肝癌组织中异常乙肝病毒核心抗原

乙肝病毒感染与肝癌发生的密切关系,已有大量流行病学证据,但是迄今为止尚无实验证据说明乙肝病毒可引起肝组织癌变。乙肝病毒DNA的整合,仅在肝癌中占50～60％,而且整合位点无规律性,整合位点附近没有找到已知的癌基因,因此不能认为整合HBV是诱发肝癌的主要途径。本工作,企图     

转染外源HCAP1基因对Raji细胞化疗敏感性的作用

 目的　探讨外源HCAP1基因产物对B淋巴瘤 /白血病细胞系Raji细胞化疗敏感性的作用。 方法　用脂质体介导法 ,把HCAP1基因转染Raji细胞 ,经G4 18筛选后 ,分别与化疗药物DNR(daunoru bicin ,柔红霉素 )、VP16 (etoposide ,足叶乙甙 )和VCR(vincristine,长春新碱 )联合培养 2 4小时 ,用苔盼兰拒染试验计数活细胞。结果　转染HCAP1的Raji细胞 ,在不同浓度的DNR(0 .0 1～ 10 .0 μg/ml)和VP16 (5～ 80 μg/ml)作用下 ,与转染空载体和未转染对照细胞比较 ,细胞活力的抑制作用明显增强 (P <0 .0 5 )、IC50 (半数抑制浓度 )值明显降低 ;但与不同浓度的VCR(12 .5～ 10 0 μg/ml)作用 ,细胞活力的抑制和IC50 值与对照细胞相似。结论　HCAP1过表达可明显增加Raji细胞对DNR、VP16作用的敏感性 ,但不能显著增加对VCR作用的敏感性     

Jurkat细胞转染外源HCAP1基因后的增殖抑制

HCAP1基因系人类染色体 17p13 .3区带克隆的新肝癌相关基因。已发现人类多种肿瘤存在此区带的杂合性缺失。本研究应用脂质体介导法将HCAP1基因转染T淋巴瘤Jurkat细胞系 ,经G418筛选 ,获得稳定表达外源HCAP1基因的细胞。用台盼蓝拒染试验计数活细胞 ,绘制生长曲线 ,进行软琼脂集落形成试验。结果显示 :与转染空载体质粒 pBK/CMV的细胞比较 ,转染外源HCAP1基因的Jurkat细胞增殖速率明显减慢 ,细胞倍增时间延长 ,在软琼脂上的集落形成能力下降 (P <0 .0 1)。结论 :外源HCAP1基因产物对Jurkat细胞的增殖有明显的抑制作用。     

以PCR－SSCP分析和核苷酸序列直接测定技术检测人类白血病p53基因点突变

以多聚酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析（技术研究）３６例不同类型的白血病ｐ５３抗癌基因点突变，结果在１４例淋巴细胞白血病中发现３例有ｐ５３基因片段的泳动变位。进一步对其中的１例急性淋巴细胞白血病进行核苷酸序列直接测定，显示在第７外显子的２５７位编码子核昔酸由ＣＴＧ突变为ＣＡＧ、氨基酸由天冬氨酸突变为缀氨酸。２２例髓系白血病未发现有ｐ５３基因的点突变。结果提示ｐ５３抗癌基因点突变导致功能失活在淋巴细胞白血病的发病中可能起一定的作用。     

HC56基因转染对淋巴瘤或白血病细胞株活力的作用

目的：探讨外源HC56基因产物对B淋巴瘤细胞株Raji和髓系白血病细胞株K562细胞活力的作用。方法：应用脂质体介导的基因转染方法，将外源基因HC56分别导入Raji和K562细胞，用苔盼兰拒染试验，观察外源基因的瞬时表达对细胞活力的作用。结果：Raji和K562细胞转染HC56基因后，与转染PBK／CMV空载体的实验对照组比较，细胞的活力明显受到抑制(P＜0.05)。结论：外源HC56基因产物可明显抑制淋巴瘤或白血病细胞株的活力。     

IGF─Ⅱ受体（IGF─ⅡR）反义基因对肝癌细胞癌基因转录及生物学行为的影响

ＩＧＦ┐Ⅱ受体（ＩＧＦ┐ⅡＲ）反义基因对肝癌细胞癌基因转录及生物学行为的影响ＥｆｅｃｔｏｎｏｎｃｏｇｅｎｅｓｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｎｄｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｂｅｈａｖｉｏｒｏｆｈｕｍａｎｈｅｐａｔｏｍａｃｅｌｓｂｙＩＧＦ┐Ⅱｒｅｃｅｐｔｏｒａｎｔ...     

疏水性肺表面活性物质蛋白质的提纯及其生物活性研究

采用柱层析方法从人羊水提纯Ｍｒ１７．５×１０￣２（ＳＰＢ）及Ｍｒ６×１０￣３（ＳＰＣ）两种疏水性肺表面活性物质蛋白质，研究其表面活性作用。结果显示：人工合成磷脂与不同量蛋白质配比的肺表面活性物质（ＰＳ）具有不同的肺表面活性作用，人工合成磷脂分别加入ＳＰＢ与ＳＰＣ均能降低ＰＳ表面张力，提高其生物活性，但以联合ＳＰ（ＳＰＢ与ＳＰＣ混合者）效果最佳。人工合成磷脂与ＳＰ的最适比例为１００：２。     

人鼻咽癌癌基因:Ha—ras

本文首次报道了对人鼻咽癌癌基因的研究结果。 人鼻咽癌活检组织DNA经二次体外转染N1H/3T3细胞及软琼脂生长,可得到典型生长的转化细胞灶,注射裸鼠后可形成肿瘤。转化细胞DNA经分子杂交可检测到人的顺序,提示人的转化顺序已进入小鼠纤维细胞内。 将上述具有肿瘤形成能力的30μg转化细胞DNA及其诱发肿瘤DNA分别经限制性内切酶ECoR1,BamHl和HindⅢ酶解后,与已知各种癌基因的~(32)p标记探针杂交,可发现它们具有癌基因Ha-ras的特性,经BamHl酶切后。Ha-ras呈现6.6kb大小的专一条带,经HpaⅡ酶切后呈现0.7kb的条带。其它癌基因如N-ras,ki-ras,Met等都呈阴性。在某些转化细胞中,还可看到Ha-ras杂交片段的长度呈现出多态性,可能反映了转化活性的强弱。     

人野生型p53基因增强9L胶质肉瘤细胞的化疗敏感性

恶性胶质瘤化疗面临二大难题,一是肿瘤化疗药不敏感和耐药,二是化疗的有效剂量同中毒剂量常很接近.副作用大,在杀伤瘤细胞的同时也杀伤正常细胞.人们在寻找特异性杀伤肿瘤药物同时,还试图利用基因工程技术改变肿瘤细胞的药物敏感性,近来的研究发现放疗和化疗可以引起肿瘤细胞凋亡,而是否发生凋亡同肿瘤 p~53基因的状态有关.本实验证实野生型p~53基因(Wt-p~53)能增强9L胶质肉瘤细胞化疗敏感性,钙通道阻滞剂尼莫地平有协同作用.钙通道抑制剂的作用机制还不完全清楚,但有一些细胞的凋亡并无Ca~(2 )的活动.目前认为凋亡的DNA lader是由于细胞内Ca~(2 )、Mg~(2 )依赖性核酸内切酶把DNA切成180-200bp不同倍数的核酸片段形成的.该酶需要 Ca~(2 )激活.肿瘤细胞凋亡是否由Ca~(2 )通道引起,取决于细胞是否存在Ca~(2 )依赖性核     

转染外源HCAP1基因对B淋巴瘤细胞株Raji细胞增殖的作用

目的：HCAP1基因定位于人类染色体17p13.3，此区域在多种肿瘤组织呈杂合性缺失，本研究旨在探讨HCAP1外源基因产物对B淋巴瘤细胞系Raji细胞增殖的作用。 方法: 应用脂质体介导法，将HCAP1基因转染Raji细胞，经G418筛选、获得稳定表达外源HCAP1基因的细胞，用台盼蓝活细胞计数、绘制生长曲线、软琼脂集落培养及BrdU（5溴-2'脱氧尿嘧啶）标记法，观察HCAP1基因产物对Raji细胞增殖的作用。 结果： 与转染空载体的对照细胞比较，稳定表达外源HCAP1基因的细胞生长速度明显减慢，倍增时间明显延长，细胞集落形成数明显减少，BrdU掺入细胞比例降低。 结论： 外源HCAP1基因产物的过表达对Raji细胞的增殖有抑制作用。