口服Ⅱ型胶原对佐剂型关节炎TGF—β和IL-12的影响

目的：探讨口服Ⅱ型胶原（CⅡ）对大鼠佐剂型关节炎（AA）的治疗作用。方法：建立大鼠AA动物模型,观察口服高、中、低剂量的CⅡ后大鼠关节病变情况,流式细胞仪检测大鼠外周血T细胞亚群的变化,原位杂交法检测大鼠脾脏和派氏淋巴结（Peyer patches PP）中转化生长因子β（TGF—β）、IL-12水平的变化。结果：口服高、中、低剂量的Ⅱ型胶原均可减轻关节病变的发生,高剂量组作用最显著,大鼠外周血CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞水平与模型组比较均有显著性差异,脾脏和PP淋巴结TGF-β水平较模型组升高,IL-12无明显改变,pp淋巴结TGF-β阳性细胞数高于脾脏。结论：TGF—β是口服耐受抑制AA的重要细胞因子,肠道黏膜免疫系统在口服耐受的诱导中可能发挥重要作用。     

强脉冲光及5-氨基酮戊酸对小鼠B16黑素瘤细胞的作用

目的 研究强脉冲光(IPL)及5-氨基酮戊酸(5-ALA)对小鼠B16黑素瘤细胞的影响.方法 以小鼠B16黑素瘤细胞为实验对象,分为阴性对照组(不加5-ALA,未辐射)、UVA阳性对照组(3、4、5 J/cm~2 UVA辐射)、5-ALA组(含5 mmol/L 5-ALA的细胞培养液孵育)、IPL组(20、30、40 J/cm~2 IPL辐射)及5-ALA+IPL组(含5 mmol/L 5-ALA的细胞培养液孵育细胞4 h后予20、30、40 J/cm~2 IPL辐射).辐射后1 d、2 d、3 d、4 d、5 d以噻唑蓝比色法(MTT)测定细胞增殖情况、NaOH溶解法测定黑素含量、氧化多巴反应法测定酪氨酸酶活性的变化.结果 5 mmol/L 5-ALA不影响B16黑素瘤细胞增殖、细胞黑素含量及酪氨酸酶活性.3～4 J/cm~2 UVA可促进B16黑素瘤细胞增殖,5 J/cm2时细胞增殖受到抑制.3～5 J/cm~2 UVA可提高酪氨酸酶活性、促进黑素合成,其作用呈剂量依赖性.IPL及5-ALA+IPL可降低黑素含量,5-ALA+IPL的作用较IPL更明显.IPL及5-ALA+IPL对细胞增殖及酪氨酸酶活性无明显影响.结论 UVA可提高酪氨酸酶活性,促进B16黑素瘤细胞的黑素合成.IPL及5-ALA+IPL可使B16黑素瘤细胞黑素合成减少,对细胞增殖、酪氨酸酶活性无影响.     

Aurora A 在人前列腺癌中的表达

目的观察Aurora A在人前列腺癌中的表达情况,探讨Aurora A是否在前列腺癌发生发展中起一定作用。方法采用RT-PCR、免疫组织化学和Western blot,检测在前列腺癌组织及其细胞系中Aurora A mRNA和蛋白表达。同时,在前列腺癌细胞系PC3中导入靶向Aurora A mRNA的DNA核酶,观察抑制Aurora A对前列腺癌细胞生长的影响。结果91%的前列腺癌组织和三种前列腺癌细胞系(PC3、LNCaP和Du145)中Aurora A表达阳性,而且,靶向Aurora A mRNA的DNA核酶导入PC3细胞后抑制了Aurora A表达,使PC3细胞停滞在G2/M期,并促进细胞凋亡。结论Aurora A可能在前列腺癌形成中起一定作用,Aurora A可望成为前列腺癌治疗中有价值的靶点。     

KAI1基因对宫颈癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的 探讨肿瘤转移抑制基因KAI1对宫颈癌CaSki细胞体外增殖和侵袭能力的影响.方法 通过脂质体转染技术,将真核表达质粒pCMV-KAI1导入低表达的宫颈癌CaSki细胞,免疫组化及实时荧光定量RT-PCR法检测转染前后细胞内KAI1蛋白和mRNA的表达,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及Transwell侵袭力小室测定KAI1基因对细胞增殖能力及侵袭能力的影响.结果 转染目的基因的CaSki细胞中KAI1 mRNA水平及蛋白表达明显增强(P<0.05),细胞体外增殖能力明显弱于未转染组和转染空载体组(P<0.05),细胞穿膜数量明显少于未转染组和转染空载体组(P<0.05).结论 肿瘤转移抑制基因KAI1对宫颈癌细胞体外增殖及侵袭能力有一定抑制作用.     

高效分离培养肿瘤浸润淋巴细胞方法的建立

提高肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）的增殖能力和杀伤活性，是其临床应用前需解决的关键问题。为此，作者对ＴＩＬ的分离和培养条件进行了探讨，建立了以机械分散法，０．０５％胶原酶和０．００３％ＤＮＡ酶室温消化６小时加冷消化１８小时的酶消化法和７５％与１００％Ｆｉｃｏｌｌ非连续密度梯度离心法相结合的分离纯化ＴＩＬ方法。分离出的ＴＩＬ在体外条件培养基中多数能扩增到１０９以上的应用标准，ＮＫ、ＬＡＫ活性分别可达５８．３±１１．７％和４８．６±１０．６％，其中发挥主要作用的是ＣＤ８Ｔ细胞。因此，本法不失为一种有效的分离培养ＴＩＬ的方法。它的建立为应用ＴＩＬ治疗恶性肿瘤奠定了良好的实验基础。     

聚乳酸材料对成骨样细胞增殖和分化的影响

目的 研究聚乳酸对成骨样细胞增殖和分化的影响。方法 电镜观察未处理和经预处理的聚乳酸膜。分别将未处理（材料组）和经预处理（处理组）的聚乳酸薄膜与成骨样细胞体外共同培养,观察细胞形态学变化、MTT测定细胞的增殖以及测定碱性磷酸酶（ALP）活性。结果 ①电镜结果显示未处理膜与处理后的膜有细微差别。②材料组细胞与对照组相比出现明显的聚集样生长,细胞形态构成以多角形、星形比例为高,材料组MTT及ALP测定结果均低于对照组（P＜0．05）。预处理组与对照组细胞形态学的差异仅在实验开始3d可以观察到;而细胞的增殖及ALP活性与对照组的差异无统计学意义。结论 预处理后的聚乳酸薄膜对成骨样细胞增殖和分化并无抑制作用．在某种程度上．经处理后反而对其有轻微的促进作用。     

生物素N-羟基丁二酰亚胺酯标记抗rhIFN-α单克隆抗体

目的　探讨生物素N 羟基丁二酰亚胺酯标记单克隆抗体的方法。方法　用硫酸铵纯化的抗rhIFN α单克隆抗体 ,将 2 .0ml抗体 ( 6.0mg/ml)和 18μlBNHS( 3 8mg/ml)混合 ,室温反应 4小时 ,加入 48μl 1MNH 4Cl,10分钟后将反应混合液装入透析袋对PBS透析 ,然后用生物素 亲和素ELISA法测定所制备的生物素化抗体活性。结果　该法制备的生物素化抗体活性高 ,用于检测rhIFN α敏感性好。结论　该生物素化抗IFN α单克隆抗体的制备方法具有制备简单 ,稳定性好等优点。     

成纤维细胞端粒酶重建对生物节律的调控

为探讨衰老对生物节律调控的分子机理,以青龄、衰老和端粒酶重建的皮肤成纤维细胞作为细胞模型,检测节律基因Per2,BMAL1和Clock表达.衰老细胞中节律基因表达受损,端粒酶重建细胞恢复了节律基因的节律性表达,提示端粒酶重建细胞可望用于衰老细胞的替代治疗.     

重症肌无力患者血清sIL－2R水平检测及其临床意义

本文对４２例重症肌无力（ＭＧ）患者及４０例正常对照者血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平进行了检测，并对１４例ＭＧ患者在应用糖皮质激素（ＧＣ）治疗后ｓＩＬ－２Ｒ水平变化进行了观察。结果：全身型及眼肌型ＭＧ患者皆显著高于正常对照组，而全身型患者明显高于眼肌型患者，病情重者明显高于病情轻者，预后好者显著低于预后差者，ＧＣ治疗后其ｓＩＬ－２Ｒ水平显著降低。提示ＭＧ患者血清ｓＩＬ－２Ｒ水平变化与ＭＧ临床表现密切相关，ＧＣ对ＭＧ患者ｓＩＬ－２Ｒ的产生有重要影响     

多囊卵巢综合征患者红细胞胰岛素受体体内自身磷酸化研究

目的 了解多囊卵巢综合征(PCOS)患者胰岛素受体在人体内环境不同胰岛素水平下自磷酸化状况及其与胰岛素抵抗(IR)状态的相关关系.方法 40例PCOS患者以空腹胰岛素水平>15 mIU/L为高胰岛素血症(HI)标准,按年龄、体重指数配对原则将其分为HI-PCOS组(n=20)和无HI(non HI-PCOS)组(n=20),并按年龄、体重指数配对设立有排卵及规律月经的育龄女性为正常对照组(n=20).分别测定卵泡早期血清性激素水平,做75 g口服葡萄糖耐量实验(OGTT)及胰岛素释放实验,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).并在OGTT的5个时间点(空腹及口服75 g葡萄糖后30、60、120和180 min)抽血获红细胞,夹心ELISA法分别检测红细胞的总胰岛素受体(TIR)及酪氨酸残基磷酸化胰岛素受体(APIR).体内不同胰岛素水平下的胰岛素受体自身磷酸化程度用APIR/TIR表示.结果 HI-PCOS组在OGTT 5个时间点的红细胞APIR/TIR均低于non-HI-PCOS组及对照组,但仅口服75 g葡萄糖后60 min差异有统计学意义(P<0.05);non-HI-PCOS组与对照组的红细胞APIR/TIR无差异(P>0.05).结论 伴高胰岛素血症PCOS患者存在胰岛素受体体内自磷酸化异常,这可能是PCOS患者发生IR的分子机制之一.