介绍一种尿液有形成份保存液

尿液有形成份保存主要采用冷藏及甲苯、甲醛、麝香草酚和6-亚甲基四胺苯甲酸防腐等方法.但经实践,还没有一种能保存所有成份的稳定的防腐剂.我们根据中沃武司法〔检查技术(日)1989;17(8):1108〕配制的尿液保存液,经实验对照验证,该保存液可保存尿液中管形、白细胞、红细胞到4周,其计数及形态均无明显改变,且无细菌和结晶出现。适用于临床标本的送检和教学标本的保存及研究。     

EpCAM抗体偶联纳米磁珠阳性分离实体瘤外周血循环肿瘤细胞方法的建立

目的 建立EpCAM抗体偶联纳米磁珠阳性分离上皮来源的实体瘤外周血CTC的方法(简称"磁珠分离法"),探讨该方法分离CTC的灵敏度和应用意义.方法 用7.5 ml健康志愿者外周血裂解红细胞分别倍比稀释加入5、10、20、50、100个乳腺癌细胞系MCF7、食管癌细胞系KYSE70、胰腺癌细胞系BxPC-3及胃癌细胞系9811P,通过磁珠分离法富集癌细胞,荧光显微镜下检测体外加入癌细胞的回收率.然后,用磁珠分离法富集未治疗的30例食管癌(Ⅰ期+Ⅱ期6例、Ⅲ期+Ⅳ期24例)、35例乳腺癌(Ⅰ期+Ⅱ期15例、Ⅲ期+Ⅳ期20例)、30例胰腺癌(Ⅰ期+Ⅱ期5例、Ⅲ期+Ⅳ期25例)、33例胃癌患者(Ⅰ期+Ⅱ期13例、Ⅲ期+Ⅳ期20例)和30例慢性胃炎及30名健康志愿者的CTC,同时结合IF和HE染色鉴定各组的CTC.另外,用FISH分别检测分析食管癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌患者200个CTC中8号和20号染色体拷贝数水平.结果 用4,6-二眯-2苯吲哚(DAPI)染色食管癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌等4种癌细胞系并加入健康志愿者7.5 ml外周血的组内试验中,荧光显微镜下计数4种癌细胞的组内的平均回收率分别为87%、87%、86%和88%;5种稀释梯度的细胞数在4种癌细胞系的组间的平均回收率分别是88%、85%、87%、88%和87%.在107的外周血白细胞中能富集到1个癌细胞.采用磁珠分离法从食管癌、乳腺癌、胰腺癌及胃癌患者中检出≥2个CTC的阳性率分别为50%(15/30)、63%(22/35)、70%(21/30)及61%(20/33),健康志愿者和炎症患者均未检出CTC.食管癌、乳腺癌、胰腺癌组分别与健康对照组和炎症组比较,经精确概率法分析,差异均有统计学意义(P值均为0.000).80%的食道癌、75%的乳腺癌、65%的胰腺癌和59%的胃癌患者CTC中均发生8号和20号染色体非整倍体改变.结论 建立的磁珠分离法对富集分离实体瘤外周血CTC具有较好的分选灵敏度和准确性.食道癌、乳腺癌、胰腺癌和胃癌患者中的CTC多发生8号和20号染色体非整倍体改变.

Abstract：

Objective To establish an isolation method for solid GTC in peripheral blood using EpCAM antibody-linked nanobeads and evaluate the sensitivity of the method and its application significance. Methods Five, ten, twenty, fifty and one hundred MCF7 (breast cancer), KYSE70 (esophageal cancer), BxPC-3 (pancreatic cancer) and 9811P (stomach cancer) cells were added into 7. 5 ml erythrocyte lysed peripheral blood obtained from healthy volunteers respectively. EpCAM antibodylinked nanobeads were used to enrich cancer cells. The recovery rates of the in vitro added cancer cells were evaluated by fluorescence microscopy. Then, the untreated thirty cases of esophageal cancer (six cases at stage Ⅰ and Ⅱ, twenty-four cases at stage Ⅲ and Ⅳ), thirty-five cases of breast cancer (fifteen cases at stage Ⅰ and Ⅱ , twenty cases at stage Ⅲ and Ⅳ), thirty cases of pancreatic cancer (five cases at stage Ⅰ and Ⅱ , twenty-five cases at stage Ⅲ and Ⅳ), thirty-three gastric cancer (thirteen cases for stage Ⅰ and Ⅱ ,twenty cases at stage Ⅲ and Ⅳ) were enrolled to enrich the peripheral blood CTC. Thirty healthy volunteers and thirty gastritis patients served as two groups of control. Meanwhile the enriched CTC was identified by IF and HE staining. FISH was used to analyze the copy number of chromosome 8 and chromosome 20 in two hundred esophageal cancer, breast cancer, pancreatic caner and gastric cancer CTC. Results After DAPI staining and mixing with 7.5 ml peripheral blood from healthy donors, the average cell recovery rates of KYSE70, MCF7, BxPC-3 and 9811P cells evaluated under fluorescence microscope were 87%, 87%, 86% and 88% (within group), and the recovery rates of 5 gradient dilution levels were 88%, 85%, 87%, 88% and 87% (intergroup). With a high sensitivity, this method was able to isolate one cancer cell in 107 white blood cells of peripheral blood. The positive rates of more than 2 CTC in the peripheral blood detected by this method were 50% (15/30) of esophageal cancer, 63% (22/35) of breast cancer, 70% (21/30) of pancreatic cancer and 61% (20/33) gastric cancer patients respectively,but no CTC was detected in the peripheral blood of healthy volunteers and gastritis patients (P = 0. 000).The aneusomy of chromosome 8 and chromosome 20 were found in 80% esophageal cancer, 75% breast cancer, 65% pancreatic cancer and 59% gastric cancer. Conclusions The CTC isolation technique with EpCAM antibody-linked nanobeads is sensitive and accurate. The aneusomy of chromosome 8 and 20 is frequent in CTC from esophageal cancer, breast cancer, pancreatic cancer and gastric cancer.     

糖脉宁防治糖尿病血管并发症的实验研究

用复方中药制剂糖脉宁2g/kg.d灌胃连续8周,观察其对STZ所致糖尿病大鼠的影响。结果：糖脉宁除具有一定降血糖作用外,还具有降血脂,降低血黏度及血浆ET水平,提高心,肾组织SOD少性,降低LPO水平的作用,并可防止肾组织病理改变发生,结论：糖脉宁对防治糖尿病血管并发症是十分有益的。     

骨髓瘤诊断及预后评估的新标志物-胞外囊泡

胞外囊泡(EVs)是一类由细胞释放到细胞外环境中的具有脂质双层膜结构的囊泡样物质的统称.骨髓瘤(MM)是一种以骨髓中克隆性浆细胞异常增殖为特征的恶性血液系统肿瘤.EVs作为一种细胞间信号交流的媒介,在MM细胞和骨髓微环境之间相互作用,促进了疾病的发生发展.本文介绍了EVs的生物学特性及其对MM患者发生免疫抑制、远处转移...     

严重多发伤141例的急救治疗

随着对多发伤诊治水平的提高,如何提高严重多发伤的急救水平仍在不断探索中。现将我院１９９１～１９９８年对１４１例严重多发伤患者的急救治疗结果报道如下。临床资料一、一般资料本组中男１０４例,女３７例,年龄２～６７岁,平均２９．８岁。致伤原因：交通伤６７例,占４７．５％;坠落伤３６例,占２５．５％;挤压伤１６例,占１１．３％;其他伤２２例,占１５．６％;解剖部位伤处：二处者５１例,占３６．２％;三处者４１例,占２９．１％;四处者４９例,占３４．８％。本组中,以颅脑伤为主的４９例,占３４．８％;胸部伤为…     

基于拉曼光谱和多元统计分析研究血清标本及在冠心病诊断中的应用

目的 探讨显微拉曼共焦系统在冠心病(coronary heart disease,CHD)患者血清诊断中的应用价值。 方法 选取2018年8月—2019年1月在陆军军医大学第一附属医院收集的96份血清样本,包括46例经冠脉造影明确诊断的冠心病组血清和50例体检健康组血清,运用XploRA PLUS全自动显微共焦拉曼系统,测量并分析各标本的血清拉曼光谱特征,并联合多元统计中的正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)等,使用SIMCA-P 14.1分析软件进行统计学处理。 结果 冠心病组和健康组的平均拉曼谱峰形态相似;在位移1 080.47/cm、1 102.01/cm、1 127.52/cm、1 335.46/cm、1 603.83/cm、1 657.69/cm处,冠心病组的振动强度高于健康组;在位移1 154.51/cm、1 516.81/cm处,健康组的振动强度显著高于冠心病组,这些谱峰的变化可能有利于血清拉曼光谱对冠心病的筛查;OPLS-DA模型的R2X(cum)=0.818,R2Y(cum)=0.644,模型的可预测性Q2(cum)=0.497,基于OPLS-DA冠心病组和健康组的AUC分别为0.970和0.970。 结论 显微共焦拉曼系统联合OPLS-DA分析,可对已知冠心病组和健康组血清样本进行快速便捷的区分,作为探索性实验方法,为冠心病的检测诊断提供了一种新的可能。      

血培养阳性病原菌分布及耐药性分析

目的分析血培养阳性病原菌分布及药物敏感性,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法选取2015年1月至2016年12月南京医科大学第一附属医院临床住院和门诊患者送检的血培养标本中分离的1 495株病原菌进行研究,比较主要病原菌分布情况、药物敏感试验情况。结果 1 495例血培养阳性病原菌中,构成比位居前5位的病原菌分别为大肠埃希菌303株(20.27%)、肺炎克雷伯菌205株(13.71%)、金黄色葡萄球菌103株(6.89%)、表皮葡萄球菌80株(5.35%)和鲍曼不动杆菌71株(4.75%);血培养阳性病原菌主要来源于ICU(14.05%)、血液科(13.38%)和感染科(7.96%)等科室;大肠埃希菌对阿米卡星、亚胺培南和美洛培南的敏感率在95.00%左右,对哌拉西林、头孢唑啉、头孢曲松和头孢呋辛的敏感率低于30.00%;肺炎克雷伯氏菌对亚胺培南和美洛培南的敏感率在84.00%左右;金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺仍保持较高的敏感性,而对青霉素和苯唑西林的敏感性很低。鲍曼不动杆菌对阿米卡星、左氧氟沙星和复方磺胺甲噁唑的敏感率分别为66.70%、47.8%和37.10%,对其他药物的敏感率均在30.00%以下。结论定期监测和分析当地患者血培养阳性病原菌种类及药物敏感性,对临床合理使用抗菌药物具有重要指导意义。     

扬州地区2011～2015年脑脊液病原菌分布及药物敏感性分析

目的：监测和分析扬州地区2011～2015年脑脊液细菌培养病原菌分布和耐药性变迁,为临床合理选用抗菌药物提供最新依据。方法采用法国生物梅里埃公司的VITEK 2 Compact全自动微生物仪,对脑脊液标本进行细菌鉴定和药物敏感试验,应用WHONET5．6软件分析分离病原菌的分布及药敏情况。结果2011～2015年的2074例脑脊液细菌培养中共分离出74例细菌（3．57％）,其中位于前3位的分别是鲍曼不动杆菌（21／74,28．38％）、肺炎克雷伯菌（13／74,17．57％）和表皮葡萄球菌（12／74,16．22％）。其中鲍曼不动杆菌对抗菌药物的耐药率极其严重,呈多耐药或泛耐药现象。结论定期监测和分析当地患者脑脊液分离病原菌种类及其耐药性变迁,对指导临床合理使用抗菌药物具有重要意义。     

骨髓间质干细胞下调免疫反应的实验研究

目的：研究骨髓间质干细胞（Mesenchymal stem cells, MSCs）下调免疫反应的作用及其机制.方法：采用流式细胞分析（FCM）鉴定MSCs的纯度,用^3H-TdR掺入法测定MSCs对ConA刺激的淋巴细胞增殖的影响,利用RT-PCR和Real-time PCR检测TGF-β1、IL-8、IL-10的基因表达,同时进行皮肤移植模型研究.结果：MSCs对ConA刺激的淋巴细胞增殖的影响与MSCs和淋巴细胞的比值有关.RT-PCR结果显示MSCs对淋巴细胞分泌TGF-β1无显著性影响,而Real-time PCR的结果显示MSCs促进淋巴细胞分泌IL-10,减少淋巴细胞分泌IL-8.皮肤移植实验显示MSCs能延长异种移植皮肤的存活时间.结论：MSCs能下调免疫反应和抑制皮肤移植排斥反应,其可能的机制是通过促进淋巴细胞分泌IL-10以及减少淋巴细胞分泌IL-8来发挥作用.