小鼠子宫颈癌U14细胞系的建立及生物学特性研究

目的：建立小鼠宫颈癌肿瘤细胞系。观察其生物学特性。方法：采用肿瘤原代培养法对小鼠U14肿瘤进行体外传代培养，定期对培养细胞进行形态学观察．进行免疫组织化学鉴定、细胞周期检查、染色体检测、细胞生长测定，进行615、C57BL／6j小鼠移植观察体内成瘤情况，并用pEGFP-N1质粒转染U14细胞。结果：细胞呈贴壁和悬浮混合生长，CK阳性特征。体外连续培养10个月，传代50代，细胞倍增时间为21．83h，细胞周期测定G1期为34％，G2期为26．4％，S期为39．6％。培养U14细胞3-4天处于对数生长期，染色体为亚四倍体核型，众数为64～84条。615小鼠、C57BL／6j小鼠移植成瘤率均为100％．无支原体污染。建立了GFP（＋）的U14-GFP单克隆细胞株。结论：成功建立了小鼠U14子宫颈癌细胞系及GFP标记的U14-GFP细胞株，体内移植可建立常规及带荧光标记的肿瘤模型，可用于体内体外相结合的肿瘤研究。     

自体富血小板纤维蛋白治疗宫腔粘连性不孕症的疗效分析

目的评价自体富血小板纤维蛋白(PRF)治疗宫腔粘连性不孕症的疗效。方法将2018年10月—2019年10月北京世纪坛医院确诊为宫腔粘连并排除其他不孕因素的40例患者随机分为PRF组与对照组,每组20例,进行8周干预。2组患者均行宫腔镜下宫腔粘连分离术(TCRA),PRF组在TCRA后即刻、4周后宫腔置入PRF。8周后,2组均行宫腔镜二次探查术并随访。比较2组妊娠率、粘连评分、月经情况、子宫内膜厚度(EMT)。结果 PRF组妊娠率为70.00%,高于对照组的20.00%,差异有统计学意义(P 0.01)。PRF组粘连评分低于对照组,月经经期改善情况优于对照组,差异均有统计学意义(P 0.05或P 0.01)。2组月经量与EMT均有改善,但组间差异无统计学意义(P 0.05)。结论 TCRA联合宫腔置入PRF可有效提高宫腔粘连性不孕患者的妊娠率,降低粘连评分,改善临床症状。     

中药筋脉通含药血清对高糖培养雪旺细胞NF-κB表达的影响

目的观察中药筋脉通含药血清对高糖培养雪旺细胞（SCs）中NF-κB蛋白及其mR-NA表达的影响。方法原代培养并纯化W istar乳鼠坐骨神经SCs,蛋白S-100免疫组织化学法进行鉴定。取第3代SCs,加入不同培养基,分为正常组、高糖组、筋脉通组和神经妥乐平组进行培养,48h后采用激光扫描共聚焦显微技术检测NF-κB蛋白的表达,实时荧光定量PCR技术检测NF-κBmRNA的表达。结果正常组NF-κB绿色荧光强度较弱,主要表达于胞浆区;高糖组荧光强度于胞浆区和胞核区表达都较正常组增强;筋脉通组和神经妥乐平组表达都较高糖组减弱,主要表达于胞浆区。高糖组SCs中NF-κB的蛋白及其mRNA表达较正常组明显增强（P〈0.01）;与高糖组比较,筋脉通组和神经妥乐平组NF-κB的蛋白及其mRNA的表达显著下降（P〈0.01）。结论筋脉通含药血清可抑制高糖培养SCs中NF-κB蛋白及其mRNA的表达。     

人α-甘露糖苷酶Man2c1转基因对移植性肿瘤在小鼠体内生长和转移的影响

目的研究人α-甘露糖苷酶(hMan2c1)转基因对小鼠移植性肿瘤生长、转移的影响。方法接种肝癌细胞H22或肉瘤细胞S180于野生型ICR小鼠和3个系的转基因小鼠(28、35和54号)右侧腋窝皮下,连续测量肿瘤体积。分别于接种细胞第9天和第10天处死小鼠,称重肿瘤。分别对肿瘤组织和肺组织进行HE染色。用Tris-NH4Cl破碎脾脏中的红细胞,以Yac-1细胞为靶细胞,检测脾脏中自然杀伤(NK)细胞的活性。结果接种于3个系的转基因小鼠的H22肿瘤或S180肿瘤的体积及重量均显著高于野生型小鼠(P<0.05)。绝大多数转基因小鼠的肿瘤向周围组织侵袭,而野生型小鼠的肿瘤几乎均有包膜。54、35和28号转基因小鼠的H22肿瘤肺转移率分别为30%(3/10)、50%(5/10)和30%(3/10),野生型小鼠的肿瘤肺转移率为10%(1/10);54、35和28号转基因小鼠的S180肿瘤肺转移率分别为16.7%(1/6)、50%(3/6)和33.3%(2/6),野生型小鼠的肿瘤肺转移率为0(0/10)。转基因小鼠脾脏的NK细胞活性与野生型小鼠比较差异无显著性(P>0.05)。结论hMan2c1转基因促进移植性H22肿瘤及S180肿瘤在ICR小鼠的生长、侵袭和转移,hMan2c1转基因对小鼠脾脏NK细胞的活性无影响。     

氧化型DHA抑制NF-κB信号通路达到化疗增敏作用

目的：比较氧化型DHA和非氧化型DI-IA对于NF-κB通路的不同作用,并比较对于NF—κB信号通路下游基因MMP-2、COX-2、Cyclin DJ的影响,探索DHA达到化疗增敏作用的机制研究。方法：细胞水平培养胃癌肿瘤细胞系MGC-803．设立多组对照试验,共分4组：对照组（不加药空白组）、5-FU化疗组、氧化型DHA联合化疗组（5。FU＋氧化型DHA）、非氧化型DHA联合化疗组（5-FU＋非氧化型DHA）。使用敏感可靠的信号通路报告基因的检测方法．比较各组问肿瘤细胞NF．KB信号通路的激活情况,并检测NF—KB信号通路下游调控基因MMP-2、CO-2、CyclinDI的mRNA表达的差异。结果：化疗组（5-FU）较空白组NF—KB信号通路激活明显,氧化型DHA联合化疗组可抑制化疗引起的NF—KB信号通路激活。同样,氧化型DHA在抑制NF—KB信号通路激活的同时,也抑制了NF—κB下游调控基因MMP-2、COX．2、Cycli nD1的mRNA的表达。非氧化型DHA的作用则相反,会进一步激活NF—κB信号通路。结论：氧化型DHA可通过抑制NF—κB通路来达到化疗增敏的作用,这为临床联合化疗用药提供了新的思路。     

Effect of Jinmaitong (筋脉通) serum on the proliferation of rat Schwann cells cultured in high glucose medium

Objective:To investigate the effect of Jinmaitong(筋脉通,JMT)serum on the proliferation of rat Schwann cells(SCs)primarily cultured in high glucose medium.Method:SOs were primarily cultured in Dulbecco's minmum essential medium(DMEM control),50 mmol/L glucose medium(50 mmol/L Glu),75 mmol/L glucose medium(75 mmol/L Glu),as well as 50 mmol/L glucose medium,with different concentrations of JMT serum(undiluted,1:2 diluted and 1:8 diluted)and Neurotropin(Ntp), respectively.The proliferation of SCs under different conditions was detected by MTT.Result:SCs grew exuberantly in DMEM within 24-72 h,but slowed down at 96 h.The proliferation of SCs was inhibited in 50 mmol/L Glu and 75 mmol/L Glu after cultures of 48,72 and 96 h,which showed that both were significantly different compared to the control group(P<0.01).The inhibition was more significant in 75 mmol/L Glu than in 50 mmol/L Glu(P<0.05).Spearman's rho analysis revealed that the proliferation of SCs had a negative correlation with the concentration of glucose(r=-0.471,P<0.01).Excluding the time factor,partial correlation showed similar results(r=-0.679,P<0.01).After 48 h,the proliferation of SCs increased significantly in JMT1:2 and Ntp compared with 50 mmol/L Glu(control 0.437±0.019,50 mmol/ L Glu 0.367±0.035,JMT1:2 0.426±0.024,Ntp 0.422±0.013;P<0.01),and there were no statistically significant differences among the JMT groups,the Ntp group and the control group(P>0.05).Conclusions: The proliferation of SCs was inhibited in high glucose medium,and the inhibition was reduced by different concentrations of JMT serum,especially at JMT1:2.     

乳腺癌改良根治加假体Ⅰ期植入术10例临床体会

目的探讨Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌行保留乳头乳晕复合体（NAC）的改良根治、即刻假体植入乳房重建术的可行性。方法对Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌,利用早期乳腺癌极少侵犯乳头、乳晕及皮肤的特点,切除病灶及其上方部分皮肤后行皮下腺体切除＋腋淋巴结清扫术,并与硅凝胶假体植入术有机结合,达到Ⅰ期重建乳房的目的。结果对10例Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌患者采用上述术式重建乳房后客观评价效果优良和尚可者达95%,主观评价效果优良和尚可者达100%,术后随访12～30个月,所有病例均无局部复发及远处转移.再造乳房形态良好,患者生活质量明显提高。结论行保留NAC的乳腺癌改良根治术是一种安全有效治疗Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌的手术方式,不仅能减少患者因为乳房缺失的心理压力,同时也不会影响肿瘤的治疗,提高了患者生存质量。     

浸润性乳腺癌保乳治疗24例临床分析

目的:探讨浸润性乳腺癌保乳治疗的临床疗效。方法:浸润性乳腺癌患者24例给予保留乳房的乳腺癌切除术,术后给予辅助化疗、放疗。激素受体阳性患者给予内分泌治疗;Her-2过度表达和扩增患者给予赫赛汀分子靶向治疗。结果:24例患者均手术成功,随访1~52个月,除1例术后46月发生局部复发外,其余患者均未出现局部和远处转移。双侧乳房外形基本对称。结论:浸润性乳腺癌患者接受保乳手术治疗,术后给予综合治疗,疗效和改良根治术相当。     

猪脂肪干细胞与脱细胞真皮基质的生物相容性

背景:脱细胞真皮基质已广泛应用于器官或组织缺损的修补。目的:观察猪脂肪源性干细胞与脱细胞真皮基质的相容性。方法:酶消化法原代培养猪脂肪源性干细胞,利用流式细胞仪和多向诱导分化方法鉴定脂肪干细胞,将其与脱细胞真皮基质共培养。结果与结论:实验成功培养出猪脂肪源性干细胞,流式细胞仪检测结果显示阳性表达CD44和CD105,不表达CD34和CD45;在诱导培养基条件下,可向脂肪细胞、成骨细胞分化。苏木精-伊红染色及扫描电镜发现干细胞能在脱细胞真皮基质表面黏附生长。脂肪源性干细胞与脱细胞真皮基质具有良好的相容性,将两者体外复合培养后,有望将复合物植入体内进行缺损组织、器官的修复。     

CCC-HPF-2细胞基因组DNA可作为STR分型标准物质

目的 检测细胞培养传代过程中的基因稳定性,筛选符合中国人遗传特性的DNA标准物质,建立DNA标准细胞库.方法 通过显微镜下观察、免疫组织化学、核型分析检测细胞传代过程中形态、分子表达及核型是否稳定；应用PCR方法检测细胞的外源微生物及种属来源；STR检测验证细胞在传代过程中STR表达谱的平衡性及稳定性.结果 CCC-H...