两种GAD65片段与IL-4基因共表达DNA疫苗的构建与鉴定

目的构建两种谷氨酸脱羧酶（GAD）65片段与白细胞介素4（IL-4）基因共表达DNA疫苗,并在体外COS-7细胞中对表达产物进行检测。方法从GAD65质粒中扩增出GAD190～315和GAD490～570两个片段的cDNA,Overlap法分别与hIL-2信号肽cDNA基因拼接,将拼接后的融合基因与IL-4基因依次克隆入双启动子真核表达载体pBudCE4.1中。重组子经酶切和测序鉴定后,脂质体转染COS-7细胞,Western blot法检测融合基因的表达,ELISA法检测IL-4表达。结果核酸序列测定表明克隆的融合基因和IL-4基因序列与报告序列一致,开放阅读框正确,Western blot和ELISA显示在COS-7细胞中均可检测两个目的基因的表达。结论两种GAD65片段与IL-4共表达DNA疫苗均成功构建,为1型糖尿病的预防研究提供了实验基础。     

第十八届湘雅国际糖尿病免疫学论坛会议纪要

<正>2023年4月21～23日,国家代谢性疾病临床医学研究中心、中南大学糖尿病中心及《糖尿病》天地杂志社于湖南长沙共同主办了“第十八届湘雅国际糖尿病免疫学论坛”。本届论坛由国家代谢性疾病临床医学研究中心主任、糖尿病免疫学教育部重点实验室主任周智广教授和中南大学代谢综合征研究中心主任刘峰教授共同担任此次大会主席。     

尼尔雌醇加孕激素治疗绝经后骨质疏松症的研究

目的　观察小剂量雌孕激素复方制剂 (每片含尼尔雌醇 0 .5mg ,左炔诺酮 0 .15mg ,每周口服 1片 )防治绝经后骨质疏松症的一年临床疗效。方法　随机对照 (自身对照及组间对照 )分组 ,双盲比较观察绝经后骨质疏松患者 119例用药与 72例用安慰剂 1年对绝经后骨质疏松症的疗效。结果　小剂量雌、孕激素制剂可阻止骨质疏松的发展 (P <0 .0 5 ) ,同时用药者的肝、肾功能 ,乳腺红外线扫描 ,子宫内膜厚度和子宫大小B超 ,阴道脱落细胞学形态等均与对照组差异无显著性 ,亦无阴道流血发生。结论　小剂量雌孕激素替代疗法具有疗效确切、副作用少、服用方便等优点 ,可作为绝经后骨质疏松症的常规治疗方法     

LADA患者血清胰岛素原水平及其意义

目的 探讨成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA)患者血清胰岛素原(PI)的分泌特征及其意义.方法 36例LADA患者、37例2型糖尿病患者和43名正常对照者均行口服糖耐量试验(OGTT),检测空腹和2 h血糖、胰岛素原(FPI和PPI)和C肽(FCP和PCP)水平,放射配体法测定谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab).结果 (1)LADA组FPI和PPI均低于2型糖尿病组(均P<0.05),但均较对照组升高(P<0.05或P<0.01);FPI/FCP和PPI/PCP(%)较2型糖尿病和正常对照均增高(P<0.05或P<0.01);(2)LADA-1型(GAD-Ab≥0.3)的PI低于LADA-2型(0.05≤GAD-Ab<0.3)(P<0.05或P<0.01),而PI/C肽均高于LADA-2型(均P<0.05);而LADA-2型与2型糖尿病差异无统计学意义;(3)LADA患者的GAD-Ab滴度与FPI和PPI呈显著负相关(r为-0.236和-0.268,均P<0.05),与PPI/PCP呈显著正相关(r=0.254,P=0.030);(4)FPI/FCP"不成比例"增高者占LADA、2型糖尿病和正常组的百分比分别为77.8%、62.2%和2.3%,PPI/PCP增高者为83.3%、51.4%和2.3%.结论 LADA患者和2型糖尿病患者一样,亦存在高PI血症,且"不成比例"PI异常增多在LADA更为显著,可能与免疫凶素有关.     

单侧双通道脊柱内镜髓核摘除术治疗腰椎间盘突出症

目的 探讨单侧双通道脊柱内镜髓核摘除术治疗腰椎间盘突出症的疗效。方法 采用单侧双通道脊柱内镜下髓核摘除术治疗37例腰椎间盘突出症患者。记录手术时间、切口长度、血红蛋白、SF-36生活质量评分、疼痛VAS评分、ODI,根据椎间盘高度指数(DHI)、矢状位椎体移动角度(sROM)评价椎体稳定性情况。结果 患者均获得随访,时间6～15个月。手术时间90～115(105.00±16.32) min。切口长度：观察通道9～12(10.30±2.20) mm,工作通道11～14(12.10±1.20) mm。血红蛋白术后7 d与术前比较差异无统计学意义(P>0.05)。SF-36生活质量评分术后7 d较术前改善(P<0.05)。疼痛VAS评分术后1 d、1个月、3个月及末次随访均较术前降低(P<0.05);ODI术后1、3个月及末次随访均较术前降低(P<0.05);上述2项指标均随着时间推移逐渐降低(P<0.05)。DHI及sROM术后1个月、3个月、末次随访与术前比较差异均无统计学意义(P>0.05),术后各时间点比较差异均无统计学意义(P>0.05)。...     

CTLA-4基因外显子1 A/G49多态性与特发性1型糖尿病的相关性研究

【目的】探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4,CT—LA-4）基因外显子1A／G^49多态性与中国汉族人特发性1型糖尿病（T1DM）的关系。【方法】采用多聚酶链式反应限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术检测179例特发性T1DM患者和290例健康对照者CTLA-4基因外显子1A／G^49基因型,分析此位点多态性与特发性T1DM的相关性。【结果】特发性T1DM组等位基因G^49频率明显高于正常对照组（P〈0．01）,基因型GG明显高于正常对照组（P=0．002）,基因型AA明显低于正常对照组（P=0．004）。【结论ICTLA-4基因A／G^49多态性与特发性T1DM易感性相关。     

双能X线吸收法测定大鼠骨量的评价及去卵巢骨丢失敏？…

目的　探讨双能X线吸收法 (DXA)测量大鼠骨密度 (BMD)的精密度和准确度及大鼠去卵巢后骨丢失的敏感区域。方法　用扇形束DXA(QDR45 0 0A)重复测量 16只SD大鼠不同骨胳区域BMD的变异系数 (CV)评价精密度 ;测量 40只大鼠骨矿含量 (BMC)与骨灰重比较评价准确度 ;与假手术组比较测定大鼠去卵巢后不同骨胳区域骨丢失率的变化选择骨丢失敏感区域。结果DXA测量BMD的CV为全身 (0 .71± 0 .44 ) % ,腰椎 (0 .82± 0 .5 3) % ,股骨 (0 .5 2± 0 .2 7) % ,胫骨(0 .81± 0 .11) % ,股骨和胫骨的各亚区 (1.46± 0 .2 6 ) % ;BMC与骨灰重呈高度正相关 (r =0 .984～0 .85 5 ) ,BMC显著低于骨灰重 (P <0 .0 0 1) ;生长期大鼠去卵巢 14周与假手术组BMD比较 ,腰椎(- 7.0 3% )、股骨远端 (- 9.0 3% )和近端 (- 7.49% )及胫骨近端 (- 11.7% )BMD显著减少 ,胫骨远端BMD显著增加 (8.82 % )。结论　DXA测量大鼠骨量是精密和有效的方法 ,胫骨近端干骺端和股骨远端干骺端是大鼠去卵巢后骨丢失最敏感区域。     

不同年龄健康女性血清性激素和抗酒石酸酸性磷酸酶的变化

目的：研究女性血清性激素和抗酒石酸酸性磷酸酶（TRACP）水平随年龄的变化，为骨质疏松症的基础与临床研究提供参数。方法：测定236例23－59岁绝经前（按年龄分为3组，每组间隔10年）和91例48－71岁绝经后健康女性志愿者血清黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）、雌二醇（E2）、孕酮（P）水平及TRACP活性。结果：绝经前各年龄组比较，仅FSH水平在绝经前第3组妇女中明显升高（P＜0．05）；绝经后与绝经前组比较，FSH，LH和TRACP明显升高（P＜0．01），而雌二醇和孕酮明显降低（P＜0．01），且与TRACP呈显著负相关（r分别为－0．41和－0．37，P＜0．01）。结论：女性绝经后，雌孕激素缺乏，导致FSH，LH升高，同时骨吸收加快，血清TRACP活性增加。     

暴发性1型糖尿病的免疫学特征探讨

目的 探讨暴发性1型糖尿病患者的免疫学特征及其病因学意义.方法 筛选暴发性1型糖尿病患者20例及其年龄、性别匹配的经典1型糖尿病患者40例.采用放射配体法检测谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA2A)和锌转运蛋白8抗体(ZnT8A);酶联免疫斑点法检测GAD反应性T细胞;直接测序法检测人类白细胞相关抗原(HLA)DQ基因型.结果 本组暴发性1型糖尿病患者8/20胰岛自身抗体阳性,其中7例GADA阳性,4例ZnT8A阳性,3例为GADA与ZnT8均阳性.3例起病初期GADA阳性者,于2年及3年后复查抗体转阴各1例,另1例3年后复查抗体滴度增高(0.34～1.46).在6例暴发性1型糖尿病患者中3例有GAD反应性T细胞.暴发性1型糖尿病患者HIA-DQA1*0102-DQB1*0601和DQA1*03-DQB1*0401单体型频率较经典1型患者增高(P=0.005,P=0.035).结论 部分暴发性1型糖尿病患者存在体液或细胞免疫反应及HLA-DQ易感基因型,提示自身免疫反应可能参与暴发性1型糖尿病的发病过程.     

1型糖尿病四跨膜蛋白7自身抗体检测技术的建立与应用

目的:建立四跨膜蛋白7自身抗体（TSPAN7A）的荧光素酶免疫共沉淀检测技术（LIPS）,并评估TSPAN7A在中国1型糖尿病（T1D）人群中的应用价值。方法:将插入人全长四跨膜蛋白7 cDNA的海肾荧光素酶重组质粒转染293T细胞,获得含四跨膜蛋白7与海肾荧光素酶融合蛋白的细胞裂解液。待测血清与该细胞裂解液孵育过夜后...