刺激缰核对促性腺激素分泌及免疫功能的影响

进一步揭示缰核（Ｈｂ）与垂体内分泌及免疫器官功能的关系。采用电刺激Ｈｂ技术，观察电刺激雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠缰核１２ｈ后，垂体激素分泌及胸腺脾脏免疫功能的变化。结果表明，血清ＦＳＨ、ＬＨ和ＰＲＬ水平有不同程度的增高，而血清ＴＳＨ水平变化不明显；胸腺细胞自发掺入能力、胸腺和脾细胞对ＣｏｎＡ反应性及脾细胞对ＰＷＮ反应性也均不同程度地增强。上述结果提示，电刺激缰核后垂体促性腺激素分泌增高及免疫器官功能增强可能与缰核内含有多种神经递质和神经肽参与多功能的调节有关。     

肿瘤相关抗原肽与低剂量全身照射的协同抑瘤作用

目的观察低剂量X射线照射对小鼠肝癌H-22细胞膜相关抗原肽(TAP)提取物的抑瘤作用及免疫学功能的影响,为低剂量辐射(LDR)与肿瘤疫苗联合治疗肿瘤提供实验依据。方法采用微酸洗脱法制备相对分子质量≤3×106的细胞膜TAP提取物,先给予小鼠75mGyX射线全身照射,12h后以TAP提取物皮下免疫小鼠,检测脾细胞CD3、CD69和TCRαβ表面标记、脾T细胞亚组百分数的变化、脾细胞ConA反应性、IL-2和IFN-γ活性、CTL杀伤活性的变化及抑瘤效应。结果小鼠经TAP提取物免疫后,移植肿瘤的发生率降低,肿瘤平均出现时间延迟,生长速度减慢;脾细胞CD3分子和CD69分子的表达显著升高,脾细胞ConA反应性、IFNγ分泌活性和CTL杀伤活性显著增强,IL-2分泌增多。而同时给予LDR的小鼠不仅上述功能不同程度增强,脾CD8+细胞百分数显著增高。结论LDR与细胞膜TAP具有协同抑瘤作用,细胞免疫力的明显增强可能为其机制之一。     

大剂量X线头部照射对雄性大鼠生殖内分泌功能的影响

本文报道雄性大鼠受10GyX线头部照射后不同时间下丘脑多巴胺(DA)、血清促性腺激素(LH、FSH)、尿睾丸酮(Ts)、睾丸cAMP及垂体和睾丸指数的变化。其结果证实l10GyX线头部照射后DA和促性腺激素变化基本一致,其中特别有意义的是,睾丸cAMP含量变化与血清促性腺激素水平变化非常吻合,尿Ts变化与LH变化一致;垂体和睾丸指数无明显改变。上述资料说明,头部急性照射能够引起下丘脑神经递质及腺垂体促性腺激素释放的明显变化’睾丸cAMP含量变化可能继发于促性腺激素的变化,而Ts生成和分泌与促性腺激素所致睾丸cAMP变化有关。     

辐射诱导人TRAIL和内皮抑素双基因共表达载体的构建及鉴定

目的：构建辐射敏感Egr-1启动子诱导分泌型人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）和内皮抑素（endostatin）双基因共表达的载体pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES。方法：利用聚合酶链式反应（PCR）方法从pMD19T-endostatin载体上扩增得到分泌型endostatin基因,并连接到pMD19T载体上进行测序,然后利用基因重组技术构建Egr-1启动子转录调控分泌型TRAIL和endostatin双基因表达的重组质粒pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES。结果：PCR扩增出的650 bp片段经测序证实其序列与预期一致,说明获得的分泌型人endostatin基因正确;对pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES及其构建过程中涉及到的多种中间载体进行PCR和酶切鉴定,结果均与预期完全一致,证实含有辐射敏感Egr-1启动子的分泌型TRAIL和endostatin双基因共表达重组质粒pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES构建正确。结论：成功构建了辐射诱导表达的双基因共表达载体pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES,为探讨TRAIL和endostatin双基因-放射治疗的抗肿瘤作用及其机制奠定了实验基础。     

同种异体大鼠骨髓间充质干细胞移植对放射性空肠损伤的修复作用

目的观察同种异体骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对放射性空肠的修复作用。方法全骨髓贴壁体外培养大鼠MSCs并进行DAPI标记。对大鼠行5 Gy X线全腹部照射,每隔72 h照射1次,共5次,制备放射性空肠损伤动物模型。取40只大鼠,随机分成正常对照组、模型及MSCs治疗组及DAP标记组。激光共聚焦显微镜下观察DAPI标记的MSCs在空肠组织中富集情况。病理学观察MSCs对放射性空肠损伤的修复作用。结果正常大鼠空肠黏膜结构清楚,隐窝深遂,腺体丰富,模型组7 d黏膜上皮细胞坏死脱落,隐窝几乎完全破坏,治疗组7 d黏膜坏死组织较少,黏膜增厚,30 d治疗组核分裂相增加,较模型组增加明显。结论成功建立放射性空肠损伤动物模型,MSCs可以促进空肠再生与修复。     

pshuttle-Egr1-Smac质粒对MCF-7细胞的辐射致敏作用及细胞周期进程的影响

目的研究含辐射敏感Egr-1启动子介导Smac基因的重组质粒pshuttle-Egr1-hSmac对辐射人乳腺癌MCF-7细胞的致敏作用及细胞周期进程的影响。方法将其质粒经脂质体转染到MCF-7细胞中,24 h后利用克隆形成法计算存活分数,评价细胞的辐射敏感性;利用流式细胞术检测X射线照射后细胞周期进程的变化。结果 MCF-7细胞转染质粒24 h后,经0、2、4、6、8和10 Gy X射线照射后14 d,对照和pshuttle组细胞存活分数基本一致,而转染质粒的细胞存活分数明显低于对照组（P〈0.05,P〈0.01）;通过相关与回归分析,对照和pshuttle组细胞D0值分别为3.27和3.28,而转染质粒的D0值为2.1。pshuttle组各期细胞百分数变化不明显;而转染质粒的G0/G1期细胞百分数明显高于对照和pshuttle组,S期细胞明显降低（P〈0.01,P〈0.001）;2 Gy照射后24 h各组G0/G1期细胞百分数增加,S期细胞降低,其中以转染质粒的细胞变化最明显（P〈0.05,P〈0.01）。结论 pshuttle-Egr1-hSmac质粒能够增强人乳腺癌MCF-7细胞的辐射敏感性,可致细胞G1期阻滞,暗示Smac基因对乳腺癌的放疗具有辐射增敏作用。     

血管内皮生长因子重组DNA的构建及体外表达

目的:以质粒PCNDA3.0为载体,研究血管内皮生长因子(VEGF)目的基因在体外真核细胞中的表达.方法:将编码人可溶性VEGF165的目的基因克隆于带有CMV启动子/增强子的PCNDA3.0载体上,重组为PCNDA3.0-VEGF165质粒载体.直接以质粒DNA形式应用脂质体介导的方法转染人脐静脉内皮细胞ECV304,收取细胞上清,用ELISA和Western blot方法检测上清中VEGF165可溶性表达产物.结果:VEGF165基因在CMV启动子/增强子的调控下,可在ECV304细胞高效表达,且在转染后72 h表达量明显高于转染后48 h的表达.结论:以质粒PCNDA3.0为载体,VEGF165基因可以在体外真核细胞中表达,为治疗缺血性疾病提供一个新的基因治疗途径.     

大剂量X线头部照射对三种模型大鼠垂体内分泌功能的影响

本文报道,去胸腺雄性大鼠血清PRL、TSH和GH水平明显降低,而去肾上腺雄性大鼠这3种激素水平有不同程度增高,去睾丸大鼠仅血清PRL水平明显增高。三种动物模型经10GyX射线头部照射后48h,去胸腺和去肾上腺大鼠3种激素水平都有降低趋势,而去睾丸大鼠却略有增加。上述结果提示,3种大鼠模型种经内分泌调节功能已发生异常改变,不能产生正常大鼠头部照射后下丘脑-垂体功能的增强效应。