高温燃烧水解氟电极法测定骨氟化物水平实验条件的研究

目的建立一种较为准确、实用的测定骨等生物样品中氟化物水平的测定方法。方法采用高温燃烧水解-氟电极法,使用拉丁方设计,以回收率作为选择实验条件的指标,对骨等生物样品的氟化物水平测定方法进行了温度、时间、消化液收集量3个处理因素和4个水平的实验研究。结果选择出温度为1100℃,时间为30 min,消化液收集量为75 ml的最佳测定条件,同时还推出了一种新的助燃剂-金刚砂(Sic),对缓冲液常规使用方法也进行了改进。结论高温燃烧水解-氟电极法具有良好的准确度和精密度,回收率为97．6％- 101．7％,变异系数均为2．0％以下,且简单易行。     

大鼠乙酸性胃溃疡复发模型的复制及健胃愈疡颗粒的干预作用

[目的]复制大鼠乙酸性胃溃疡复发模型并观察健胃愈疡颗粒（JWYY）的干预作用。[方法]采用改良Okabe乙酸涂抹法制作大鼠胃溃疡模型，腹腔注射白细胞介素1β（IL-1β）致愈合溃疡复发。44只大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型复发组、模型未复发组、JWYY组、奥美拉唑（OMLZ）组，观察各组胃溃疡复发率、胃蜜大体改变、胃窦组织病理学改变、炎症细胞密度计数。[结果]模型复发组胃溃疡复发率为87．50％，呈溃疡病理结构改变，溃疡边缘见残留之再生黏膜，再生黏膜较薄，有较多炎症细胞浸润。JwYY能改善胃溃疡愈合，减低IL-1β所诱导的瘢痕黏膜炎症细胞浸润的密度，降低溃疡复发率，与OMLZ无显著差别。[结论]IL-1β可能通过炎症细胞浸润诱导愈合的乙酸性胃溃疡复发；抑制炎症反应可能是JWYY抗溃疡复发的疗效机制之一。     

不同碘摄入量地区甲状腺自身抗体的流行病学五年随访研究

目的 利用不同碘摄入量的3个农村社区甲状腺疾病的流行病学随访研究资料，探讨甲状腺功能正常人群甲状腺自身抗体发生和转归的规律和意义，以及环境因素碘对其的影响。方法 1999年本研究组对轻度碘缺乏、超足量碘摄入和过量碘摄人的盘山、彰武和黄骅3个社区进行了甲状腺疾病的流行病学研究，2004年再次对同一人群进行了随访研究，前后采用同样方法采血清测定TSH、甲状腺过氧化物酶抗体（TPPOAb）、甲状腺球蛋白抗体（TgAb）和甲状腺球蛋白（Tg）水平，采尿样测定尿碘浓度及行甲状腺B超检查。结果 （1）初访时TSH正常人群5年后TPOAb的阳性率在彰武社区较前升高，TgAb的阳性率在黄骅社区较前升高（均P〈0．05）。（2）初访时TSH正常但TPOAb或TgAb阳性者多维持抗体阳性，且抗体水平越高随访抗体阳性维持率越高。（3）随访发现1999年TPOAb和（或）TgAb阳性者较抗体阴性者更易发生甲状腺功能异常（P〈0．01），黄骅和彰武社区的抗体阳性者5年随访发生甲状腺功能减低的比率显著高于盘山社区，以黄骅社区最高（P〈0．05）。（4）彰武社区TPOAb阳性的5年累积发生率在3个社区中最高。黄骅社区TgAb阳性的5年累积发生率在3个社区中最高，与盘山相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 甲状腺自身抗体阳性者发生甲状腺功能异常的比率显著高于抗体阴性者，而碘摄人量增加能增加抗体阳性者发生甲减的危险性。持续处于过量碘摄人状态使甲状腺自身抗体阳性的发生率增加。     

Effect of iodine intake on serum thyroglobulin——A five-year prospective epidemiological study

Objective To clarify the effect of iodine intake on serum thyroglobulin (Tg). Methods A 5-year prospective study was conducted in the 3 different iodine intake areas in China [Panshan (miht deficiency) ,Zhangwu (more than adequate) and Huanghua (excess)]. A total of 3 099 people with normal serum levels of Tg in 1999 were followed and 2 448 of these participants were feasible to be observed in 2004 and included in the present study. The serum levels of Tg, thyraglobulin antibody(TgAb), thyroid peroxidase antibody(TPOAb) and TSH, thyroid volume, family and personal histories of thyroid diseases were measured and inquried. The general linear model (GLM) was used to explore the determinants of Tg. Results Among the study population at baseline, serum Tg were significantly different in three areas [7.5 (4.4-13. 1) μg/L at Panshan, 6.8 (3.6-11.2)μg/L at Huanghua, 5.9 (3.2-10.7) μg/L at Zhangwu, P<0.01]. They were associated with age, sex and the rate of positive TgAb, abnormal thyroid volume, abnormal TSH and positive personal history of thyroid diseases, in order to control the effects of confounding factors, the data from 1856 subjects with thyroid-related indexes all in normal range and without personal history of thyroid diseases were analyzed to clarify the effect of iodine intake on Tg. The serum Tg among three areas were significantly different in both 1999 and 2004, they were all increased in 5 years with significant augment (△ Tg) among the three areas[3.1 (-0.2-8.0) μg/L at Panshan, 3.5 (0.5-9.0)μg/L at Huanghua vs 2. 5(0.3-6.1) μg/L at Zhangwu,P<0.01]. The GLM analysis revealed that age, Tg and TSH levels at baseline were the determinants of △Tg in addition to iodine intake. Conclusion Iodine intake is a dominant determinant of serum Tg. Age and TSH should also be considered while indicating iodine intake by serum Tg.     

脐血来源内皮祖细胞的生物学特性与安全性评价

目的:探讨脐血来源的内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的生物学特性,评价其长期体外培养后的安全性.方法:分离脐血单个核细胞(mononuclear cells,MNCs),采用MCDB1 31.培养基联合VEGF等生长因子进行培养.观察培养细胞的形态,测定其生长动力学,采用流式细胞仪及免疫细胞化学方法检测其表型,应用细胞荧光化学法分析EPCs对乙酰化低密度脂蛋白(acetylated low-density lipoprotein,ac-LDL)的摄取功能,Matrigel上培养并检测其形成血管能力,染色体核型分析其遗传稳定性,裸鼠实验、软琼脂实验观察致瘤性.结果:脐血来源的内皮祖细胞体外进行长期传代培养,群体倍增水平可达42代,有内皮细胞表面抗原的表达,具有内吞ac-LDL的功能和结合UEA-1的特性及体外形成血管的能力,分离培养的EPCs不同代次的内皮细胞均具有正常核型,并未见致瘤性.结论:脐血来源的内皮祖细胞具有较高的增值潜能,在体外传代可以大量扩增,长期传代时核型稳定,无致瘤性,是作为细胞治疗和基因治疗的理想种子细胞.     

高选择性区域血流阻断技术治疗复杂性肝癌

目的:评估高选择性区域血流阻断技术在复杂性肝癌切除中的意义.方法:在68例复杂性肝癌切除中,先结扎、切断第三肝门所有的肝短血管,再分别在第一、二肝门处游离出患侧肝蒂及主肝静脉并阻断.观察术中出血量、术后肝功能的变化及术后并发症.结果:68例中65例在肝外游离出主肝静脉并加以阻断,3例以小的心耳钳沿腔静脉方向纵行夹住主肝静脉阻断出肝血流,并常规行患侧肝蒂间歇性阻断.术中出血400～1 200(600±200)mL,有26例(65%)没有输血.术后无1例发生肝功能衰竭.术后膈下感染2例,胆漏2例,经引流自愈.结论:在复杂性肝癌切除中,肝脏高选择性区域血流阻断技术可有效减少术中出血,降低术后肝功能衰竭发生率.     

骨质疏松患者体外培养BMSCs的生物学特性

[目的]探讨骨质疏松患者骨髓源骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)的体外培养方法和作为种子细胞的可能性.[方法]从一骨质疏松患者髂骨中抽取骨髓10ml,体外培养、传代和扩增,对细胞形态进行观察及采用流式细胞仪鉴定BMSCs;将第三代细胞分别接种在常规DMEM培养液及常规DMEM 10ng/ml(PDGF-BB)培养液,绘制两组的生长曲线、倍增时间及用MTT法分析其存活和增殖能力;将第三代细胞分别用常规DMEM培养液、常规矿化液和常规矿化液 PDGF-BB(10ng/ml)培养液培养,向成骨细胞定向诱导分化后测定三组细胞内碱性磷酸酶(ALP)含量及茜素红法(ARS)钙化结节染色.[结果]倒置相差显微镜下观察显示原代细胞具有成纤维细胞的生长特性;生长曲线显示常规DMEM PDGF-BB培养液组较常规DMEM培养液组细胞增殖快且细胞倍增时间短;流式细胞仪鉴定细胞群为BMSCs,纯度在95%以上;MTT法显示三组两两之间统计学分析均有显著性差异(P＜0.01);ALP定量测定显示三组之间统计学分析有显著性差异(P＜0.01);茜素红法(ARS)钙化结节染色结果显示常规矿化液组和常规矿化液 PDGF-BB培养液两组均为阳性.[结论]从骨质疏松患者骨髓源中获得的BMSCs,经体外培养、纯化、扩增后可达到组织工程骨所要求的106～107细胞数量级,且其可诱导分化为成骨细胞;PDGF-BB能促进BMSCs的增殖,但不影响其分化成骨能力.     

犬肾去交感神经对长期快速心房起搏后心房基质和心房颤动诱发的影响

目的 探讨犬肾去交感神经对长期快速右房起搏后心房基质和心房颤动﹙AF﹚诱发的影响。方法 20 只犬分为假手术组﹙n=6﹚、右房起搏﹙RAP﹚组﹙n=7﹚和肾去交感神经﹙RSD﹚组﹙n=7﹚三组。假手术组植入起搏器后程控关闭起搏器;RSD 组先行双侧肾交感神经消融,经 6 周恢复后植入起搏器;RAP 组和 RSD 组快速起搏﹙400 ~450 次 / 分﹚右房 5 周。所有犬在试验开始时和终点进行血压测量及电生理检测;处死动物后迅速取左房组织,检测组织心房利钠肽﹙ANP﹚、血管紧张素Ⅱ﹙AngⅡ﹚和醛固酮水平,及组织半胱天冬酶-3﹙Caspase-3﹚、Bax、B 淋巴细胞瘤-2 基因﹙Bcl-2﹚、金属蛋白酶组织抑制剂-1﹙TIMP-1﹚、基质金属蛋白酶-9﹙MMP-9﹚和转化生长因子-β1﹙TGF-β1﹚等蛋白表达。结果 RSD 组犬肾动脉消融 6 周后﹙植入起搏器前﹚收缩压较消融前显著降低﹙P=0. 001﹚;右房起搏5 周后 RSD 组和 RAP 组的收缩压和舒张压较假手术组均明显降低﹙P〈0. 05﹚,且 RSD 组收缩压较 RAP 组更低﹙P =0. 036﹚。与假手术组和 RSD 组相比,RAP 组起搏 5 周后诱发的 AF 持续时间明显延长﹙P 〈0. 05﹚。RAP 组心房有效不应期﹙AERP﹚明显缩短﹙P=0. 002﹚,而 RSD 组 AERP 的缩短无显著性﹙P =0. 087﹚。与假手术组比较,RAP 组犬左房的 ANP、AngⅡ和醛固酮水平显著升高,而在 RSD 组其升高的趋势明显减缓﹙P〈0. 05﹚。与 RAP 组相比,RSD 组犬左房的 Caspase-3、Bax、MMP-9 和 TGF-β1 蛋白表达显著降低,而 Bcl-2 和 TIMP-1 蛋白表达显著升高。结论 肾去交感神经可抑制长期快速右房起搏后 AF 的诱发和心房基质改变。     

植入型心律转复除颤器在致心律失常性右心室心肌病患者中的应用

目的 总结阜外心血管病医院应用植入型心律转复除颤器(ICD)治疗致心律失常性右心室心肌病(ARVC)的经验.方法 入选我院2004年3月至2012年3月确诊并植入ICD的ARVC患者,收集临床资料,进行常规电话及门诊随诊.结果 共18例患者[男12例,女6例,平均年龄(46.4±13.8)岁]入选,平均随访(46.6±30.5)个月,有6例患者出现了111次室性心动过速(VT)/心室颤动(VF)事件,其中仅1次VF事件,其余均为VT事件,其中3例患者术后共出现了7次电风暴.ICD治疗组中的C反应蛋白(CRP)明显高于ICD未治疗组.111次VT/VF事件中,12次经电除颤终止心动过速,其余均通过抗心动过速起搏(ATP)终止了心动过速.结论 ARVC患者ICD植入后的VT/VF事件以VT为主,多数可经ATP终止;出现电风暴的ARVC患者易反复发作恶性心律失常;CRP可能对ICD治疗具有预测价值.     

自噬相关蛋白Beclin-1表达与缺血性心肌病的相关性

目的探讨自噬相关蛋白Beclin-1表达与缺血性心脏病的相关性。方法病例组选自贵州医科大学法医司法鉴定中心于2013年7月至2016年12月接收的尸检案例中被确诊为"缺血性心肌病"的80例死者,对照组为同期接收的尸检案例中经病理组织学检查确认无心肌组织病变的122例死者。用免疫组织化学检测Beclin-1在病例组和对照组心肌细胞中的表达。通过建立广义线性模型,调整多个混杂因素(包括性别、年龄、身高、体质指数、左心室壁厚度、右心室壁厚度、酗酒史、Gensini评分、心肌梗死史、是否合并高血压、慢性肾病和慢性呼吸系统疾病),评估Beclin-1和缺血性心肌病发病的相关性。结果 Beclin-1在心肌细胞中的表达与缺血性心肌病呈正相关(OR=1.2,95%CI为1.1~1.3,P0.001)。即在调整其他混杂因素后,Beclin-1对缺血性心肌病的作用是:Beclin-1的表达每增加0.01个单位,缺血性心肌病风险增加20%。结论 Beclin-1可能是缺血性心肌病的独立危险因素。