在破坏白鼠下丘脑腹内侧核后甘油三酯的分泌速度增高

一般认为肥胖的原因是:①在肝和脂肪组织中脂肪合成亢进;②血中脂肪向脂肪细胞沉积加速;③脂肪组织中脂肪分解被抑制。作者认为破坏下丘脑腹内侧核(VMH)的下丘脑性肥胖的原因是高胰岛素血症。由于此症患者的脂肪组织中脂肪合成亢进,脂蛋白脂肪酶活性升高等,从而导致脂肪积蓄。以往Karakash氏用肝脏灌注实验,Katz氏用离体肝细胞实验对VMH被破坏的白鼠肝内的脂肪     

长期砷诱导L-02细胞的表达谱基因芯片实验

目的: 采用基因芯片技术研究长期砷染毒时人正常肝细胞(L-02细胞)基因表达谱的变化. 方法:4 μmol/L NaAsO2染毒人正常肝细胞(L-02细胞)2 wk以上与未染毒的L-02细胞做表达谱基因芯片杂交. 结果: 长期砷染毒后细胞基因出现多方面表达差异,既包括细胞一些正常生理功能如生长发育、分裂增殖相关的基因,同时也包含一些与肿瘤发生、发展有关的基因. 结论: 细胞长期暴露于砷环境后多种与肿瘤发生有关的基因差异表达,这为从分子水平进一步探讨砷与肿瘤的关系奠定了基础.     

上皮间质转化在放射性肺纤维化中的作用及治疗策略

放射性肺纤维化(radiation-induced pulmonary fibrosis, RIPF)是核辐射事故、骨髓移植预处理及胸部肿瘤放疗后最严重的晚期并发症之一, 其形成过程十分复杂, 发病机制也尚未完全阐明。近年来研究发现, 电离辐射诱导肺上皮细胞发生上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)是RIPF发生发展的关键环节。本文对电离辐射诱导肺EMT在RIPF发生发展中的作用及以EMT为潜在治疗靶点的相关药物做一综述, 为今后研发RIPF的治疗药物提供思路。     

通过基因敲除研究HSPl2的酒精耐受功能

目的：研究热休克蛋白12(HSPl2)在酵母酒精耐受性中的作用。方法：通过对酵母酒精耐受突变株K11和其亲本株K7抽提mRNA作表达谱基因芯片杂交，研究基因表达谱的变化。对其中一条异常高表达的基因HSPl2用SFH-PCR(short flanking homology PCR)的方法敲除HSPl2基因，对HSPl2敲除株的表型进行酒精耐受性研究。结果：基因芯片杂交结果显示K11高表达基因共有41条，其中HSPl2高达50倍。但是HSPl2基因敲除株对酒精的耐受性相对于未敲除株没有显著性变化。结论：在酵母很多基因共同参与对酒精的耐受性，单一基因HSPl2的功能丧失，可以被其它基因的功能所弥补。     

蚕蛹制复合氨基酸

用胰浆酶解蚕蛹制备复合氮基酸,产品符合《沪Q/WS-1-110-80水解蛋白(注射用原料)》及《沪Q/WS-1-112-80口服水解蛋白》质量标准。     

人PIF1全长基因及其截短体真核表达载体的构建及鉴定

目的构建人PIF1基因5端、3端及全长基因的真核表达载体。方法从pCR2.1-TOPO-PIF1原始质粒中,采用PCR方法扩增目的基因PIF1,PIF1N及PIF1C,将目的基因和目的载体pcDNA3.1(-)分别酶切;纯化酶切产物后定向连接,并将其转化大肠杆菌DH5α,对生长出的克隆行特异限制性内切酶酶切鉴定,鉴定为阳性的克隆送样测序。结果凝胶成像结果显示重组基因pcDNA3.1(-)-PIF1,pcDNA3.1(-)-PIF1N及pcDNA3.1(-)-PIF1C酶切后条带大小分别为1 926,540,1 428bp。结论成功构建hPIF1基因5端、3端及全长基因表达载体,分别为pcDNA3.1(-)-PIF1N,pcDNA3.1(-)-PIF1C及pcDNA3.1(-)-PIF1。     

参与DNA修复的PIF1解链酶的纯化和ATP酶活性分析

目的 克隆并表达纯化人类PIF1蛋白,分析其生物化学活性.方法 从HeLa细胞的cDNA文库中克隆得到PIF1解链酶基因,插入融合有组氨酸的表达载体pET24b,构建pET24b-PIF1重组质粒,转化RosettaTM2(DE3)感受态细胞,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察PIF1蛋白表达;通过快速液相蛋白色谱纯化(FPLC)系统,采用亲和层析和凝胶过滤,纯化人类重组PIF1蛋白.薄层层析(TLC)法检测纯化PIF1蛋白的ATP酶活性.结果 克隆了人类PIF1基因,PIF1蛋白在大肠埃希菌(E.coli)中成功表达.结论 建立了PIF1蛋白纯化的方法,PIF1蛋白具有依赖镁离子和DNA的ATP酶活性.     

PCR检测HPVDNA诊断女性生殖道尖锐湿疣

应用聚合酶链反应检测ＨＰＶＤＮＡ诊断女性生殖道尖锐湿疣。方法应用ＰＣＲ法对门诊女性生殖道尖锐湿疣标本中ＨＰＶ６．１１型进行检测。结果９例病理学检测阳性标本有８例检测出ＨＰＶ６．１１型病毒，２０例病理检测阴性标本也有４例检出ＨＰＶ６．１１型病毒。     

通过基因敲除研究HSP12的酒精耐受功能

目的:研究热休克蛋白12(HSP12)在酵母酒精耐受性中的作用。方法:通过对酵母酒精耐受突变株K11和其亲本株K7抽提mRNA作表达谱基因芯片杂交,研究基因表达谱的变化。对其中一条异常高表达的基因HSP12用SFH-PCR(short flanking homology PCR)的方法敲除HSP12基因,对HSP12敲除株的表型进行酒精耐受性研究。结果:基因芯片杂交结果显示K11高表达基因共有41条,其中HSP12高达50倍。但是HSP12基因敲除株对酒精的耐受性相对于未敲除株没有显著性变化。结论:在酵母很多基因共同参与对酒精的耐受性,单一基因HSP12的功能丧失,可以被其它基因的功能所弥补。     

恶性肿瘤组织的端粒酶活性分析

目的 :检测端粒酶活性在恶性肿瘤和良性肿瘤及正常组织的表达 ,以探讨端粒酶活性对恶性肿瘤检测的意义。方法 :采用端粒重复序列扩增分析法 (telomericrepeatamplificationprotocolassay ,TRAP)检测 87例恶性肿瘤和 4 7例对照组织中端粒酶的活性。结果 :恶性肿瘤端粒酶活性阳性检出 85 .0 6 % (74 / 87) ,明显高于对照组织 ,(P<0 .0 1) ;端粒酶活性与组织类型无明显相关性。结论 :与对照组织相比 ,恶性肿瘤组织中端粒酶活性明显升高 ,端粒酶活性可能作为恶性肿瘤检测的一个重要指标