5种医用益生菌产品的微生物数量和种属分析

目的:比较市售5种医用益生菌产品的活菌数量、种属与产品标签是否一致。方法:采用选择平板菌落计数法检测产品的活菌数量,利用16S rDNA序列分析、鉴定分离菌株的种属。结果:5种产品共25批的活菌数含量只有1批低于标签标注的数量。分离的10株菌中有3株种属与标签标注的不一致。结论:考察的5种产品中,菌株种属与标签标注存在差异,但产品的活菌数量与标签标注基本一致。     

抗IGF-1R单克隆抗体抗肺癌转移的实验研究

目的：扩增出单纯疱疹病毒Ｉ型（ＨＳＶ－Ｉ）Ｓｔｏｃｋｅｒ株胸苷激酶（ｔｋ）基因,并将其克隆到真核表达质粒中,构建一个含有ｔｋ基因片段的高效真核表达载体。方法：根据已发表的ＨＳＶ－Ｉ ＣＬ１０１株ｔｋ基因的核苷酸序列,设计并合成了一对引物,以ＨＳＶ－Ｉ Ｓｔｏｃｋｅｒ株酸为模板,进行ＰＣＲ扩增,并将扩增产物连接到ｐＵＣ１１９中,进行序列分析,将此基因进一步克隆到含巨细胞病毒极早期启动子的真核表达质粒     

羊胎盘免疫调节因子对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响

目的探讨羊胎盘免疫调节因子(GPIF)对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响。方法采用巨噬细胞体外培养的方法。分3个实验组,对腹腔巨噬细胞分别给予0 .0 5 ,0 .1和0 .5mg/mlGPIF进行体外培养,培养结束后,测定腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力、对溴化四唑蓝(MTT)的还原能力,以及分泌一氧化氮(NO)和白细胞介素 1(IL-1)的量。结果与对照组比较,各浓度GPIF均有促进腹腔巨噬细胞吞噬中性红能力作用,且能显著提高腹腔巨噬细胞对MTT的还原能力,增加NO和IL-1的分泌量(P <0 .0 5 )。结论GPIF具有非特异性免疫增强作用     

应用RAPD引物区分小鼠品系

目的 用随机扩增多态DNA（Random amplidfed polymorphic DNA,RAPD）方法区分10个常用小鼠品系。方法 从120条随机引物中筛选出稳定性、重复性好的4条多态性引物对10个常用小鼠品系进行RAPD扩增。扩增产物在含溴化乙锭的1．5％琼脂糖凝胶中电泳,紫外透射仪上观察照相。结果 仅用这4条引物就可将10个品系小鼠完全区分开来,其中包括遗传背景或外观形态很相似的品系,如BALB／c与BALB／c-nu、KM与BALB／c也能区分出来。结论 筛选出的4条引物对实际工作具有指导意义,适用于小鼠常规遗传监测。     

小型猪几种关键造血因子在不同组织中的表达水平分析

目的检测小型猪骨髓、肾上腺、肾、脾、肝和骨骼肌中,SCFI、L-3I、L-6、GM-CSF和EPO等关键造血因子的表达水平,为小型猪造血相关研究提供实验基础。方法①取小型猪骨髓、肾上腺、肾、脾、肝和骨骼肌,经无菌处理后,按1∶9比例将组织块和含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液加入培养瓶,37℃、5%CO2培养5 h,收集上层培养液;②在肾组织培养瓶中补充培养液,培养至24 h9、6 h,分别收集上层培养液;③用定量ELISA检测培养液中SCFI、L-3、IL-6、GM-CSF和EPO含量。结果①培养5 h,SCFI、L-3、IL-6、GM-CSF、EPO 5种造血因子含量在骨髓培养液中分别为14.25、8.67、0、5.69、16.00 IU/L;在肾上腺培养液中分别为19.96、30.67、7.00、8.45、5.57 IU/L;在肾培养液中分别为53.00、98.67、107.96、34.48、63.83 IU/L;在脾培养液中分别为15.67、4.67、0、4.31、9.91 IU/L;在肝培养液中分别为24.96、36.67、29.86、12.93、28.61IU/L;在骨骼肌培养液中分别为17.82、14.67、42.71、9.12、21.65 IU/L;②肾组织培养24 h:SCF 147.61 ng/LI、L-3 298.67ng/LI、L-6 385.44 ng/L、GM-CSF 91.55 ng/L、EPO 158.09 IU/L;肾组织培养96 h:SCF 142.96 ng/LI、L-3 295.34 ng/L、IL-6 249.72 ng/L、GM-CSF 126.72 ng/L、EPO 148.96 IU/L。结论①小型猪肾组织培养液中各造血因子浓度均为最高,其次为肝和骨骼肌。②以上细胞因子在肾组织原代培养中持续表达,除GM-CSF浓度一直呈上升趋势外,其它4种细胞因子浓度均在第24 h达到最高。     

异种无细胞真皮动物移植实验研究

目的研究巴马香猪无细胞真皮（acellular dermal matrix,ADM）结合自体刃厚皮移植于皮肤全层缺损大鼠后的免疫排斥反应、移植皮片存活率及创面收缩率。方法将巴马香猪ADM、人ADM及异体大鼠ADM结合自体刃厚皮移植于皮肤全层缺损大鼠背部,与大鼠自体全厚皮片移植组、单纯自体刃厚皮移植组比较,观察移植第1、2、4、8w时免疫排斥反应发生及炎症细胞浸润情况,计算不同时间点移植皮片存活率及创面收缩率。结果巴马香猪ADM和人ADM结合自体皮片移植到大鼠创面后,未引起明显免疫排斥反应,移植皮片存活率及创面收缩率无明显差异;与异体大鼠ADM组移植皮片存活率及创面收缩率之间差异不显著;移植皮片存活率明显低于自体全厚皮片移植组,但显著高于单纯自体刃厚皮移植组,创面收缩率显著低于自体刃厚皮移植组。结论巴马香猪ADM与人ADM具有相似的安全性和有效性,可提高自体皮片存活率,降低创面收缩率,完全可能替代人ADM应用于创伤修复领域。     

不同转移特性人肺癌裸鼠移植瘤及临床标本Ⅳ型胶原酶的表达

目的：观察人肺癌移植瘤及临床标本中Ⅳ型胶原酶表达与其转移的相关性。方法：以ＡＢＣ免疫组化染色对四株不同转移特性人肺癌裸鼠移植瘤及８７例有或无淋巴的人示本进行Ⅳ型胶原酶表达的观察。四株移植瘤的淋巴结移率由低到高依次为ＰＬＡ－８０１Ｃ、Ａｎｉｐ９７３、ＰＬＡ－８０１Ｄ、ＰＬＡ－８０１ＤＬ。结果：Ａｎｉｐ９７３、ＰＬＡ－８０１Ｄ、ＰＬＡ－８０１Ｄｌ裸鼠移植瘤呈阳性反应，而ＰＬＡ－８０１Ｃ则呈阴性反应；人     

提高精子转染外源DNA效率的山羊精液冷冻方法

目的筛选一种既提高精子转染外源DNA效率,又保持解冻后精子活力的山羊精液冷冻—解冻方法。方法应用正交设计L9(34),因素分别为稀释液种类、稀释比例、降温时间和解冻液,每个因素选择3个水平,检测和比较解冻后精子转染外源DNA效率和精子活力。结果所选冷冻—解冻各因素对精液转染效率影响不显著[F(8,18)=1.032,P=0.449];平衡时间对冷冻—解冻活力影响极显著[F(2,24)=9.972,P=0.001],平衡1h极显著小于平衡2 h和4 h的精液活力(P=0.003,P=0.000),以平衡4 h最好。用筛选的冷冻—解冻方法处理精液,解冻后精子的活力极明显降低(P=0.002);生存指数降低,GOT释放量增加,菌落数减少,与鲜精相比差异显著(P=0.018;P=0.016;P=0.018);精子畸形率增加,顶体完整率降低,与鲜精相比差异不显著(P=0.494;P=0.084)。结论优化了提高精子转染外源DNA效率的山羊精液冷冻—解冻方法。     

我国小型猪品系资源状况初浅分析

小型猪正逐渐成为生命科学研究中的重要实验动物。我国具有独特和丰富的小型猪资源,我国小型猪品系或资源涉及资源品系、封闭群、近交培育品系等。本文就我国的小型猪品系资源状况进行了介绍和初步分析。     

光合细菌抗氧化特性的体外实验研究

目的研究类球红细菌(Ⅱ)、沼泽红假单胞菌(2c)、深红红螺菌(rub)3株光合细菌(photosynthetic bacteria,PSB)的体外抗氧化特性,为PSB制品的功效定位提供资料和菌株材料。方法用试剂盒测定由3株PSB分别制备的菌液、菌液破碎液、菌体、菌体破碎液样品体外产生T-SOD,GSH,MDA水平,超氧阴离子和羟自由基的清除能力,以及总抗氧化能力及测定3株PSB菌悬液对3种活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)的抗性。结果体外试验结果表明,3株PSB制品对羟自由基、超氧阴离子自由基均具有抑制和清除作用,由高到低的趋势是:菌液破碎液→菌体破碎液→菌液→菌体,其之间的差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。同一菌株不同样品的总抗氧化能力,T-SOD、GSH活性由高到低的趋势是:菌液破碎液→菌体破碎液→菌液→菌体,其之间的差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。菌株2c体外抗氧化作用最强,菌液和菌液破碎液的T-AOC分别是〔(2.822±0.105)(、4.306±0.128)U/mg pro〕,在所有菌株中最高。所有样品的MDA含量均较低。Fenton反应所产生的羟自由基对菌株rub、Ⅱ的活菌数有显著影响(P<0.05,P<0.01),对菌株2c活菌数无显著影响。结论3种PSB菌株都具有抗氧化作用,但具有菌株特异性;PSB抗氧化特性能增加菌株对ROS的抗性。可将PSB制品的功效之一定位于抗氧化,选择菌株2c作为后续研发材料。