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目的 应用RNA干扰(RNAi)和RNA激活(RNAa)技术,分别构建小干扰RNA(siRNA)和双链RNA(dsRNA),建立Wilms瘤基因1(WT1)低表达和过表达的乳腺癌细胞模型.方法 以国外学者提供的3条序列(siRNA-516 、siRNA-803、siRNA-1029)构建WT1 siRNA干扰表达WT1,以研究已证实可上调WT1表达的序列(dsRNA-319)构建dsRNA过表达WT1,通过脂质体(LipofectamineTM2000)分别将siRNA和dsRNA转入MDA-MB-321和MCF-7细胞.WT1有效siRNA筛选实验分为6组:WT1siRNA-516、WT1 siRNA-803、WT1 siRNA-1029、阴性对照、脂质体组和空白细胞组;观察转染效率的时间点为转染后24、48、72 h.WT1 dsRNA的筛选实验分为3组:WT1 dsRNA-319、阴性对照组和空白细胞组;观察转染效率的时间点为转染后48、72、96 h.通过实时定量PCR(qRT-PCR)和Westem Blotting筛选作用效果最明显的siRNA和dsRNA.使用单因素方差分析进行统计学分析.结果 成功构建WT1siRNA-516、WT1 siRNA-803和WT1 siRNA-1029共3个siRNA,并转染到MDA-MB-231细胞中,转染效率达90%以上.上述3个WT1 siRNA均能够抑制WT1 mRNA和蛋白的表达,以转染后48 h WT1 siRNA-1029的效果最为显著[WT1 siRNA-1029组WT1 mRNA表达水平与空白细胞组相比显著降低(0.49±0.02比1.00±0.08,P=0.00),其蛋白表达水平也明显降低].成功将WT1 dsRNA-319转染到MCF-7细胞中,转染效率达90%以上.50 μmol/L的WT1 dsRNA-319转染后96 h,MCF-7细胞的WT1过表达最为显著[WT1 dsRNA-319组的WT1 mRNA表达水平与空白细胞组相比显著升高(319.06±14.84比1.00±0.07,P=0.00),其蛋白表达水平也明显升高].结论 成功建立低表达WT1的MDA-MB-231细胞和过表达WT1的MCF-7细胞模型,为后续进一步研究WT1在乳腺癌中的生物学行为奠定了基础. 相似文献
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2019年12月以来,湖北省武汉市陆续发现了多例新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎)患者。随着疫情的蔓延,国内各省、自治区、直辖市、新疆生产建设兵团及境外也相继发现了此类病例。该病毒潜伏期长,传染性强。2020年1月20日,中华人民共和国国家卫生健康委员会将新冠肺炎纳入《中华人民共和国传染病防治法》规定的乙类传染病,并采取甲类传染病的预防、控制措施[1]。截止2020年2月5日24时,全国累计确诊病例28018例,累计死亡病例563例,疑似病例24702例[2]。 相似文献
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乳腺癌患者保留乳房切除术后放射治疗能降低乳腺癌的复发和死亡,但这可能只对某些特定的乳腺癌患者有效。 相似文献
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Sibylle Loibl等在2012年13卷9期《Lancet Oncology》在线发表题为《Treatment of breast cancer during pregnancy:an observational study》的论著,就妊娠期乳腺癌患者接受化疗的安全性、可行性和治疗效果进行了报道。 相似文献
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目的 探讨乳腺癌患者外周血中循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)变化情况与新辅助化疗(neoadjuvant or primary chemotherapy,NCT)疗效的关系.方法 抽取70例乳腺癌患者NCT前后健侧上肢静脉血5mL,利用密度梯度离心法富集血标本中单个核细胞,通过荧光定量RT-PCR技术检测所获得单个核细胞中细胞角蛋白-19(cytokeratin-19,CK-19)阳性的CTC数目.结果 NCT前外周血CTC检出率为24.29% (17/70),与患者年龄(P =0.008)及HER-2(P =0.022)表达情况有关.根据NCT前后CTC检测情况,将患者分为阳性-阳性、阳性-阴性、阴性-阳性及阴性-阴性4组,以RECIST标准评估NCT疗效时,4组有效率依次为66.67% (2/3)、78.57% (11/14)、0(0/4)和71.43% (35/49),差异具有统计学意义(P=0.023);以Miller-Payne标准评估NCT疗效时,4组有效率依次为66.67%(2/3)、71.43% (10/14)、0(0/4)和69.39% (34/49),差异具有统计学意义(P=0.043).结论 NCT前后CTC的变化情况与疗效有一定关系,CTC可作为评估NCT疗效的潜在预测指标. 相似文献
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目的观察抑制肿瘤细胞骨保护素(0steoprotegerin,OPG)表达对乳腺癌MDA~MB-231细胞株致骨转移的影响。方法32只4~6周龄雌性裸鼠被随机分为A、B、C、D4组,每组8只,A、C组的每只裸鼠按分组分别以5×10。个MDA—MB-231细胞注射入左心室(A组)或左胫骨骨髓腔(C组)。B、D组的每只裸鼠按分组分别以5×10。个MDA—MB-231i细胞(OPG表达抑制)注射人左心室(B组)或左胫骨骨髓腔(D组),42d后行病理检查,比较A、B组骨转移发生率和骨转移灶数量,以及C、D组的骨肿瘤体积。定量资料的比较采用t检验或秩和检验,定性资料比较采用Fisher确切概率检验。结果A组有6只发生骨转移,全组共检出不连续性骨转移灶23处;B组有3只发生骨转移,全组共检出不连续性骨转移灶8处。A组的骨转移发生率和转移灶数量虽高于B组,但两者差异并无统计学意义(P〉0.05)。C组肿瘤平均体积为(66.29±41.01)mm3,D组肿瘤平均体积为(23.70±16.14)mm3,C组骨肿瘤体积大于D组,两组间差异有统计学意义(P=0.02)。结论乳腺癌细胞致骨转移能力与其OPG表达水平密切相关,抑制OPG表达可以降低乳腺癌细胞致骨转移的能力。 相似文献
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