补肾中药对大鼠BMSCs分泌NGFβ、BDNF、VEGF功能的影响

目的探讨不同补肾方药对大鼠BMSCs分泌NGFβ、BDNF、VEGF功能的影响作用。方法采用全骨髓贴壁法体外扩增培养BMSCs,流式细胞仪检测细胞表面抗原,ELISA法测定右归丸、左归丸、地黄饮子及中药联合RA诱导的大鼠BMSCs培养液中NGFβ、BDNF、VEGF的水平。结果第F3代BMSCs表面CD45-CD90+表达率为97%;与空白组比较,各药物组BMSCs培养液中NGFβ、BDNF、VEGF含量均明显增高(P0.01或P0.05);与RA组比较,地黄饮子组NGFβ、BDNF、VEGF含量明显增高(P0.01),左归丸组VEGF含量明显增高(P0.01);与右归丸组比较,地黄饮子组BDNF、VEGF含量明显增高(P0.01),左归丸组VEGF含量明显增高(P0.01);各中药联合RA组比单纯中药或RA单药组3种神经营养因子的含量均明显升高(P0.01)。结论右归丸、左归丸、地黄饮子、RA均能明显促进BMSCs分泌功能,并中药与RA具有协同促进作用;地黄饮子在促进BMSCs分泌BDNF和VEGF、左归丸在促进分泌VEGF功能方面优于右归丸。     

右归丸对膝骨关节炎模型鼠软骨组织凋亡和基质降解调控基因表达的影响

目的通过观察右归丸对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型大鼠软骨组织凋亡和基质降解调控基因的影响,进一步揭示右归丸防治KOA的机制.方法采用数字表法将SD大鼠随机分为假手术对照组,KOA模型组,KOA+硫酸氨基葡萄糖组(硫酸氨基葡萄糖),KOA+右归丸(高、中、低剂量)组,每组10只.采用改良Hulth法制备大鼠KOA模型,分别予相应药物灌胃8周.HE染色法观察软骨组织的形态学变化,并进行Mankin评分;应用实时荧光定量PCR法检测各组大鼠软骨组织B淋巴细胞瘤分子-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、B淋巴细胞瘤分子-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(aspartate-specific cysteine protease-3,caspase-3)基因的表达;应用免疫组化法检测各组软骨组织Ⅱ型胶原(collagenⅡ,COLⅡ)的表达.结果假手术组、KOA模型组、KOA+硫酸氨基葡萄糖组、KOA+右归丸高、中、低剂量组的Mankin评分别为0.33±0.073,4.92±0.539,2.76±0.317,3.05±0.253,4.14±0.159,4.38±0.621;COLⅡ评分分别为3.45±0.07,0.39±0.02,3.53±0.11,3.87±0.05,3.15±0.21,0.41±0.13;Bcl-2基因表达分别为2.22±0.08,1.00±0.08,1.75±0.05,1.83±0.11,1.67±0.03,1.12±0.09;Bax的基因表达分别为0.23±0.01,1.00±0.05,0.33±0.03,0.28±0.07,0.42±0.03,0.75±0.01;Caspase-3基因表达分别为0.18±0.01,1.00±0.03,0.26±0.05,0.21±0.02,0.36±0.02,0.83±0.07.与假手术组比较,KOA模型组大鼠软骨组织Mankin评分明显升高,软骨组织Bcl-2基因表达降低,COLⅡ蛋白表达明显降低,Bax和caspase-3基因表达显著升高(P<0.01);KOA模型组关节软骨边缘严重破坏,软骨细胞排列紊乱.与KOA模型组相比,KOA+右归丸高剂量干预大鼠软骨组织Mankin评分明显降低,KOA+右归丸中、高剂量干预大鼠软骨组织Bax和caspase-3的基因表达均明显降低,Bcl-2基因表达和COL-Ⅱ的蛋白表达均明显升高(P<0.05),KOA+右归丸高剂量组软骨结构趋于正常,软骨细胞分布仅偶见不均,关节软骨表面欠光滑.结论右归丸通过上调Bcl-2表达和下调Bax和caspase-3表达减缓COL-Ⅱ的降解,从而有效保护膝骨关节炎模型鼠关节软骨,延缓关节软骨退变.     

四时常服方对氯化镉染毒模型大鼠免疫和抗氧化功能的影响

目的:通过观察四时常服方对氯化镉染毒模型大鼠白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)和超氧化物歧化酶(superoxidase dismutase,SOD)活性的影响,探讨其作用机制。方法:选用SPF级Wistar大鼠60只,随机均分为空白组,模型组,乙酰半胱氨酸组,四时常服方低剂量组、中剂量组、高剂量组。末次给药24 h后处死大鼠,计算胸腺指数、脾脏指数。采用比色分析法测定大鼠血清SOD活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平,ELISA法测定大鼠血清IL-2和转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)的水平。结果:空白组,模型组,乙酰半胱氨酸组,四时常服方低剂量组、中剂量组和高剂量组的体质量分别为(193.13±37.48)g、(144.40±11.55)g、(185.10±25.89)g、(162.88±13.11)g、(165.77±15.62)g、(179.20±22.73)g;各组的脾脏指数和胸腺指数分别为(3.96±0.70/1.69±0.50)mg·g~(-1)、(1.86±0.43/0.72±0.33)mg·g~(-1)、(2.80±0.61/1.33±0.25)mg·g~(-1)、(2.49±0.36/0.83±0.22)mg·g~(-1)、(2.90±0.53/0.87±0.23)mg·g~(-1)、(3.03±0.72/1.04±0.39)mg·g~(-1);各组的SOD水平分别为(72.72±8.10)U·mL~(-1)、(38.28±4.92)U·mL~(-1)、(64.87±10.15)U·mL~(-1)、(56.70±8.94)U·mL~(-1)、(63.27±7.15)U·mL~(-1)、(65.54±4.92)U·mL~(-1);各组的MDA水平分别为(6.26±0.98)nmol·L~(-1)、(13.36±1.15)nmol·L~(-1)、(7.86±0.83)nmol·L~(-1)、(8.09±0.98)nmol·L~(-1)、(7.19±1.24)nmol·L~(-1)、(7.00±0.85)nmol·L~(-1);各组的IL-2水平分别为(223.61±28.59)ng·L~(-1)、(130.56±20.18)ng·L~(-1)、(201.39±23.81)ng·L~(-1)、(176.67±20.75)ng·L~(-1)、(187.50±30.16)ng·L~(-1)、(193.33±38.37)ng·L~(-1);各组的TGF-β_1水平分别为(5.50±0.51)μg·L~(-1)、(11.78±0.83)μg·L~(-1)、(6.17±0.35)μg·L~(-1)、(7.93±0.60)μg·L~(-1)、(7.22±0.78)μg·L~(-1)、(6.40±0.43)μg·L~(-1)。与空白组比较,模型组体质量明显减轻(P0.05);各干预组体质量高于模型组(P0.05)。与空白组比较,模型组胸腺指数和脾脏指数均降低,各干预组脾脏指数升高,乙酰半胱氨酸组胸腺指数升高(P0.05)。与空白组比较,模型组MDA水平明显升高、SOD活性明显降低(P0.05);四时常服方各干预组MDA水平明显低于模型组,SOD活性明显高于模型组(P0.05)。与空白组比较,模型组IL-2水平明显低于空白组,TGF-β_1的水平明显高于空白组(P0.05);四时常服方各干预组IL-2水平明显高于模型组,TGF-β_1明显低于模型组(P0.05)。结论:四时常服方对氯化镉所致大鼠的氧化损伤和免疫损伤具有保护作用,其机制可能与提高SOD活性和增加IL-2水平有关。     

Effects of cadmium chloride on micronucleus rate and chromosome aberration rate in mouse bone marrow mesenchymal stem cells

背景：氯化镉对骨髓间充质干细胞遗传方面影响的研究暂无报道。 目的：观察化学毒性物质氯化镉对骨髓间充质干细胞微核率和染色体畸变率的影响。 方法：贴壁培养小鼠骨髓间充质干细胞细胞株,显微镜下观察空白对照组及氯化镉诱导组骨髓间充质干细胞的形态学变化,微核实验检测两组微核率,染色体分析检测两组染色体畸变率。 结果与结论：显微镜下观察,空白对照组细胞呈成纤维细胞样贴壁生长,胞体透亮,折光性强;氯化镉诱导组细胞呈凸起回缩,细胞变小、变圆,贴壁不牢,悬浮细胞增多。与空白对照组比较,氯化镉诱导组骨髓间充质干细胞微核发生率和染色体畸变率均显著增加(P < 0.05)。提示氯化镉可引起小鼠骨髓间充质干细胞遗传物质的损伤。     

补肾中药温肾强身散对去卵巢大鼠骨微结构和骨矿含量的影响

目的:观察补肾中药温肾强身散对去势大鼠骨微结构和骨矿含量的影响并探讨其治疗机制。方法:SPF级雌性SD大鼠按随机数字表法分为模型组、西药对照组及温肾强身散高、中、低剂量组和假手术组,除假手术组外其余各组大鼠行双侧卵巢去除术,假手术组大鼠行假手术处理,各组大鼠给予相应处理4周,计算胸腺、脾脏及肾指数,检测血清钙(Ca)、磷(P)含量,测定大鼠股骨的骨矿含量(bone mineral content,BMC)、最大载荷和弹性模量,并进行股骨病理形态学检查。结果:与模型组比较,温肾强身散组大鼠胸脾指数明显升高,血清Ca、P含量明显升高,股骨的骨微观参数骨含量均得到良好的修复,骨生物力学参数中最大载荷、弹性模量得到明显修复,骨小梁排列规则,数目增多、增宽。结论:补肾中药温肾强身散对骨质疏松症模型大鼠的作用机制可能是在一定程度上提高了股骨组织中BMC的水平,进而抑制骨组织的吸收,促进骨组织的形成。     

KLF4在胃癌组织中的表达与临床病理特征相关性的Meta分析

目的 系统评价Kruppel样转录因子4(KLF4)在胃癌中的表达与临床病理特征的关系。方法 计算机检索PubMed,Web of Science,EMBASE,万方数据库和中国知网(CNKI)数据库等,检索关于KLF4基因表达与胃癌相关性的病例对照研究。检索时间为建库至2018年5月。根据纳入和排除标准筛选文献,提取数据后,使用Review Manager5.3软件统计分析。结果 最终纳入10个研究,共1 063例样本量。Meta分析结果显示:KLF4的表达在胃癌组织组与正常组织或癌旁组织组间[OR=0.22,95%CI(0.09,0.55),P=0.001]、淋巴结转移组与无淋巴结转移组间[OR=0.38,95%CI(0.28,0.51),P<0.000 01]、高中分化组与低分化组间[OR=2.98,95%CI(1.93,4.61),P<0.000 01],Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期间[OR=2.93,95%CI(1.53,5.62),P=0.001]、胃癌浸润浆膜以外组与未及浆膜组间[OR=0.42,95%CI(0.27,0.65),P=0.000 1]差异均有统计学意义。结论KLF4在胃癌中的表达与其发生、淋巴结转移、分化程度、TNM分期及浸润程度密切相关。     

祛寒逐风合剂对阳虚型膝骨性关节炎内源性透明质酸水平的影响

目的:观察口服祛寒逐风合剂对阳虚型膝骨性关节炎(KOA)患者关节液以及血清中透明质酸(HA)含量的影响。方法:将90例患者随机分为A、B、C3组,每组30例。A组口服祛寒逐风合剂,50 m L/次,3次/d;B组关节腔内注射透明质酸钠,2 m L/次,1次/周;C组同时使用A、B2组的治疗方法。3组均连续治疗5周。观察治疗前后关节滑液和血清中HA水平的变化情况。结果:关节液HA水平治疗前3组比较,差异无统计学意义(P0.05);治疗前后3组组内比较差异有统计学意义(P0.05);治疗5周后,3组组间比较,差异也有统计学意义(P0.05)。血清HA水平治疗前3组比较,差异无统计学意义(P0.05);治疗前后3组组内比较差异有统计学意义(P0.05);治疗5周后,A、C组与B组比较,差异也有统计学意义(P0.05)。结论:祛寒逐风合剂治疗阳虚型KOA能升高患者关节滑液中HA的含量,降低血清中HA的含量,其中与透明质酸钠联合应用上述作用更加明显。     

敦煌医方大补肾汤对镉染毒模型大鼠肝组织细胞因子和氧化应激的影响

目的:探讨大补肾汤对镉染毒模型大鼠肝组织细胞因子和氧化应激的影响。方法:将SPF级Wistar大鼠60只随机分为正常对照组、模型组、乙酰半胱氨酸组及大补肾汤高、中、低剂量组。末次给药24小时后处死大鼠,计算胸、脾指数。采用比色分析法测定大鼠肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,酶联免疫吸附试验(ELI SA)测定大鼠肝组织白细胞介素2(IL-2)和转化生长因子β_1(TGF-β_1)的含量。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠体质量明显减轻(P0.05);大补肾汤中、高剂量组大鼠体质量明显高于模型组(P0.05)。模型组胸、脾指数低于正常对照组,差异有统计学意义(P0.05);大补肾汤各剂量组大鼠脾脏指数高于模型组,且高剂量组胸腺指数高于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。与正常对照组比较,模型组MDA含量升高、SOD活性降低(P0.05);大补肾汤各剂量组MDA含量低于模型组,SOD活性高于模型组(P0.05)。模型组IL-2含量低于正常对照组,TGF-β_1含量高于正常对照组(P0.05);大补肾汤各剂量组IL-2含量高于模型组,TGF-β_1含量低于模型组(P0.05)。结论:大补肾汤对镉所致大鼠的氧化损伤和免疫损伤具有保护作用。