医药特色生物技术专业人才培养模式的实践

具有医药背景的生物技术专业人才培养是生物医药科技经济发展的需要,结合南华大学的特点和优势,进行了医药特色的应用型生物技术人才培养模式的探索与实践,构建了具有医药特色的生物技术专业人才培养方案、课程体系、实践教学体系,促进了专业建设.     

二苯乙烯苷上调Bcl-2抑制内皮细胞凋亡

目的研究二苯乙烯苷（TSG）对过氧化氢（H2O2）诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的作用,以及对抗凋亡基因Bcl-2表达的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,筛选造模内皮细胞凋亡的H2O2浓度,以不同浓度二苯乙烯苷作用24 h。采用MTT法检测细胞生长活力,Hoechst33258染色观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western-blot检测Bcl-2蛋白的含量。结果过氧化氢能引起内皮细胞损伤,抑制细胞增殖,并且随着浓度增加,细胞生存率逐渐降低。其中300μmol/L H2O2作用后细胞增殖明显受到抑制,Hoechst33258染色可见大量凋亡细胞,流式细胞仪检测出明显的凋亡峰,Bcl-2蛋白的表达量显著减少;加入二苯乙烯苷作用后,随着TSG浓度增加,细胞生存率增加,凋亡率逐渐降低;与H2O2造模组比较,10μmol/L的二苯乙烯苷预处理能够显著提高细胞生存率,抑制细胞的凋亡,并且使Bcl-2表达增加（P〈0.05）。结论二苯乙烯苷能抑制过氧化氢诱导的内皮细胞凋亡,该作用与上调Bcl-2表达有关。     

生物技术省级特色专业建设的探索与实践

结合南华大学的实际,生物技术专业经过积极的探索与实践,提出了培养具有"医药"特色的应用型生物技术创新人才的目标与思路,围绕培养方案、课程建设、教学改革、实践教学等环节阐述了生物技术省级特色专业建设的实践过程.     

吗啡经蛛网膜下腔植入式输注系统治疗晚期癌痛的临床观察

目的观察经蛛网膜下腔植入式输注系统输注吗啡在晚期癌痛患者镇痛的疗效。方法晚期癌痛住院患者25例,通过蛛网膜下腔植入式输注系统输注吗啡镇痛,观察治疗前与吗啡输注后24h、72h、1周、1月的VAS评分、睡眠质量（Qs）、毒副反应。结果1月后疼痛控制程度达优者22例（88％）,良1例（4％）,一般1例（4％）,差1例（4％）;优良率为92％。睡眠质量优22例（88％）,良3例（12％）。毒副反应有皮肤瘙痒2例（8％）,恶心3例（12％）,便秘3例（12％）,尿潴留4例（16％）,未见嗜睡和呼吸抑制者。结论经蛛网膜下腔植入式输注系统输注吗啡对晚期癌痛患者的镇痛疗效确切,不良反应少。     

ApoAⅠ促进THP-1源性泡沫细胞ApoE分泌的研究

目的 通过建立动脉粥样硬化损伤部位细胞模型,观察ApoAⅠ对THP-1源性泡沫细胞 ApoE分泌的影响,探讨ApoAⅠ与ApoE之间是否存在相互关系以及这种关系对动脉粥样硬化的影响.方法 采用聚乙二醇-6000(PEG-6000)沉淀法制备人血浆HDL,再利用凝胶过滤柱层析法分离ApoAⅠ;佛波酯(PMA)诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)使分化后THP-1细胞荷脂,建立动脉粥样硬化细胞模型;ELISA检测不同浓度ApoAⅠ(0,5,10,15,25 μg/ml)及不同孵育时间(0,3,6,12,24 h),THP-1源性泡沫细胞ApoE的分泌;RT-PCR检测细胞ApoE mRNA的表达情况.结果 ApoAⅠ增加THP-1源性泡沫细胞ApoE的分泌量;且ApoE蛋白质的分泌随着ApoAⅠ孵育时间增加而增加,在24 h ApoE的分泌量达最大;在剂量试验中,ApoE的分泌量随着ApoAⅠ剂量的增加有增加趋势,ApoAⅠ浓度为25 μmol/L时,ApoE分泌量最大;而ApoE基因的表达不受ApoAⅠ的影响.结论 一定浓度的ApoAⅠ促进THP-1源性泡沫细胞ApoE的分泌,且具有时间及剂量依赖性.而在基因水平上,ApoAⅠ对ApoE mRNA表达没有影响.     

高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化作用与细胞信号转导通路

高密度脂蛋白可通过多种途径发挥抗动脉粥样硬化的作用，并与激活细胞内外信号转导网络途径密切相关。深入研究高密度脂蛋白参与的细胞信号转导途径有助于了解高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化的分子机制，将对动脉粥样硬化性血管疾病的预防和治疗具有重要意义。     

冠心病患者血浆LCAT水平与HDL亚类组成的关系

 目的： 探讨冠心病 (coronary heart disease, CHD) 患者血浆卵磷脂胆固醇酰基转移酶 (lecithin cholesterol acyltransferase, LCAT) 与高密度脂蛋白 (high-density lipoprotein, HDL) 亚类分布的关系。方法：采用双向电泳-免疫印记法分析了73例正常对照者和144例冠心病患者HDL亚类的组成、含量及分布特征,用酶联免疫法测定其LCAT浓度。冠心病患者按血浆LCAT浓度进行四分位数（19.22、36.39和55.32 mg/L）分层（Q1：LCAT<19.22 mg/L; Q2：19.22≤LCAT<36.39 mg/L; Q3：36.39≤LCAT<55.32 mg/L; Q4：LCAT≥55.32 mg/L）。结果：随着LCAT浓度的降低,冠心病患者血浆总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）水平和载脂蛋白B-100/A-I(apoB-100/A-I)比值呈增加趋势,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和apoA-I水平呈减少趋势。与最高四分位数组相比,第三、第二和最低四分位数组中preβ1-HDL含量增加,HDL2a和HDL2b含量减少 (P<0.05或P<0.01)。与正常TC组比较,高TC组LCAT浓度降低,且preβ1-HDL含量增加,HDL2a 和HDL2b含量减少(P<0.01)。直线相关和多元回归分析中发现,血浆LCAT水平与preβ1-HDL浓度呈负相关,与HDL2a和HDL2b浓度呈正相关。结论：CHD患者血浆HDL颗粒呈变小趋势,并且随着LCAT水平的降低,其HDL颗粒的变小程度更加明显。     

血浆晚期氧化蛋白产物与HDL亚类组成的关系

目的 探讨血浆晚期氧化蛋白产物(AOPPs)对血浆高密度脂蛋白(HDL)亚类组成及含量的影响.方法 采用氯胺-T法和双向电泳免疫印迹检测法对346例受试者分别测定血浆AOPPs的相对含量和血浆HDL亚类的组成及含量.按AOPPs浓度均值加或减去一个标准差作为分割点,将受试者分为3组,即低AOPPs(AOPPs≤60μmol/L)组、中AOPPs(60 μmol/L＜ AOPPs ＜90 μmol/L)组、高AOPPs(AOPPs ≥90μmol/L)组.结果 与低AOPPs组相比,高AOPPs组中preβ1-HDL及HDL3a显著增多(P＜0.001),而HDL2a、卵磷脂胆固醇酰基转移酶及HDL2b显著降低(P＜0.001),各组胆固醇酯转运蛋白无变化.相关性分析表明AOPPs与血浆HDL亚类分布存在显著相关.结论 随着血浆AOPPs水平的升高HDL颗粒有变小的趋势,AOPPs可能阻碍了HDL的成熟代谢.     

mdm2在骨巨细胞瘤的表达及其与复发的关系

目的 探讨ｍｄｍ２部基因蛋白在骨巨细胞瘤（ＧＣＴ）的表达及其与复发的关系。方法 应用ＳＰ免疫组织化学方法检测ｍｄｍ２在５２例ＧＣＴ中的表达；ＧＣＴ按Ｊａｆｆｅ分级：Ⅰ级１５例，Ⅱ级２５例，Ⅲ级１２例。结果 １８例ｍｄｍ２表达呈阳性，占３４．６％；在Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级中的阳性表达率分别为４０．０％、３２．０％、３３．３％；ｍｄｍ２阳性表达率在骨巨细胞瘤Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级中的差异无显著性意义（ｘ＾２＝０．     

二苯乙烯苷对氧化损伤人脐静脉内皮细胞NF-κB表达的影响

目的 研究二苯乙烯苷(TSG)对过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用,并探讨其作用机制.方法 以不同浓度(0.1、1.0和10.0 μmol/L)的二苯乙烯苷孵育体外培养人脐静脉内皮细胞4 h后,用200 μmol/L过氧化氢作用内皮细胞24 h,采用电镜观察、MTT等方法 测定各组细胞活力;RT-PCR、Western-blot检测基因NF-κB、IκB表达.结果 与对照组比较,不同剂量组TSG均可以提高过氧化氢诱导损伤的人脐静脉内皮细胞活性,降低NF-κB mRNA及蛋白水平的表达,其中以1 μmol/L TSG组的作用最明显(P<0.01),但对IκB基因表达的影响差异均无显著性(P>0.05).结论 二苯乙烯苷对氧化损伤的人脐静脉内皮细胞具有抗氧化保护作用,其作用机制可能与下调NF-κB的表达、阻断细胞NF-κB/IκB信号通路有关.