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目的构建重组耻垢分枝杆菌MS_Csm4,研究Csm4蛋白在耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis, MS)中表达影响胞内存活的机制。方法PCR扩增Csm4基因,构建重组pMV261-Csm4穿梭表达质粒,将重组质粒和空白质粒电穿孔进MS生成MS_Csm4和MS_V重组菌,经Western blot对重组菌Csm4蛋白表达进行检测。体外培养观察MS_Csm4和MS_V生长曲线以及检测活性氮、活性氧环境下的菌落数(CFU)变化。进一步,MS_Csm4和MS_V重组菌感染人源巨噬细胞THP-1,计数CFU反映胞内存活,实时荧光定量PCR检测诱导性一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS) 表达。硝酸还原酶法NO试剂盒检测一氧化氮(nitric oxide, NO)释放指标。结果Csm4蛋白在MS_Csm4中成功表达,且其表达不影响MS_Csm4的生长情况;MS_Csm4在体外活性氮、氧环境中CFU计数下降,与MS_V相比,差异有统计学意义(PCsm4作用于THP-1细胞后诱导iNOS表达上调。促进NO的释放以及减少胞内生存,与MS_V相比,差异有统计学意义(PCsm4不能耐受体外活性氮、氧压力环境,诱导宿主细胞iNOS表达上调,促进NO释放,从而影响其胞内生存能力。 相似文献
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目的探讨体外冲击碎石术(ESWL)治疗肾结石前留置双J管的临床适应证及其必要性。方法按病例纳入标准将160例肾结石患者随机分成两组,行体外冲击波碎石术,A组(80例)治疗前留置双J管,B组(80例)治疗前未留置双J管,术后随访1~3月,比较两组之间的结石清除率及其并发症。结果 A组中9人、B组中6人有〉5mm的结石碎片残留,需二期碎石治疗;3月后结石清除率分别为A组88%,B组91%。术后1~2天两组间肋腹部疼痛,恶心呕吐,短暂性血尿、镇痛剂的使用例数没有显著性差异,随访3月均未出现输尿管狭窄并发症。结论对于直径在1~2cm内的肾结石,ESWL治疗前留置双J管并不利于结石的排出,因此不需要常规术前留置双J管。 相似文献
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20 0 2年 8月 -2 0 0 3年 1 0月 ,笔者行经尿道前列腺气化电切术 (TUVP)治疗前列腺增生症 (BPH) 3 1例 ,效果满意 ,现报告如下。1 资料与方法1 .1 病例选择本组 3 1例 ,年龄 56-87岁 ,平均 74岁 ,均有排尿困难和 (或 )尿潴留病史。病程 8个月 -2 1年 ,平均 5年。术前国际前列腺症状评分(IPSS)平均 2 1 .5分 ,最大尿流率 (MFR) 4~8ml/s,平均 6ml/s,前列腺重量评测公式为 :上下径×前后径×左右径× 0 .52× 1 .0 5。本组前列腺重量 3 5~ 1 2 0 g ,平均 62 g。残余尿 54~3 50ml,平均 1 1 5ml。有尿潴留病史至少 1次者2 3例 ,合并高… 相似文献
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目的:探讨不同浓度的抗甲状腺球蛋白抗体(TgAb)对甲状腺球蛋白(Tg)测量值的干扰。方法通过混合Tg和TgAb标准品,混合患者的血清高Tg低TgAb和高TgAb低Tg产生实验样本,用放射免疫法测量Tg。比较混合前后Tg浓度值。结果Ⅰ组试验样本的变异系数为(4.21±3.51)%(0~14.82)(r=0.998);Ⅱ组试验样本的变异系数为(2.83±2.23)%(0.87~11.21)(r=0.999);Ⅰ组样本中,增加TgAb浓度,Tg的测量值呈比例下降,呈明显的直线负相关趋势(P均<0.01);Ⅱ组样本中,随着TgAb浓度增高,Tg的测量值呈比例下降,呈明显的直线负相关趋势(P均<0.05)。结论血清TgAb浓度过高,Tg的测定值显著会低于实际Tg浓度值,且TgAb的浓度越高,对Tg分析产生的干扰越大。所以临床工作中,分析血清Tg测定值,需要结合血清TgAb测定值。 相似文献
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我院自 1 999年 1月至 2 0 0 1年 4月采用膀胱镜置双J管治疗输尿管狭窄患者 5例 ,取得了良好的临床效果 ,现报告如下。1 临床资料1 .1 一般资料本组 5例 ,男 4例 ,女 1例 ,年龄 2 5-50岁。 5例共有 6侧输尿管狭窄 ,其中右侧 3例 ,左侧 1例 ,双侧 1例。肾输尿管连接部狭窄 2例 ,盆腔及后腹膜肿瘤压迫 2例 ,输尿管弯曲 1例。3例有尿频尿急或脓尿等尿路感染症状。5例均有肾功能受损 ,B超诊断均有肾积水后来院治疗。术前行常规KUB +IVU和尿常规检查。1 .2 治疗方法采用江苏省沙州工学院生产的双J导管 ,根据KUB所示第二腰椎到耻骨… 相似文献
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肩手综合征是中风后突然出现的手肿胀、疼痛的继发性并发症,其发生率约占偏瘫患者的12,5%,常在患中风后1~3个月发生,如果不及时予以治疗,将导致永久性手及手指的畸形,影响手的功能,不可逆转。笔者从2001年至今共治疗肩手综合征患者38例,效果良好,现报道如下。 相似文献
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携带人NIS基因的重组腺病毒的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
利用RT-PCR技术从Graves甲亢病人的甲状腺组织中扩增得到甲状腺钠/碘同向转运体(NIS)可编码区片段,并克隆到T载体,测序后亚克隆到腺病毒载体穿梭质粒pAdTrack-CMV上,再与含有骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183同源重组,经293细胞包装并扩增得到重组腺病毒AdNIS。结果显示重组腺病毒质粒经PmeI酶切鉴定,电泳中出现了诊断性片段;感染的293细胞出现了明显的细胞病变效应;PCR产物电泳证实了重组病毒的存在。病毒滴度为2.5~3×109efu/ml。表明成功构建了携带人NIS基因的重组腺病毒,这为基因转移NIS介导131I治疗非甲状腺肿瘤提供实验研究基础。 相似文献