

电针任脉和肌肉注射碱性成纤维细胞生长因子对脑缺血模型大鼠侧脑室下区原位神经干细胞增殖的影响

目的:近来的研究认为,针刺任脉治疗脑卒中的机制在于针刺任脉可能产生与干细胞增殖分化有一些联系的生长因子.脑缺血损伤后调动内源性神经干细胞试图自我修复的途径应是多元化的,针刺及外源性生成因子的给予为其不同的途径.实验拟观察电针任脉和肌肉注射碱性成纤维细胞生长因子对脑缺血模型大鼠缺血侧脑室下区5-溴-2'-脱氧尿苷和5-溴-2'-脱氧尿苷/巢蛋白阳性细胞的表达的影响.方法:实验于2004-09/2005-07在中山大学医学院解剖学实验室完成.①材料:选用成年健康雄性Wistar大鼠83只.将实验动物按随机抽签法分为5组:空白对照组6只、假手术组6只、模型组26只、电针任脉组23只、碱性成纤维细胞生长因子组22只.后3组又分为缺血后7,14和28 d 3个时间点进行观察.②干预:除空白对照组和假手术组外,其余大鼠采用线栓法制作局灶性脑缺血模型.再灌注后参考Longa神经病学评分标准,1～4分为造模成功.空白对照组不作任何处理;假手术组仅分离右侧颈总动脉并离断右颈外动脉,不予栓塞.电针任脉组大鼠于造模后第2天采用上海华谊医用仪器厂生产的G6805Ⅱ型电针仪针刺承浆、气海、关元3穴,针刺后加电,疏密波刺激(疏波30 Hz,密波100 Hz),强度6～15 V,以身体相应部位出现轻微颤动为准,持续时间为20 min.碱性成纤维细胞生长因子组:再灌后立即给药,肌注碱性成纤维细胞生长因子4 000 U/d,此后每天肌注碱性成纤维细胞生长因子,1次/d.模型组、假手术组大鼠于造模后第2天固定于针刺操作台上20 min,不予针刺.空白对照组大鼠不作任何处理.③观察指标:通过免疫荧光方法测定侧脑室下区5-溴-2'-脱氧尿苷和5-溴-2'-脱氧尿苷/巢蛋白阳性细胞的表达.用Olympus FV 500激光共聚焦显微镜系统,在200倍镜下,计数平均5个视野阳性细胞数.结果:造模成功大鼠54只及空白对照组和模型组各6只进入结果分析.侧脑室5-溴-2'-脱氧尿苷阳性细胞数和5-溴-2'-脱氧尿苷/巢蛋白双标细胞:空白对照组与假手术组比较,差异无显著性意义(P > 0.05).模型组与空白对照组相比,均有不同程度的增加,其中造模后7和14 d差异有显著性意义(P < 0.01).电针任脉组和碱性成纤维细胞生长因子组造模后3个时间点与模型组比较,均有较大程度的增加,差异有显著性意义(P < 0.05～0.01).碱性成纤维细胞生长因子组与电针任脉组相比,差异无显著性意义(P > 0.05).结论:电针任脉和肌肉注射碱性成纤维细胞生长因子均可促进局灶性缺血模型大鼠原位神经干细胞增殖,且两者作用相当.     

JZTX-IV, a unique acidic sodium channel toxin isolated from the spider Chilobrachys jingzhao

Neurotoxins are important tools to explore the structure and function relationship of different ion channels. From the venom of Chinese spider Chilobrachys jingzhao, a novel toxin, Jingzhaotoxin-IV (JZTX-IV), is isolated and characterized. It consists of 34 amino acid residues including six acidic residues clustered with negative charge (pI=4.29). The full-length cDNA of JZTX-IV encodes an 86-amino acid precursor containing a signal peptide of 21 residues, a mature peptide of 34 residues and an intervening sequence of 29 residues with terminal Lys-Gly as the signal of amidation. Under whole-cell patch clamp conditions, JZTX-IV inhibits current and slows the inactivation of sodium channels by shifting the voltage dependence of activation to more depolarized potentials on DRG neurons, therefore, differs from the classic site 4 toxins that shift voltage dependence of activation in the opposite direction. In addition, JZTX-IV shows a slowing inactivation of sodium channel with a hyperpolarizing shift of the steady-state inactivation on acutely isolated rat cardiac cell and DRG neurons, differs from the classic site 3 toxins that do not affect the steady-state of inactivation. At high concentration, JZTX-IV has no significant effect on tetrodotoxin-resistant (TTX-R) sodium channels on rat DRG neurons and tetrodotoxin-sensitive (TTX-S) sodium channels on hippocampal neurons. Our data establish that, contrary to known toxins, JZTX-IV neither binds to the previously characterized classic site 4, nor site 3 by modifying channel gating, thus making it a novel probe of channel gating in sodium channels with potential to shed new light on this process.