逆转录病毒转体介导的人IL—2基因在膀胱肿瘤细胞T24中的表达

报道逆转录病毒载体介导的人白细胞介素－２（ＩＬ－２）ｃＤＮＡ在人源性膀胱肿瘤细胞Ｔ２４中的表述，ＩＬ－２ｃＤＮＡ插入到真核表达载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ中，构建成ＩＬ－２ｃＤＮＡ的表达载体ｐＤＯＲＩＬ２，磷酸钙沉淀法将其导入Ｔ２４细胞中，经Ｇ４１８选择，转染阳性率约为２０％；原位杂交技术检测ＩＬ－２ｃＤＮＡ可转录ＩＬ－２ｍＲＮＡ，细胞培养上汪肿ＩＬ－２活性２４小时每１０＾５细胞为８－３４Ｕ／ｍｌ。表明Ｉ     

逆转录病毒载体介导的人IL－2基因在膀胱肿瘤细胞T_（24）中的表达

报道逆转录病毒载体介导的人白细胞介素－２（ＩＬ－２）ｃＤＮＡ在人源性膀胱肿瘤细胞Ｔ２４中的表述，ＩＬ－２ｃＤＮＡ插入到真核表达载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ中，构建成ＩＬ－２ｃＤＮＡ的表达载体ｐＤＯＲＩＬ－２，磷酸钙沉淀法将其导入Ｔ２４细胞中，经Ｇ４１８选择，转染阳性率约为２０％；原位杂交技术检测ＩＬ－２ｃＤＮＡ可转录ＩＬ－２ｍＲＮＡ，细胞培养上清中ＩＬ－２活性２４小时每１０５细胞为８～３４Ｕ／ｍ１。表明ＩＬ－２基因在Ｔ２４细胞中已表达，为研制膀胱肿瘤转基因瘤苗及开展膀胱肿瘤基因治疗打下了基础。     

人精原干细胞的磁式分选和功能鉴定

目的 :目前对人睾丸内精原干细胞 (SSC)的生物学本质特性尚缺乏深入研究。本研究旨在寻求人SSC的特异性表面标志以及对其进行有效分选和功能鉴定的合理方法。　方法 :应用α6、β1 整合素、Thy 1 (CD90 )和c kit作为人SSC标志 ,利用免疫磁珠分选技术对成人睾丸单细胞悬液进行多参数复合分选 ,并利用流式细胞仪对分选后细胞的光散射特性和DNA倍体特性进行检测 ;将人分选后生殖细胞进行显微注射移植 ,观察人SSC在裸鼠睾丸内克隆形成的数量及其精子发生的可能性 ,对上述分选后人SSC进行功能性评价。　结果 :分选后α+ 6Thy 1 + c kit-和 β+ 1 Thy 1 + c kit-细胞均为大小、形态特征较为均一的细胞亚群 ,分别占分离细胞总数的 2 %～ 3%和 0 .5 %～ 1 %。其光散射特性分析显示均为明显低侧向散射特征。DNA倍体分析显示明显DNA倍体组成改变 ,合成期和四倍体细胞消失 ,仅有单倍体、二倍体和减数分裂期细胞 ,α+ 6Thy 1 + c kit-细胞群中 ,二倍体细胞数提高至该细胞群的5 1 .2 %。功能性评价结果表明 ,分选后α+ 6Thy 1 + c kit-细胞中干细胞浓度富积约 4 0倍 ,β+ 1 Thy 1 + c kit-细胞中干细胞浓度富积约 2 0倍。　结论 :α6,β1 整合素和Thy 1可作为阳性标志用于人SSC的分选。应用上述标志的复合免疫磁珠分?     

肿瘤的转基因治疗

根据转基因治疗肿瘤常用的信息药物、基因置换、基因添加和生产抗瘤疫苗等策略,综述了转基因治疗肿瘤的研究现状,存在问题和展望。     

人白细胞介素—2基因真核表达载体pDORIL—2的构建

构建逆转录病毒载体介导的人白细胞介素－２（ＩＬ－２）基因真核细胞表达载体。方法：合成带有和表达载体克隆位点相匹配酶切位点的聚合酶链式反应（ＰＣＲ）引物，用ＰＣＲ方法从质粒ｐＨＩＧ５３中扩增出人的ＩＬ－２ｃＤＮＡ，将其定向克隆入表达载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ。结果：ＰＣＲ扩增出的ＩＬ－２ｃＤＮＡ片段约４７５ｂｐ，酶切鉴定该片段已被克隆入ｐＤＯＲ－ｎｅｏ的多克隆位点，构建成人ＩＬ－２基因真核表达载体ｐＤＯＲ     

泌尿系肿瘤基因治疗进展

随着分子生物学的发展以及人们在基因水平上对肿瘤发生、发展及生物学行为的深入,不但可在分子水平上作出肿瘤生物学行为的诊断,以指导选择正确的治疗原则,而且近年更是发展了在基因水平上的治疗方法。１９８５年Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ证明了逆转录病毒载体（ＲＶ）在人体进行基因治疗的安全性,并于１９９１年获准用ＲＶ把ＴＮＦ基因转入肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）进行肿瘤的基因治疗,从而揭开了肿瘤基因治疗的序幕。近年来国内外在肿瘤基因治疗领域进行了大量研究,并取得了可喜成果。１　基因转染载体选用合适载体把目的基因转入细胞内…     

T淋巴细胞中核转录因子κB在膀胱肿瘤细胞抑制T淋巴细胞功能中的作用

目的 :了解T淋巴细胞中核转录因子κB在膀胱肿瘤细胞抑制T淋巴细胞功能中的作用。方法 :1 采用免疫组化法检测与膀胱肿瘤细胞EJ、T2 4、正常移行上皮细胞共培养时T淋巴细胞NF κB。 2 用NF κB激动剂、抑制剂调节T淋巴细胞NF κB活性 ,应用免疫组化法、MTT法 ,了解膀胱肿瘤细胞EJ、T2 4作用下NF κB活性与T淋巴细胞功能的相关性。结果 :1 EJ T淋巴细胞组、T2 4 T淋巴细胞组 ,T淋巴细胞胞核染色阳性细胞的百分比与人正常膀胱移行上皮细胞组、空白对照组相比显著降低 (P <0 0 1) ;2 膀胱肿瘤细胞EJ、T2 4作用下T淋巴细胞NF κB胞核染色阳性细胞的百分比与增殖反应 (A值 )呈显著正相关 (Pearson相关系数 =0 74 4 ,P <0 0 0 1,n =6 0 )。结论 :膀胱肿瘤细胞EJ、T2 4可能通过下调NF κB活性抑制T淋巴细胞增殖功能     

超声引导在经皮肾镜治疗肾及输尿管上段结石术中的应用价值探讨

目的评价超声引导在微创经皮肾镜取石术治疗。肾结石和输尿管上段结石中的应用价值：方法451例肾或输尿管上段结石患者,采用超声引导定位下肾穿刺,建立皮肾通道;碎石取石过程中超声监测有无结石残留并指导啐石取石;必要时超声引导下建立多个皮肾通道取石？结果450例患者在超声引导下成功建立了皮肾通道,1例超声引导穿刺失败。超声引导下穿刺成功率为99．8％（450／451）,其中402例患者经超声引导一次性穿刺成功,48例患者两次穿刺成功;82例患者超声引导下建立多个皮肾通道。结论微创经皮肾镜取石术采用超声引导定位穿刺建立皮肾通道,具有定位准确、安全、可重复、简便易行及避免放射线损伤等优点,可作为经皮肾镜引导穿刺的首选方法。     

泌尿外科临床实习带教体会

临床实习是医学生结束理论学习，即将跨人工作岗位的过渡阶段，是理论同实践相结合的第一步，在医学教学中起着承前启后的作用，通过成功的实习，使学生进一步理解巩固大量的理论知识，培养学生的临床思维能力，独立思考与实际工作能力，为成为一名合格医师打下良好的基础。泌尿外科有其自身的特点，内容繁多，概念抽象，专业性强，结合我院泌尿外科近年来的教学工作实践，我们有以下几点体会。