促性腺激素释放激素激动剂对大鼠睾丸间质细胞annexin 5和3β-HSD的表达影响

目的：探讨阿拉瑞林（GnRHa）对大鼠睾丸间质细胞中膜联蛋白V（annexin5）和3β-羟类固醇脱氢酶（3β-HSD）的表达的影响。方法：建立体外分离、纯化和培养大鼠睾丸间质细胞原代培养技术,采用3β-HSD免疫细胞化学方法对间质细胞进行鉴定,同时用不同终浓度的GnRHa（分别为1×10^,1×10^-6,1×10^-1moL／L）作用于间质细胞24h后,通过Western Blot检测间质细胞中annexig 5和3β-HSD的表达变化情况．结果：间质细胞经GnRHa处理后,Western Blot结果显示,与对照组相比,当GnRHa终浓度为1×10^-5 moL／L时,anenxin5的表达量显著升高了69．2％（P〈0．01）,3B—HSD的表达量也升高了25．2％（P〈0．05）;当GnRHa的终浓度为1×10^-6mol／L和1×10mol／L时,anenxin5的表达量分别升高了61．5％（P〈0．05）和16．64％（P〉0．05）,3β-HSD的表达量则无显著性变化,分别升高了7．7％（P〉0．05）和2．22％（P〉0．05）．结论：GnRHa在原代培养的睾丸问质细胞中,对annexin5,3β-HSD的表达具有调节作用。     

磷脂转运蛋白在毕赤酵母中的高效表达

为深入了解磷脂转运蛋白的结构和功能，从中国人胎肝组织总RNA成功克隆了磷脂转运蛋白成熟肽基因，所得磷脂转运蛋白基因通过同源重组整合至毕酵母细胞染色体的氧化酶AOX1基因中，甲醇诱导后经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳显示诱导表达蛋白分子量约为75kDa，薄层扫描显示表达蛋白中酵母蛋白总量的28%，为大量制备重组磷脂转运蛋白奠定了基础。     

无性腺症患者合并Y染色体结构重排的临床及细胞分子遗传学分析

目的无性腺症是罕见的,其分子机制尚不清楚。文中报道1例无性腺症患者合并Y染色体结构重排。方法染色体核型分析结合荧光染色体原位杂交（FISH）和聚合酶链反应-序列标签位点（PCR—STS）以确定患者核型。对SRY和SHOX基因进行序列分析。用反转录荧光定量PCR（RT—qPCR）对位于Y染色体长臂的AZFa上USP9Y基因和U吖基因进行表达分析。结果患者核型为46,X,der（Y）（pter→q11．23：：pter→p11．31 or p11．2：）．ishder（Y）（DYZ3＋,SRY＋＋,pter＋＋,qter-）。患者Ypter→p11．31或p11．2片段重复,q11．23→qter片段缺失,没有性染色体嵌合和常染色体结构畸变。SRY和SHOX基因测序未发现突变。Y染色体上的USP9Y基因和UTY基因几乎不表达。结论文中1例无性腺症患者合并Y染色体结构重排是首次报道,Y-连锁基因几乎不表达,提示Y染色体可能失活,推测是无性腺症和矮身材的原因。     

分化抑制因子Id2和Id3在肿瘤细胞中的表达

目的 研究分化抑制因子（Id）基因家族在不同肿瘤细胞及健康人外周单个核细胞（PBMC）中的表达情况，为探讨尉基因与肿瘤生长的关系提供实验依据。方法：提取血液病患者和健康人PBMC、人Burkitt’s B淋巴瘤细胞（Daudi）、人T淋巴细胞性白血病细胞（Jurkat）、人慢性髓性白血病细胞（K562）、人组织细胞性淋巴瘤细胞（U937）、人前列腺癌细胞（PC-3）、人胃癌细胞（SGC）、人肺癌细胞（SPC），人卵巢癌细胞（COC2）的细胞总RNA，根据Id2和Id3cDNA全长序列合成两对引物，运用RT-PCR方法，对以上细胞中Id2和Id3mRNA的表达进行半定量分析。结果：不同的尉基因在不同人肿瘤细胞中的表达具有一定差异性：Id2在健康人PBMC和各类肿瘤细胞中均呈普遍表达趋势；Id3在健康人淋巴细胞中未见表达或表达水平极弱，而在不同肿瘤细胞中的表达有差异．Id3在PC-3中的表达最高，K562中最低。不同的尉基因在同种细胞中的表达的差异性也较大，Id2mRNA的表达水平显著高于Id3mRNA的表达水平。Id2、Id3mRNA在血液病患者PBMC中均有不同程度的的表达。结论：不同的纪基因在不同的肿瘤细胞中有不同的表达水平，Id3的异常表达在肿瘤细胞增殖及肿瘤的发生中可能发挥一定的作用。     

Y染色体微缺失不育患者精液细胞学观察

目的:对Y染色体AZF区域微缺失不育患者进行精液细胞学检查,从而评估其生精功能。方法:收集35例AZF缺失不育患者,年龄23~44岁,经3次以上精液常规分析证实,26例为非梗阻性无精子症,9例为严重少精子症。按照AZF缺失部位分为以下4组进行观察:AZFa+b+c区域缺失组5例,AZFb+c缺失(4例)及单独AZFb缺失(3例)组7例,AZFc缺失组23例。采集患者精液,待自然液化后离心,生理盐水洗涤2次,离心沉淀物经生理盐水稀释后涂于干净玻片上,瑞吉染色,光学显微镜下观察。对其中6例患者进行了睾丸组织病理学检查。结果:AZFa+b+c缺失组,精液细胞学检查均未见各级生精细胞,可见少量上皮细胞。其中1例经睾丸活组织病理学检查,生精小管中未见各级生精细胞,为唯支持细胞综合征,与精液细胞学检查结果一致。AZFb+c缺失及单独AZFb缺失组,精液细胞学检查其中6例细胞停滞在精母细胞阶段,2例睾丸活检见生精阻滞在初级精母细胞阶段。1例AZFb缺失的患者精液细胞学检查见初级精母细胞、次级精母细胞和精子细胞,但睾丸活检显示阻滞在精母细胞阶段。AZFc缺失组中,少精子症组(8例)患者生精细胞检查5例停滞在精母细胞阶段,见少量精子细胞,另3例未见各级生精细胞;无精子症组(15例)患者未见各级生精细胞,其中2例经睾丸活检,证实为唯支持细胞综合征。结论:精液细胞学检查对AZF缺失患者能有效评估生精功能,作为一项无创检查技术,容易被患者接受,推荐作为临床评估生精功能的一项方法。     

男性不育患者精浆转铁蛋白含量测定

人类精浆中包含着大量的由支持细胞分泌的转铁蛋白(Transferrin,Tf)。本文采用单向免疫扩散法测定了50例生育男性、56例妻子流产的男性及143例不育男性精浆Tf含量。结果表明精子密度、活动力、活动率等皆与精浆Tf含量呈正相关;正常生育男性的精浆Tf含量与不育男性有高度显著性差异(P<0.01),而与妻子流产的男性则无明显差异(P>0.05)。精浆Tf含量测定有助于评价精子质量,可以作为反映支持细胞功能的特异性指标。     

精浆NaHCO_3含量测定与生育关系的探讨

我们参照“全国临床检验操作规程”血浆HCO_3-滴定法测定生育、不育及生殖道炎症患者精浆中NaHCO_3含量,并与精子活动力、活率、精液中脓细胞,精浆果糖的关系进行分析比较, 一、检测对象1.正常生育男性:妻子妊娠22—32周的健康男性,25—35岁,平均29岁。2.不     

精核蛋白与男性不育

目的：探讨精子中精核蛋白含量与男性不育的关系。方法：从９２例不育男性和１６例正常生育男性的精子中提取精核蛋白，在醋酸－尿素聚丙烯酰胺凝胶（ａｃｉｄ－ｕｒｅａ ＰＡＧＥ，ｐＨ４．７）中电泳，经薄层扫描，测得各蛋白区带（组蛋白和精核蛋白）的相对含量，分析并计算各蛋白区带的相对比值。结果：９例病人的精核蛋白完全缺乏。２７例妻子流产男性精子畸形率升高明显（Ｐ〈０．０１）、ＨＰ１￣３／ＴＢＰ降低（Ｐ〈０．０     

三种精液检测工具的比较与评价

本文报告了用Macro精子计数板与Makler精子计数板及血细胞计数板分别就精子密度、活动精子百分率和精子运动速度进行了比较分析。统计结果表明，三种计数板在精子密度计数上有极好的一致性，Macro板和Makler板对活动精子百分率和精子运动速度的分析也无显著性差异。作者认为，国产Macro极可以取代血细胞计数板和Makler板用于精液分析。在推广普及后将有助于我国精液检查的标准化。