小儿支气管哮喘的T淋巴细胞亚群测定

支气管哮喘(下称支喘)病人的T淋巴细胞亚群的测定,国外学者已有不少报道,国内也已开展这项工作。为了了解本地区支喘患儿的T淋巴细胞亚群的状况,以探讨其在支喘的发病机制中的作用,本文采用卫生部武汉生物制品研究所生产的抗人淋巴细胞及其亚群的单克隆抗体,测定支喘发作期患儿的     

人脐血T、B淋巴细胞和NK细胞的免疫学表达特性

目的 探讨人脐血T、B淋巴细胞和NK细胞，以及T／NK细胞杀伤性抑制性受体（KIR）表达的免疫学特性及其意义。方法 应用流式细胞仪检测26例正常新生儿脐血的T、B淋巴细胞和NK细胞抗原标记，包括CD45RA、CD45RO、CD69、CD25、CD40L、CD40、CD10、CD20和CD16等抗原的表达，以及脐血T／NK细胞上KIR分子（CD158a和CD158b抗原）的表达，并与正常儿童外周血比较。结果 脐血T淋巴细胞中CD45RA^ 细胞表达高于外周血（P＜0．01），CD45RO^ 则明显低于外周血（P＜0．01）；脐血T细胞CD69表达极低；CD25在CD8^ 细胞亚群中几乎不表达；CD40L在脐血T细胞中表达低于外周血（P＜0．05）。脐血B淋巴细胞中不成熟亚群CD10^ ／CD19^ 比例增高，成熟B细胞表型CD19、CD20、CD40等抗原均明显高于正常外周血（P＜0．01）。脐血中T淋巴细胞和NK细胞均存在KIR分子表达；脐血和外周血中T淋巴细胞CD158分子表达低于NK细胞（P＜0．01），脐血T淋巴细胞亚群中CD158分子表达低于正常外周血；CD158几乎不表达于CD4^ T细胞，主要表达于CD8^ T细胞，且以CD158a^ 为主；脐血中NK细胞CD158分子表达高于T淋巴细胞（P＜0．05），但明显低于外周血NK细胞KIR的表达（P＜0．01）。结论 脐血T淋巴细胞包括原始和早期T细胞以及T细胞受体表达障碍，导致脐血T淋巴细胞免疫功能不成熟，可能是脐血移植（UCBT）后移植物抗宿主病（GVHD）发生率低和程度轻的重要原因之一。脐血B淋巴细胞免疫应答障碍可能缘于T淋巴细胞表型或功能的障碍。脐血T／NK细胞KIR的表达特性提示，KIR可能与UCBT中GVHD和移植物抗白血病（GVL）效应有关。     

左旋门冬酰胺酶治疗儿童恶性肿瘤的毒副作用及其防治研究

目的　探讨左旋门冬酰胺酶 (L ASP)化疗的毒副作用及可行的防治方法。方法　回顾分析 139个疗程L ASP的使用 ,比较曾使用预防某种毒副作用措施的疗程及未使用预防该毒副作用措施的疗程的毒副作用发生率 ,分析防治措施的有效性。结果　 139个疗程中 4 4个疗程产生如下毒副作用 :凝血障碍、过敏、急性胰腺炎、消化道反应、糖尿病、低蛋白血症、高脂血症。 5例患儿因L ASP毒副作用死亡。给予预防措施疗程和无预防措施疗程毒副作用发生率的差异有显著性意义。结论　积极预防可减少L ASP毒副作用 ,保证化疗顺利进行 ;及时诊断和处理L ASP毒副作用可减少严重合并症的发生 ,提高患儿的生存质量     

人AGM区及胎肝基质细胞促进小鼠胚胎干细胞向造血干细胞分化和体内造血重建

目的: 探讨小鼠胚胎干细胞(ESCs)经人主动脉-性腺-中肾(AGM)区及胎肝(FL)基质细胞程序诱导后,向造血干细胞(HSCs)分化的效率及其造血功能。方法: 将E14 ESCs诱导为拟胚体(EB),并在人AGM区及FL基质细胞饲养层上进一步诱导分化,培养6 d后收集细胞检测Sca-1⁺c-Kit⁺细胞含量、分析造血细胞集落形成能力及致瘤性。再将不同诱导阶段的EB来源细胞移植经致死量 γ射线辐照的BALB/c雌鼠,观察生存率、植入状况和造血重建。结果: (1)EB来源细胞经人AGM区及FL基质细胞程序诱导后Sca-1⁺c-Kit⁺细胞含量为(21.96±2.54)%,造血集落总数为(520±52)/10⁵cells,明显优于诱导前及人AGM区基质细胞初步诱导者(P＜0.05)。(2)NOD-SCID小鼠接种经人AGM区及FL基质细胞诱导的ESCs未见畸胎瘤。(3)BALB/c雌鼠移植经人AGM区及FL基质细胞诱导的EB来源细胞后生存率77.8%,14 d外周血细胞计数明显改善,存活受鼠均检测到供体来源sry基因,而移植人AGM区基质细胞诱导的EB细胞者15 d内全部死亡。结论: 人AGM区及FL基质细胞能促进小鼠ESCs定向分化为HSCs,有效重建体内造血功能。     

从胚胎干细胞诱导发育为浆细胞的体外实验研究

目的：建立胚胎干细胞体外定向诱导分化为浆细胞的体系,为研究造血发生的基因调控及Ｂ淋巴细胞发育过程奠定基础。方法：分阶段培养,第一、二阶段使用半固体培养,分组加入细胞因子、２－巯基乙醇和胚胎细胞条件培养液,用流式细胞仪、免疫组化及Ｗｒｉｇｈｔ’ｓ染色鉴定细胞,第三阶段移入骨髓基质细胞滋养层。结果：第一阶段：加入ＳＣＦ、ＴＰＯ、ＩＬ－６、ＩＬ－３、Ｅｐｏ和Ｇ－ＣＳＦ,４ｄ后细胞大片坏死,仅加入２－巯基     

异基因造血干细胞移植CD94分子在T细胞高表达的意义初探

目的检测CD94分子在T细胞表达的水平,同时探讨在异基因造血干细胞移植(HSCT)中发生移植物抗宿主病(GVHD)患者CD94分子在T细胞表达的意义。方法HSCT治疗高危白血病和遗传性溶血性贫血成功植入的儿童患者,其中同胞脐血移植(UCBT)10例,非血缘相关UCBT1例,异基因外周血造血干细胞移植(alloPBSCT)5例,在移植前后发生GVHD时采用流式细胞仪检测和比较外周血中CD94的表达,并与正常外周血水平比较。结果CD94主要表达于CD3+CD8+T细胞,正常情况下外周血和脐血T细胞表达率低于10%,其中CD4+细胞几乎不表达,低于2%。但在UCBT或alloPBSCT后CD94在CD4+T细胞和CD8+T细胞均明显增高。3例UCBT无GVHD,其余均发生了ⅠⅣ0急性GVHD。急性GVHD发生时CD4+CD94+和CD8+CD94+T细胞表达明显升高。结论异基因造血干细胞移植后发生GVHD时,T细胞高表达CD94,可能是在同种抗原的刺激下机体自我保护的结果。     

CD158分子表达在他克莫司、霉酚酸酯联合甲基强的松龙治疗顽固性慢性移植物抗宿主病中的追踪观察

目的：探讨慢性移植物抗宿主病（graft-versus-host disease，GVHD）症状期及缓解期CD158分子的表达变化。方法： 观察异基因造血干细胞移植后发生广泛性慢性GVHD的儿童患者，应用他克莫司（FK506），霉酚酸酯（MMF）和甲基强的松龙（MP）联合治疗的毒副作用和疗效；同时采用流式细胞仪检测外周血中CD158在NK细胞和T细胞的表达，比较治疗前后CD158的表达。结果： 移植前、慢性GVHD症状期和治疗后CD4+CD158a+和CD4+CD158b+表达水平极其低下，但无明显差异。5例急性GVHD患者CD3+CD158b+和CD3+CD8+CD158b+的表达水平分别为4.97%±2.36%和4.58%±2.90%，与移植前相比差异显著(P＜0.05)，CD3-CD16+CD158b+的表达也明显高于移植前(P＜0.05)。6例慢性GVHD患者症状期，CD3+CD158b+和CD3+CD8+CD158b+的表达均高于移植前的水平(P＜0.05)；在缓解期，CD3+CD158b+、CD3+CD8+CD158b+和CD3-CD16+CD158b+的表达水平逐渐下降，与慢性GVHD症状期相比差异显著(P＜0.05)，与移植前无明显差异。移植后6-12个月CD3-CD16+CD158b+ 表达水平与移植前无明显差异。结论： CD158b分子在T细胞表达水平增加与慢性GVHD的发生有关，FK506，MMF和MP联合有效治疗慢性GVHD的作用机制之一可能是下调T细胞CD158b+的表达，从而抑制cGVHD。