盐酸头孢他美酯健康人体药动学研究

 目的　研究头孢他美酯在健康人体内的药动学。方法 18名健康志愿者单剂量po盐酸头孢他美酯片500mg ,采用高效液相色谱法测定血浆和尿中活性代谢物头孢他美药物浓度。结果　药动学参数末端相消除半衰期(t_1/2)、峰浓度(c_max)、AUC_0～12分别为:(2.52±0.47)h,(3.67±0.98)μg·mL^-1,(21.10±5.19)μg·h·mL^-1。结论　头孢他美的体内过程符合二室开放模型,主要经肾脏排出体外,12h累积尿排百分率为(36.00±8.62)%。     

环孢素对心脏移植大鼠外周血淋巴细胞多基因mRNA表达的影响

 目的 对大鼠心脏移植前后不同时间点外周血淋巴细胞mRNA差异表达的研究,探讨环孢素对免疫排斥反应过程中基因表达的影响.方法 心脏移植前后以15 mg·kg^-1·d^-1环孢素灌胃的大鼠,分别在移植前、移植后24,72 h,7,10,12d取血,提取总RNA,用mRNA差异显示法找出差异表达条带,克隆测序,用灰度扫描法计算差异表达基因的比密度。结果 对照组移植心脏存活率于移植后的10d内降至为0%,而此阶段环孢素组的移植心脏存活率始终保持在50％.移植后第10天,对照组与凋亡信号传导和线粒体蛋白构象重构与蛋白转运相关基因Ribosomal—12S和S25,MHC—Ⅲ(Hst-70)的表达水平显著高于移植前,与移植心脏存活率最低点同步.其2,3-bisphosphoglycerate和gig18基因表达水平的变化无统计学意义。环孢素组与细胞凋亡有关的gig18和Thbsl,以及T细胞受体(TCR)等基因的表达水平于移植后10 d内持续低于移植前,2,3-bisphosphoglycerate基因的表达水平于移植后24 h降低,只有钠通道β-1基因的表达水平于移植后10 d内高于移植前。结论 环孢素可负调心脏移植后大鼠外周血淋巴细胞凋亡相关基因gig18和Thbsl,正调钠通道基因的转录。     

缓释bFGF-PLGA微球制备及其体外释药性质和生活活性的研究

 目的 制备bFGF-PLGA微球，考察其一般性质、体外释药特性和微球中bFGF生物活性保存情况。方法 应用复乳干燥法制备缓释bFGF-PLGA微球(bFGF-PLGA-Ms)，并考察其一般性质。采用ELISA法建立用于bFGF含量测定的标准方法和回归方程，模拟体内条件研究微球体外释药特性。将bFGF-PLGA-Ms加入成纤维细胞培养液中，MTT法观察细胞增殖情况。结果 微球表面光滑圆整，球体均匀度好，平均粒径为(1.552±0.015)μm，冻干粉剂为白色粉末状，再分散性良好，临界相对湿度为64%，CH₂Cl₂残留量低于限量的1/10，微球包封率和载药量分别为(66.43±1.24)%和［(27.18±0.51)×10^-3］%。微球体外释药规律符合Higuichi方程：Q=25.884 6t_1/2-15.705 1(r=0.997 5)，突释期内释放度仅为19.26%，11 d后其释放度达到72.47%。培养初期，bFGF组A值高于其余两组；培养中后期，PLGA微球组A值高于其余两组，差异均有显著性意义（q检验，P<0.05）。结论 bFGF-PLGA微球及其冻干粉剂制备工艺良好；微球中bFGF生物活性保存良好，体外具有明显缓释作用。     

探讨中药对生精干细胞的可能作用--附2例睾丸癌病例治疗

通过2例精原细胞瘤病例经过大剂量放疗后致无精子不育后,经中药治疗由无精、偶见精子到具有接近正常的精液质量表现,其中1例致女方怀孕生出健康女婴、随访18个月表明婴儿发育正常的过程,提出中药在明确的生精作用中可能具有尚未引起重视的对生精干细胞的直接作用.首次提出中药对生精干细胞可能具有诱导或促分化的作用有重要意义,应引起重视.     

VEGF及其受体KDR表达与宫颈癌细胞增殖及侵袭转移的关系

目的 :探讨血管内皮生长因子 (vascu larendothelialgrowthfactor ,VEGF)及其受体(kinaseinsertdomaincontainingreceptor ,KDR)在早期宫颈癌的表达和临床意义。方法 :采用免疫组织化学SP法检测 75例早期宫颈癌(ICC)、18例宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)和 15例正常宫颈上皮 (NCE)中VEGF、KDR和增殖细胞核抗原 (Ki 67)的表达。结果 :VEGF、KDR、Ki 67在NCE、CIN和ICC的阳性表达率分别为 2 6 67% ( 4 /15 )、61 11% ( 11/18)和77 3 3 % ( 5 8/75 ) ,13 3 3 % ( 2 /15 )、 61 11%( 11/18)和 69 3 3 % ( 5 2 /75 )及 13 3 3 % ( 2 /15 )、72 2 2 % ( 13 /18)和 96 0 0 % ( 72 /75 )。从NCE到CIN再到ICC ,VEGF、KDR和Ki 67的阳性表达率均逐渐升高 ,P <0 0 5。VEGF、KDR在ICC的表达均与盆腔淋巴结转移、脉管浸润、组织学分级和Ki 67表达有关 ,P <0 0 5 ;而均与患者年龄、FIGO分期、组织学类型和间质浸润深度无关。有盆腔淋巴结转移、脉管浸润、组织学分级为Ⅲ级及Ki 67高度表达者的VEGF、KDR阳性表达率分别显著高于无盆腔淋巴结转移、无脉管浸润、组织学分级未超过Ⅱ级及Ki 67表达在中度以内者 ,P<0 0 5。VEGF与KDR在ICC的表达呈显著正相关 ,r =0 5 6,P <0 0 1;并且两指标均阳性表达者 ,其Ki 67高度表达、     

三氧化二砷对人白血病细胞株NB4和K562及MOLt4的增殖、周期及凋亡的影响

目的 :观察三氧化二砷 (As2 O3 )对人白血病细胞株NB4、K5 62、MOLt4的增殖 ,周期及凋亡的影响。方法 :采用台盼蓝拒染法计数活细胞数 ,并计算细胞生长率 ;细胞涂片经Wright Giemsa染色 ,光镜下观察细胞的形态 ;流式细胞仪解析细胞周期。结果 :1)As2 O3 能够抑制NB4、K5 62、MOLt4细胞的增殖。 2 ) 4μmol/LAs2 O3 能够使K5 62细胞发生M期阻滞。但NB4、MOLt4细胞未见明显改变。 3 ) 2、4μmol/L的As2 O3 处理NB4、MOLt4和K5 62细胞 48h ,NB4、MOLt4细胞株的凋亡细胞明显增多。但是 ,K5 62细胞未见明显改变。结论 :As2 O3 不但对NB4细胞具有抑制增殖 ,诱导细胞凋亡的作用 ,而且对非t( 15 ;17)的K5 62、MOLt4细胞也具有抑制增殖的作用 ,同时诱导MOLt4细胞凋亡 ,使K5 62细胞发生M期阻滞。     

抗白血病树突状细胞疫苗的制备

目的探索抗白血病异体树突状细胞疫苗的制备方法.方法从健康者外周血中诱生DC,用不同方法负载K562抗原(化学融合法,冻融抗原冲击法,肿瘤与DC共培养法),比较这些DC疫苗在递呈抗原激活T细胞增殖及杀伤功能方面的差异.结果从健康者外周血中可诱生出具有正常免疫表型和抗原递呈功能的DC.不同抗原负载方法致敏的DC均能激活T细胞特异性杀伤K562细胞.冻融抗原负载的DC能有效刺激T细胞增殖,其活化的CTL对K562的杀伤毒性最强.结论异体DC可有效递呈肿瘤抗原,激活T细胞杀伤肿瘤,冻融抗原负载的DC激活T细胞对肿瘤的杀伤最强,为今后临床DC疫苗的选择提供了实验依据.     

硫酸化甲壳质对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和周期的影响

目的　探讨硫酸化甲壳质对鼻咽癌CNE - 2Z细胞增殖和周期的影响。方法　MTT法检测增值抑制率和IC50 ,流式细胞术分析细胞周期。结果　不同浓度的硫酸化甲壳质分别处理细胞 2 4h、4 8h、72h时 ,抑制率随浓度的增加和时间的延长而增加 ,其IC50 分别为 (0 5 2 9± 0 0 39)、(0 0 4 8± 0 0 2 7)、(0 389± 0 0 2 7)mg/ml,各IC50 间的差异有非常显著性意义 (P <0 0 1)。 0 2mg/ml,0 4mg/ml,0 6mg/ml硫酸化甲壳质分别处理细胞 12h、2 4h、4 8h时 ,G0 /G1期细胞明显下降 ,G2 /M期细胞明显升高 ,随时间的延长变化更明显 (P <0 0 1)。结论　硫酸化甲壳质对CNE - 2Z细胞具有增殖抑制作用 ,并呈剂量和时间依赖性 ;阻滞细胞于G2 /M期 ,也呈时间依赖性 ;一定剂量的硫酸化甲壳质可能通过阻滞CNE - 2Z于G2 /M期而抑制其增殖。     

口腔癌前病变和鳞癌组织中hMSH2蛋白表达的初步探讨

目的:探讨错配修复基因hMSH2的表达与口腔鳞癌发生、发展的关系.方法:采用Western Blot和免疫组化方法检测正常口腔上皮组织、癌旁组织和鳞癌组织中hMSH2的蛋白含量和组织分布.结果:Western Blot检测发现口腔正常上皮组织与癌旁上皮组织的hMSH2表达无明显差异(P＞0.05),而鳞癌上皮内hMSH2蛋白表达较前两者显著增加(P＜0.05).免疫组化结果显示正常上皮内仅见基底层细胞胞核阳性表达;癌旁上皮内hMSH2蛋白表达与异常增生程度有关,异常增生明显的上皮,胞核阳性表达的细胞亦较多;hMSH2蛋白在鳞癌上皮全层细胞胞核内呈阳性表达.所有细胞的胞浆均未见阳性表达.结论:在口腔鳞癌组织中hMSH2蛋白表达水平升高,表明hMSH2的表达在口腔鳞癌的发生、发展过程中可能存在表观遗传调节.     

胃肠道恶性肿瘤t-PA、u-PA转录的临床研究

目的：研究胃肠道恶性肿瘤患者纤溶分子标志物血浆含量、mRNA水平的变化，初步探讨两者与肿瘤浸润、播散的关系及其临床检测意义。方法：采用逆转录、实时定量PCR技术检测23例胃癌、17例肠癌患者组织中组织型纤溶酶原激活剂(t—PA)、尿激酶型纤溶酶原激活剂(u—PA)mRNA水平；用ELISA法同步检测患者血浆纤溶分子标志物含量，包括t—PA、u—PA、尿激酶型纤溶酶原激活剂受体(u—PAR)、纤溶酶—抗纤溶酶复合物(PAP)等。结果：胃癌、肠癌组患者血浆u—PA、u—PAR、PAP蛋白含量均较正常对照明显升高，其中，有局部浸润、淋巴结转移、远处脏器转移者u一：PA升高更为显著；t—PA含量与正常对照无显著差异。u—PAmRNA在两种肿瘤细胞表达均显著增高，而t—PAmRNA则减少。结论：纤溶功能亢进是胃肠道恶性肿瘤细胞易播散、浸润的主要原因之一。t—PAmRNA水平的升高可能为组织分化较好的特征。