杠柳苷对BT_549细胞增殖的抑制作用与p16、p27表达关系的研究

背景与目的： 观察杠柳苷对人乳腺癌细胞株BT_549体外增殖抑制的作用,检测p16和p27的表达,探讨杠柳苷抑制乳腺癌细胞的可能作用机制。 材料与方法： 以不同浓度的杠柳苷(2.5、5.0、10.0 μg/ml)干预BT_549细胞,并设空白对照组,干预24、48、72 h后,分别用MTT比色法分析细胞增殖情况;流式细胞技术检测细胞凋亡与周期分布。半定量RT_PCR、流式细胞技术检测细胞p16、p27 mRNA和蛋白表达水平。 结果： 与对照组相比较,杠柳苷各实验组BT_549细胞增殖水平较对照组明显下降(P<0.01),促进细胞凋亡率明显增加(P<0.01),实验组细胞发生G0/G1期阻滞,细胞的p16、p27表达水平显著增高(P<0.01)。 结论： 杠柳苷具有抑制BT_549细胞增殖的作用,其机制可能与促进p16和p27表达水平的增高有关。     

香加皮提取物杠柳苷抑制SMMC-7721细胞Stat3信号通路诱导细胞凋亡的研究

目的研究香加皮提取物杠柳苷对Stat3信号通路的影响,及其诱导细胞凋亡的分子机制。方法MrITll比色法检测人肝癌细胞SMMC-7721增殖活性,流式细胞术分析肿瘤细胞的周期变化和凋亡,Western blot检测细胞内Stat3蛋白表达,RT-PCR检测细胞Mcl-1、Survivin和XIAP mRNA的表达。结果杠柳苷可明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,诱导SMMC-7721细胞凋亡,并使细胞周期停滞在G2／M期。杠柳苷作用后,细胞核内Stat3量降低,而细胞质中的量未见明显改变,细胞内Mcl-1、Survivin和XIAP基因的表达明显降低,并呈时间依赖性。结论香加皮提取物杠柳苷通过抑制Stat3信号转导通路和Mcl-1、Survivin和XIAP mRNA的表达,进而抑制SMMC-7721细胞的增殖,诱导其凋亡。     

STAT3基因RNAi诱导肝癌细胞凋亡及对STAT3信号转导相关基因表达的影响

背景与目的:探讨STAT3基因RNAi对人肝癌细胞SMMC7721凋亡的影响,及对STAT3信号转导相关基因表达的影响,为STAT3信号通路的肿瘤靶向治疗提供理论依据.材料与方法:采用RNAi技术特异性沉默SMMC7721细胞中STAT3的表达,通过Westem blot技术检测经RNAi作用后SMMC7721细胞STAT3蛋白表达水平的变化.采用透射电镜和流式细胞术检测经RNAi沉默SMMC7721细胞中STAT3的表达后,对细胞凋亡的影响.通过半定量RT-PCR法检测细胞凋亡相关因子bcl-2和survivin基因表达的变化. 结果:STAT3基因RNAi可有效沉默SMMC7721细胞中STAT3的表达(P<0.05).STAT3的表达被RNAi沉默后,SMMC7721细胞凋亡率较对照组明显增加(P<0.01).且SMMC7721细胞bel-2和survivin mRNA的表达水平均受到明显抑制,与对照组间的差异均具有统计学意义(P<0.01). 结论:STAT3基因RNAi可有效沉默SMMC7721细胞中STAT3的表达,诱导SMMC7721细胞凋亡,下调SMMC7721细胞bcl-2、survivin mRNA的表达.     

中药肺腑汤治疗耐药性肺结核临床观察

目的分析常规西药治疗基础上联合中药肺腑汤治疗耐药性肺结核的临床效果。方法将2016年6月-2018年4月接受治疗的耐药性肺结核患者中的130例设为研究对象,根据治疗方法不同将其分为观察组(65例)以及对照组(65例)。对照组患者采用左氧氟沙星注射液、阿米卡星注射液、氨基水杨酸异烟肼片常规药物治疗,观察组在对照组常规治疗基础上加用中药肺腑汤治疗。对比2组患者治疗3个月后的临床效果以及不良反应情况。结果观察组患者红细胞沉降率恢复正常、痰菌转阴、痰培养转阴、CT检查结果好转率均显著优于对照组(P<0.05),观察组患者不良反应率与对照组无显著差异(P>0.05),且2组患者经保肝治疗和对症治疗后不良反应消失。结论耐药性肺结核患者在常规治疗基础上加用中药肺腑汤能够获得更好效果,且不良反应少,值得临床推广。     

靶向STAT5的siRNA诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡

目的 采用RNA干扰技术阻断STAT5基因的表达,观察其对人肝癌SMMC-7721凋亡的影响.方法 构建3种靶向STAT5的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,采用LipofectamineTM2000转染肝癌细胞SMMC-7721;分别采用半定量RT-PCR、Western blot技术检测转染前后SMMC-7721细胞STAT5 mRNA和蛋白质表达的变化;采用透射电镜技术观察细胞形态变化;流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 3条靶向STATS的序列特异性的siRNA可以有效地抑制SMMC-7721细胞STATS mRNA和蛋白质表达,STAT5 mRNA表达抑制率分别为70.43%、43.02%、45.07%,STAT5蛋白表达抑制率分别为67.45%、37.36%、41.86%;转染靶向STAT5的siRNA真核表达载体48 h后出现凋亡细胞的典型形态学变化,并诱导25.61%的SMMC-7721细胞发生凋亡.结论 靶向STAT5的siRNA真核表达载体可以有效、特异地阻断SMMC-7721细胞STAT5基因的表达,并能够诱导SMMC-7721细胞凋亡,STAT5 siRNA在人肝癌的基因治疗中可能具有潜在的应用价值.     

STAT3在人肝癌细胞株SMMC-7721细胞内的表达

目的研究信号传导及转录活化因子STAT3在人肝癌细胞内的表达及其表达产物STAT3酪氨酸磷酸化活化情况。方法分别采用western blotting、流式细胞术检测人肝癌细胞株SMMC-7721细胞内STAT3蛋白和磷酸化STAT3(P-STAT3)蛋白的表达。结果人肝癌细胞株SMMC-7721细胞内有STAT3的表达和酪氨酸(Y705)磷酸化。结论STAT3的异常表达和活化可能在肝癌的发生发展中起重要作用。     

洛铂及IL-2联合干预对乳腺癌细胞MCF-7的抑制作用研究

目的 研究洛铂与白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)联合干预对乳腺癌细胞MCF-7体外增殖的抑制作用,为乳腺癌的治疗提供一个新的方案.方法 用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]比色法检测单独应用洛铂与IL-2及两者联合应用对乳腺癌细胞MCF-7体外增殖的抑制作用.结果 洛铂与IL-2联合应用对乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制率较两者单独应用时均有增强(P<0.05).结论 洛铂与IL-2联合应用可增强对乳腺癌细胞MCF-7的抑制作用.