小鼠B16黑色素瘤细胞HACs的提纯及其抑瘤作用和机理的探讨

目的：从小鼠Ｂ１６黑色素瘤细胞胞浆中提纯热休克蛋白抗原肽复合物（ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｒｏｔｅｉｎ－ａｎｔｉｇｅｎ ｐｅｐｔｉｄｅ ｃｏｍｐｌｅｓｅｓ．ＨＡＣＣｓ）,并观察其抑瘤作用及探索其机制。方法：ＣＮＢｒ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析法纯纯Ｂ１６ ＨＡＣｓ,应用体内免疫法检测ＨＡＣ的抑瘤作用,结晶紫染色法检测γ－ＩＦＮ分泌活性,ＣｏｎＡ诱导的淋巴母细胞增殖法检测ＩＬ－２分泌活性,＾３Ｈ－     

T细胞共刺激反应与电离辐射

近年来,对T细胞的活化及其抗肿瘤机制有了新的突破性认识,T细胞共刺激反应是激发有效的细胞免疫应答所必需的,B7分子家族及CD28/CTLA-4等共刺激分子在共刺激反应的信号传递过程中起重要作用.本文简要综述共刺激反应信号转导形式,诱导细胞免疫,抗肿瘤及与电离辐射的关系等方面的内容.     

人类重组酸性成纤维细胞生长因子对细胞增殖和凋亡的影响

目的：通过对人类重组型和野生型酸性成纤 维细胞生长因子（raFGF，waFGF）的比较研究，探讨raFGF与促分裂性有关的生物学作用。 方法：应用NIH3T3细胞株，用MTT法通过细胞增殖实验检测waFGF和raFGF 的促分裂性，通过流式细胞术检测细胞凋亡、细胞膜通透性和线粒体膜电位。同时检测肝素 （HS）对aFGF生物学作用的影响。结果：raFGF对细胞增殖 作用明显低于waFGF。raFGF对细胞凋亡的抑制作用及其对细胞膜通透性的增强作用也明显低 于waFGF，对线粒体膜电位的增强作用明显低于waFGF。HS对aFGF的生物学作用具有促进作用 。结论：raFGF的促分裂作用低于waFGF，而对细胞凋亡的影响不明显。     

姜黄素对紫外线氧化损伤人角质形成细胞的保护作用

目的 研究中波紫外线(UVB)照射所致人角质形成细胞的氧化损伤以及姜黄素(curcumin,Cur)对其损伤的抗氧化防护效果.方法 在角质形成细胞培养的基础上,实验组经30 mJ/cm2 UVB照射后,加入不同剂量的Cur(1.25 ～5.0 μg/ml),继续培养18 h,采用生物化学法测定细胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和乳酸脱氢酶(LDH)活性及丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)含量.结果 人角质形成细胞经UVB照射后加入Cur,与UVB照射组比较,ROS和MDA含量明显降低(P＜0.05),并显示Cur剂量-效应关系;而SOD和GSH-Px显著增高(P＜0.05),LDH活性显著降低(P＜0.05),均显示其剂量-效应关系.结论 Cur能增加细胞内抗氧化酶活性,抑制脂质过氧化反应,具有对UVB照射所致人角质形成细胞的氧化损伤防护作用.     

刺激缰核对促性腺激素分泌及免疫功能的影响

进一步揭示缰核（Ｈｂ）与垂体分泌及免疫器官功能的关系，采用电刺激Ｈｂ技术，观察电刺激雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠缰核１２ｈ后，垂体激素分泌及胸腺和脾脏免疫功能的变化。结果表明，血清ＦＳＨ、ＬＨ和ＰＲＬ水平有不同程度的增高，而血清ＴＳＨ水平变化不明显；胸腺细胞自发掺入能力、胸腺舵手对ＣｏｎＡ反应怀及脾细胞对ＰＷＭ反应性也均不同程度增强。上述结果提示，电刺激缰核后垂体促性腺激素分泌增高及免疫顺     

siRNA与肿瘤放射治疗

近年来，放射肿瘤学研究致力于采用特异性阻断剂阻断DNA修复过程中关键调控基因，并通过有效抑制DNA损伤修复，促进肿瘤细胞死亡，收到较好的肿瘤放疗效果。但是同时发现，阻断剂技术本身存在诸多缺陷，这极大地限制其尽快应用于临床肿瘤治疗。自小片段干扰核糖核酸(small interference RNA，siRNA)干涉技术发现以来，其强大的阻断真核细胞中特异表达蛋白的能力为众多研究所关注。更重要的是，它较好地解决了应用阻断剂带来的上述问题，从而为肿瘤放射基因治疗研究提供了新途径。     

细胞凋亡的线粒体调控机制与电离辐射

线粒体在外界刺激(如电离辐射)诱发细胞凋亡中起中心调控作用。各种死亡信号通过Bcl-2家族蛋白或直接诱导线粒体膜通透性增加、细胞色素c释放和caspases激活，最终引起细胞凋亡。线粒体膜通透性改变的机制，目前还不完全清楚。简要综述细胞凋亡的线粒体调控机制及电离辐射在其机制中的可能作用。     

taurolidine对小鼠黑色素瘤细胞辐射敏感性的作用及机制

目的：研究taurolidine通过增强Bax和Bad蛋白表达，降低Bcl-2蛋白表达，提高小鼠黑色素瘤B16-F10细胞的辐射敏感性的作用及机制。方法：流式细胞仪检测0、10、25、50、100和150 μmol•L^-1 taurolidine诱导B16-F10细胞凋亡的百分比；细胞 克隆实验检测放射增敏性；Western blotting分析检测蛋白的表达。结果：50 μmol•L^-1 taurolidine作用于B16-F10细胞48 h，可诱导5%的细胞凋亡,随作用时间的延长及taurolidine浓度的增加，细胞凋亡的百分率增加（P<0.05）,呈显著的时效和量效关系；细胞克隆存活实验显示,当25 μmol•L^-1 taurolidine与2 Gy X射线照射联合作用B16-F10细胞时，与单纯给药组和单纯照射组比较，给药联合放疗组的细胞存活率显著降低（P<0.05），并随着药物浓度及照射剂量的增加细胞存活率进一步下降。随着taurolidine的浓度逐渐提高，小鼠黑色素瘤细胞放射增敏比（SER D₀和SER D_q）增高,50 μmol•L^-1 taurolidine组与10 μmol•L^-1组比较差异有显著性(P<0.05)；同时促凋亡蛋白Bax和Bad的表达增强，抗凋亡蛋白Bcl-2的表达下降。结论：taurolidine联合X射线照射通过调节Bcl-2家族蛋白协同诱导小鼠黑色素瘤细胞凋亡，从而提高了放射敏感性。     

低剂量辐射诱导EL-4淋巴瘤细胞凋亡及细胞周期进程适应性反应的时间效应

目的：研究低剂量辐射诱导EL-4淋巴瘤细胞凋亡及细胞周期进程适应性反应的时间效应，以揭示低剂量辐射生物效应及其诱导适应性反应的可能机制。方法：实验分D2组（攻击剂量）、D1（诱导剂量）+ D2组和假照组。用X射线照射离体EL-4淋巴瘤细胞，其D1为75 mGy（剂量率12.5 mGy•min^-1），D2为1.5 Gy（剂量率287 mGy•min^-1），D1和D2间隔为3~60 h。通过流式细胞仪检测其细胞凋亡和细胞周期进程的变化。结果：当D1和D2间隔为3~24 h时，D1+D2组细胞凋亡百分数明显低于D2组（P<0.05或P<0.01），G₀/G₁期细胞百分数不同程度低于D2组，而S期细胞百分数明显高于D2组（P<0.05）。结论：75 mGy（12.5 mGy•min^-1）照射后3~24 h，进行1.5 Gy（287 mGy•min^-1）照射，可诱导体外EL-4淋巴瘤细胞凋亡和细胞周期进程的适应性反应。     

3-AB对Hela细胞PARP表达及X线照射后Hela细胞凋亡和周期进程的影响

目的：研究多聚（ADP-核糖）聚合酶(PARP)特异性抑制剂3-氨基苯甲酰胺（3-AB）抑制PAR后Hela细胞凋亡和周期进程的变化及PARP对电离辐射损伤细胞的作用机制。方法：采用体外传代培养的人宫颈癌上皮细胞Hela细胞为实验材料；给予Hela细胞3-AB( 5 mmol• L¹) 0、2、4、8及12 h后，采用PARP单克隆抗体荧光标记，流式细胞术检测对照组及3-AB组经3-AB作用不同时间后Hela细胞中PARP蛋白表达；在给予3-AB 2 h后，对阴性对照组、单纯X线照射组及3-AB加X线照射组Hela细胞行2 Gy X线照射2、8、12及24 h后应用流式细胞术测定 Hela细胞凋亡和细胞周期进程。结果：给予3-AB后2、4、8及12 h PARP蛋白表达阳性的Hela细胞百分数均明显低于阴性对照组（P<0.01），其中在2 h时降低较明显，阳性细胞率为(7.60±1.36)%。进行2 Gy照射后2、8、12及24 h各时间点，3-AB加X线照射组Hela细胞凋亡率均明显高于单纯X线照射组（P<0.01或P<0.05），而G₂期细胞百分数均低于单纯X线照射组（P<0.01或P<0.05）。结论：3-AB明显抑制Hela细胞PARP表达，增加电离辐射所致细胞凋亡并减少G₂期细胞阻 滞。