干细胞转录因子SOX2、OCT4在不同分化程度胃癌组织中的表达及其临床意义

背景与目的：肿瘤组织的分化程度是决定胃癌预后的重要因素,本研究检测胃癌组织中性别决定相关基因簇2(sex determining region Y-box 2,SOX2)、八聚体结合蛋白-4(octamer binding factor 4, OCT4)的表达,探讨SOX2、OCT4的表达与胃癌患者临床病理因素及预后的关系及意义。方法：通过实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)、蛋白[质]印迹法(Western blot)和免疫组化检测了60例分化程度不同的胃癌组织与正常黏膜组织中SOX2和OCT4的mRNA及蛋白的表达量,并分析SOX2和OCT4基因的表达水平与患者临床病理参数的关系。结果：qRT-PCR、Western blot检测显示,高分化胃癌组织SOX2 mRNA和蛋白的相对表达量与正常胃黏膜组织比较差异无统计学意义(t=0.1033,P>0.05;t=0.116,P>0.05),但显著高于中分化胃癌组织(t=12.48,P<0.05;t=22.78,P<0.05)和低分化胃癌组织(t=17.56,P<0.05;t=30.00,P<0.05),差异有统计学意义。与SOX2相反,高分化胃癌组织OCT4 mRNA的相对表达量与正常胃黏膜组织比较差异无统计学意义(t=2.436,P>0.05;t=1.064,P>0.05),但显著低于中分化胃癌组织(t=13.23,P<0.05;t=25.56,P<0.05)和低分化胃癌组织(t=12.10,P<0.05;t=69.48,P<0.05),差异有统计学意义。免疫组化显示,高分化胃癌组织中SOX2的阳性表达率(10/21)高于中分化胃癌组织(7/20)和低分化胃癌组织(2/19,P<0.05),高分化胃癌组织中OCT4的阳性表达率(2/21)低于中分化胃癌组织(6/20)和低分化胃癌组织(12/19,P<0.05),与临床病理参数相比较,胃癌中SOX2和OCT4蛋白的表达与患者的性别、年龄无关,差异无统计学意义(P>0.05)。与病理分期、浸润程度、淋巴结转移相关(P<0.05)。结论：SOX2基因的低表达水平和OCT4的高表达水平促进胃癌的发生、发展和侵袭,有望成为胃癌诊断、治疗和预后判断的一个指标。     

类风湿性关节炎肩关节病变的影像学测量

[目的]调查类风湿性关节炎( rheumatoid arthritis,RA)患者的肩关节功能及影像学改变,了解该类人群中肩关节病变现状,分析肩关节破坏的相关因素,为RA肩部疾病的预防和治疗提供临床依据.[方法]随机选择RA患者,记录发病年龄、病程,采用ASES肩关节评分量表评测肩关节功能;拍摄肩关节正位X线片,进行Larson分期,测量肩关节内侧距离(MD)、肩关节上移指数(UI)、肩关节内移指数(MI)、大结节关节面间距(GA),分析Larson分期与上述数据间的相关性.[结果]2010年3月～2010年11月,60人入选本研究,平均年龄(51.34±14.14)岁,男6人,女54人.ASES评分(72.69±24.76)分;完成116肩摄X线片,无明显骨性破坏的肩关节(Larson 0 ～1期)MD为(7.55±0.55) cm,UI为1.38±0.10,MI为1.04±0.29,GA为(0.60±0.22) cm.Larson 分期与ASES评分呈显著负相关(r=-0.028 3,P=0.001),与反映肩关节内移的MD、MI呈显著负相关(r=-0.177,P=0.029和r=-0.438,P＜0.001);与UI无显著相关性(r=-0.062,P=0.253);与GA呈显著负相关(r=-0.369,P＜0.001).与病程和年龄呈显著正相关(r=0.534和r=0.390,P＜0.001),与患病年龄无显著相关性(r =0.091,P=0.165).[结论]肩关节受累在RA患者中广泛存在,其受累程度随着病程增加而增加,随着破坏程度的加剧肩关节旋转中心发生内移,但是尚不明确旋转中心上移与骨性破坏是否同步发展.     

密蒙花方对缺氧状态下脐静脉血管内皮细胞VEGF-VEGFR信号转导通路的影响

目的从血管内皮生长因子-血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor,VEGF-VEGFR)信号转导机制方面深入探讨密蒙花方抑制缺氧状态下人血管内皮细胞增殖的作用机制。方法采用人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vasculal endothelial cell,HUVEC)进行体外培养,利用二氯化钴(CoCl2)模拟缺氧状态,同时分别将10g·L-1、20g·L-1、40g·L-1密蒙花方水提液作用于缺氧状态下的HUVEC24h,采用水溶性四氮唑-8(WST-8)法检测密蒙花方对缺氧状态下HUVEC增殖的影响,采用Westernblot法检测密蒙花方对缺氧状态下HUVEC内血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、fms样酪氨酸激酶受体1(fms-like tyrosine kinase-1,Flt-1)、胎肝激酶-1/激酶插入区受体(fetal liver kinase-1/kinase insert domain-containing receptor,Flk-1/KDR)蛋白磷酸化水平的影响。采用免疫组织化学法检测HUVEC内细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)蛋白表达的情况。结果 WST-8法结果显示:缺氧组吸光度值为1.112±0.060,各密蒙花方组吸光度值分别为0.860±0.050、0.567±0.072、0.263±0.057,表明密蒙花方可有效抑制缺氧状态下HUVEC增殖(均为P<0.01)。Western blot结果显示:缺氧组HUVEC内VEGF、Flk-1/KDR蛋白磷酸化水平分别为1.922±0.048、1.341±0.054,较正常组升高,Flt-1蛋白磷酸化水平为1.265±0.065,较正常组降低,密蒙花方可使缺氧状态下HUVEC内VEGF、Flk-1/KDR蛋白磷酸化水平降低,Flt-1蛋白磷酸化水平升高,差异均有显著统计学意义(均为P<0.01)。免疫组织化学显示:正常组ICAM-1吸光度值161.416±4.905,缺氧组ICAM-1吸光度值为213.464±10.282,各密蒙花组ICAM-1吸光度值分别为186.841±9.039、171.862±8.202、165.053±6.088。密蒙花方可使缺氧状态下HUVEC内ICAM-1蛋白表达减少。结论下调细胞内VEGF、Flk-1/KDR蛋白磷酸化水平,上调细胞内Flt-1蛋白磷酸化水平,干预细胞内VEGF-VEGFR信号转导通路,是密蒙花方抑制缺氧状态下HUVEC增殖的作用机制之一。     

内毒素多克隆抗体制备及其在ELISA中应用

目的 制备抗大肠杆菌精制内毒素的兔多克隆抗体并建立检测内毒素的间接竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)方法.方法 大肠杆菌精制内毒素作为免疫原,采用逐渐加强免疫剂量的方法免疫家兔,制备抗体,将抗体用于ELISA检测精制内毒素;并与复合型内毒素进行反应.结果 随着免疫次数增加,抗血清效价逐渐提高,最后一次免疫后血清效价达到1∶6 400;在包被抗原浓度100 μg/mL和兔多抗稀释比1∶500最佳使用条件下建立间接竞争性ELISA,内毒素浓度与吸光度(A)值成反比例关系,线性回归方程为:y=-0.1 ln(x)+0.765,检测最低内毒素浓度为50ng/mL;兔血清与复合型内毒素反应效价为1∶16000.结论 成功制备出抗精制内毒素兔多克隆抗体,且能与复合型内毒素反应.     

动静脉内瘘术围术期护理

目的探讨动静脉内瘘手术围术期护理措施及效果。方法回顾分析我院肾脏病诊断治疗中心2012年1月至2013年12月收治的63例行动静脉内瘘吻合术患者临床资料,就护理措施及评分展开分析。结果研究入选的63例患者护理满意60例,一般满意2例,满意度为98．4％。结论在行动静脉内瘘术的围术期展开护理工作,可促进内瘘成熟和减少动静脉内瘘并发症。     

小骨窗显微手术治疗基底节区高血压性脑出血的手术时机探讨

目的探讨小骨窗显微手术治疗基底节区高血压性脑出血手术时间与预后的关系,寻求其最佳手术治疗时间窗。方法 100例高血压脑出血患者随机抽签筛选出60例作为研究对象,并将其随机分为三组,每组20例。分别为超早期手术组(7 h),早期手术组(7~12 h内),延期手术组(12 h以后)。三组均实施小骨窗显微手术治疗。观察三组患者住院期间的再出血率、病死率及术后6个月日常生活自理能力。结果 1再出血率:超早期、早期和延期手术组再出血率分别为15.0%、35.0%和80.0%,延期手术组显著高于其他两组(P0.001,P0.01)。2病死率:超早期、早期和延期手术组再出血率分别为15.0%、40.0%和60.0%,延期手术组显著高于超早期手术组(P0.01)。3术后6个月日常生活能力:越早手术,生活质量越好,但三组间未达统计学差异。结论出血后7 h内手术是小骨窗显微手术治疗基底节区高血压性脑出血的最佳手术时间窗。     

LCP钢板治疗肱骨外科颈骨折分析

目的探讨采用LCP钢板治疗肱骨外科颈骨折的临床效果。方法选取在2006年5月-2011年11月间到我院诊治的69例肱骨外科颈骨折患者,将69例患者随机分为两组,观察组35例,对照组34例,观察组患者采用LCP钢板进行治疗,对照组患者采用常规方法进行治疗,对两组患者的治疗过程进行跟踪观察,并将所得实验数据记录。结果观察组35例患者中,治愈18例,有效14例,无效3例,治疗有效率为91.4%,对照组34例患者中,治愈13例,有效11例,无效10例,治疗有效率为70.6%。结论在治疗肱骨外科颈骨折疾病的过程中,采用LCP钢板治疗的效果较为显著,对于患者的帮助较大,值得在临床上推广应用。     

酒精性与非酒精性脂肪肝的临床特征鉴别探讨

目的探讨酒精性与非酒精性脂肪肝的临床特征及其鉴别诊断方法。方法随机选择非酒精性、酒精性脂肪肝各20例患者进行临床对比研究。结果酒精性脂肪肝患者血浆白蛋白(A)含量、A／G(血浆白球蛋白比值)降低，血清γ-谷氨酰转移酶(CGT)、血清门冬氨酸氨基转移酶(AST)／丙氨酸氨基转移酶(ALT)比值升高。结论酒精性脂肪肝患者上述临床特征对与非酒精性脂肪肝鉴别诊断有一定意义。     

吞咽引起心律失常(附2例报告)

例1:男,29岁。因吞咽时有心跳停顿感、夜间阵发性心慌4年,于1992年4月21日住院。上述情况多于生气、睡眠不好或感冒后明显,且多伴恶心呕吐、上腹不适等症状,发作间歇期无任何不适。其父、兄分别于30岁、29岁猝死,死因不详。查体:脉搏、血压正常,心、肺(一),肝脾未触及。化验血、尿、大便常规及肝功、血钾、钠、氯均正常。心脏B超(一)。心电图示早期复极综合征表现。动态心电图示频发房性早搏(房早),阵发性房性心动过速(阵发房速),偶伴室内差传,偶发室性早搏(室早),均发生于进食和     

不同频率的周期性压力对兔软骨细胞影响的生物学研究

目的：通过观察不同频率的周期性压力对兔软骨细胞增殖及整合素α1β1分泌量的影响,研究不同频率的力学刺激对软骨细胞产生的生物学影响。方法：取兔四肢关节的软骨细胞,在体外进行培养。表型稳定的第3代细胞进行研究,设置常压培养A组和周期性压力B组,并将B组在压力为172kPa按照加压频率分组,加压频率B1组为0．2Hz,B两组0．5Hz ,B3组1Hz,B4组2Hz,B5组5Hz。 B组每天干预2h,连续干预3d。检测A和B组软骨细胞增殖情况和整合素α1β1的含量。结果：OD值A组为1．08±0．13,B1组为1．19±0．11,B两组为1．23±0．08,B3组为1．35±0．06,B4组为1．45±0．09,B5组为1．37±0．12。加压各组与对照组比较OD值升高,差异有统计学意义。 B组各组间差异有统计学意义,峰值出现在B4组。 A组整合素α1β1水平为3．02±0．26pg/mL,B1组为3．28±0．19pg/mL, B两组为3．43±0．11pg/mL,B3组为3．77±0．24pg/mL,B4组为4．01±00．9 pg/mL,B5组为3．94±0．13pg/mL。加压各组与对照组比较整合素α1β1含量均有升高,差异有统计学意义差异（ P＜0．05）。 B组各组间整合素差异有统计学意义,峰值出现在B4组。结论：相同大小（172kPa）不同频率的周期性压力刺激兔软骨细胞,均能促进软骨细胞增殖和增加整合素含量的作用,但并非频率越高作用越强。本实验中以2Hz频率的周期性压力作用最强。