MDR1基因G2677T/C3435T多态性对鼻咽癌放疗疗效的影响

目的探讨多药耐药基因（MDR1）21外显子G2677T和26外显子C3435T多态性对鼻咽癌根治性放疗疗效的影响。方法采用PCR和限制性片断长度多态性（RFLP）对59例鼻咽癌患者行MDR1基因分型,并用测序法验证。结果G2677T GG基因型携带者行根治性放疗的效果优于GT和TT基因型,但差异无显著性;C3435T CC基因型携带者放射敏感性显著强于CT和TT基因型携带者（P=0．026）。结论MDR1基因多态性可作为鼻咽癌患者放射敏感度的遗传学标志。     

原发性肝癌介入治疗结合三维适形放射治疗疗效观察

目的　评价肝动脉化疗栓塞 (TACE)结合三维适形放射治疗 (3DCRT)对原发性肝癌(PHC)的疗效。方法　对 94例不能手术切除的原发性肝癌患者 ,采用先TACE后 3DCRT相结合 ,观察疗效及生存率 ,并以Cox回归模型分析预后因素。 94例中单发病灶 82例 ,多结节病灶 12例。TACE1次者 5 9例 ,1次以上者 35例。放射治疗剂量 4 2～ 5 2Gy者 4 2例 ,5 3～ 6 0Gy者 5 2例。结果　治疗后 3个月、1年的肿瘤局部有效率分别为 90 .4 % (85 / 94 )、83.0 % (78/ 94 ) ;其中前者完全缓解 12例 ,部分缓解 73例 ,稳定 6例 ,进展 3例。 1、2、3年生存率分别为 93.6 %、5 3.8%、2 6 .0 % ,中位生存期 2 5 .0个月。多因素分析结果显示Child分级、临床分期及肿瘤数目对放射治疗后患者生存率的影响具有统计学意义。结论　TACE结合 3DCRT是治疗PHC的有效无创治疗手段。     

蛋白激酶C的下调与KBV200细胞多药耐药性的关系

目的　探讨蛋白激酶C (PKC)在肿瘤多药耐药 (MDR)中的作用。方法　3 2 P掺入法测定PKC的活性 ;Westernblot法检测KBV2 0 0细胞株PKC亚型的表达和亚细胞分布 ;实验组用十字孢碱 (SP)预孵育KBV2 0 0细胞 ;MTT法检测耐药株KBV2 0 0细胞的耐药性。结果　SP可下调膜组分和浆组分的PKC活性及总活性 ;使PKCα膜组分和浆组分的表达均降低 ,PKCβ的膜组分消失 ,浆组分PKCβ的表达稍增强 ,PKCε的膜组分和浆组分表达无变化 ;SP可降低VCR、ADR对KBV2 0 0细胞的IC50 值 (P <0 0 1)。结论　SP使KBV2 0 0细胞耐药性降低 ,可能与下调PKC有关。     

采用国家标准对TEK 5000血细胞分析仪性能评价

目的采用国家行业标准检测及评价TEK5000全自动血细胞分析仪的性能。方法根据《血液学分析仪》标准，并参照美国国家实验室标准化委员会（NCCLS）文件和国际血液学标准化委员会（ICSH）文件要求对常用血液指标进行检测。结果TEK5000全自动血细胞分析仪的测量准确性、重复性和校准功能验证均在允许范围内：线性良好；携带污染率较低；与Sysmex kx-21相比较相关性良好。结论TEK5000全自动血细胞分析仪功能齐全、结果稳定、准确，可参与国内外市场竞争，用于大、中型医院临床标本的全血细胞分析。     

放射性肺损伤大鼠肺组织Bcl-2和Bax表达变化及其意义的探讨

目的:探讨凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax在放射性肺损伤大鼠肺组织中的变化及意义.方法:Wistar大鼠30只随机分为正常对照组(N)、照射组(d1、d7、d14、d28和d56),每组5只.在照射后d1、d7、d14、d28和d56获取标本,采用透射电镜、免疫组化和流式细胞等技术,观察放射性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡的变化及Bcl-2和Bax的表达.结果:放射性肺损伤大鼠肺上皮细胞凋亡增加,照射组Bax在上皮细胞的表达及Bcl-2在间质细胞的表达高于对照组.照射后d7、d14、d28和d56上皮细胞Bax的表达高于对照组,χ2=24.847,P＜0.01;照射后d14和d28间质细胞Bcl-2的表达高于对照组,χ2=20.930,P＜0.01.而Bcl-2在上皮细胞的表达及Bax在间质细胞的表达无明显变化(P＞0.05).表明上皮细胞的Bax/Bcl-2比值上升,而间质细胞的Bax/Bcl-2比值下降.结论:细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的不平衡表达在放射性肺损伤的发病过程中可能起了重要作用.     

mIκBα基因转染肝癌细胞HepG2的放射增敏作用

目的 探讨mIκαBα基因是否增加肝癌细胞的放射敏感性.方法 实验分3组:亲本细胞对照组、nepG2细胞转染Adv组、转染mIκBα基因的Hep G2细胞-Ad mIκBα组.在6 Gy X射线照射前后分别测定3组细胞下列指标:Western blot检测肝癌细胞浆内mIκαBα值;电泳迁移率法测定肝癌细胞核内NF-κB活性;TUNEL染色法测定肝癌细胞凋亡指数.2 Gv放射线照射后的肝癌细胞存活分数和用多靶单击模型确定的Do、Dq值判定肝癌细胞的放射敏感性.结果 放射线照射前,Adv组与Hep G2组细胞浆内mIκBα呈低值,照射后更减低;而细胞核内NF-κB活性照射前为( ),照射后为( ),呈持续激活状态;细胞凋亡指数在照射前分别为1.4、1.6,照射后升高至8.9、11.7.Ad mIκBα组在照射前、后细胞浆内mIκBα均呈高值,均为Adv组的3倍;而细胞核内NF-κB活性在照射前、后均呈阴性;照射前细胞凋亡指数为18.2,照射后升高至88.3.3组中Ad mIκBα组细胞存活分数最低,为0.301;而SER(放射增敏比)最大,为2.099;Do值最小,为1.468.Dq值最小,为0.709.结论 用mIκBα基因转染肝癌细胞Hep G2,可抑制肝癌细胞内NF-κB的抗凋亡活性.增强肝癌细胞的放射敏感性.     

放疗联合抗VEGF抗体对肝癌移植瘤血管形成因子影响的实验观察

目的:探讨放疗联合抗血管内皮生长因子(VEGF)抗体抑制肝癌移植瘤血管形成因子的抑制作用。方法:SMMC-7721人肝癌细胞种植于裸鼠右后肢皮下,成瘤动物随机分为5组,每组5只。抗VEGF抗体50μg腹腔注射,隔日1次,共6次。第4次给药后放疗,6MeV电子线,剂量率4Gy/min。给药结束后2周处死动物,免疫组化检测肿瘤标本VEGF、缺氧诱生因子1α(HIF-1α)和基质金属蛋白酶2(MMP-2),并检测凋亡指数。结果:肝癌移植瘤VEGF中至强阳性表达,HIF-1α也表达中至强阳性,MMP-2弱至中阳性表达。抗VEGF抗体与放疗结合抑制VEGF和HIF-1α表达(P=0.002,P=0.013),放疗或抗体对MMP-2表达的影响差异无统计学意义,P=0.339。放疗和抗VEGF抗体均能诱导肿瘤细胞凋亡,凋亡指数13.62&#177;1.70和14.38&#177;2.70,高于对照组5.18&#177;0.85,P=0.000,放疗和抗VEGF抗体联合的凋亡指数高于单一治疗组,P=0.000。结论:放疗与抗VEGF抗体协同抑制肝癌移植瘤血管形成因子,放疗与抗血管形成剂联合应用是肝癌综合治疗的有效途径。     

治疗期间营养状况对鼻咽癌预后的影响

目的:探讨鼻咽癌患者在治疗过程中营养状况对疗效的影响.方法:收集南方医院2003年10月至2005年10月,资料完整的191例鼻咽癌初治患者的临床及随访资料,全部病例均接受根治性放疗,根据治疗期间营养状况分为两组(对照组和营养不良组),采用单因素和多因素方法分析营养状况与预后的关系.结果:鼻咽癌患者治疗期间营养不良发生率较高,占49.7%(95/191).单因素分析显示,对照组Ⅰ～Ⅱ期鼻咽癌患者3年生存率、无远处转移生存率和无局部复发生存率均高于营养不良组,但无统计学意义;而对照组Ⅲ～Ⅳ期鼻咽癌患者的3年生存率、无远处转移生存率显著高于营养不良组,差异有统计学意义(P＜0.05).多因素分析显示,营养状况是Ⅲ～Ⅳ期鼻咽癌患者生存率的独立预后因素.结论:营养不良是影响鼻咽癌患者预后的不良因素之一;合理的营养干预应作为鼻咽癌惠者总的治疗计划中的重要部分.     

miR-20a通过靶向抑制PTEN诱导肝癌细胞放射抵抗

目的 探讨miR-20a在肝癌放射敏感性中的作用及机制。方法 荧光定量PCR检测肝癌细胞系和组织标本中miR-20a的表达;构建稳定过表达miR-20a肝癌细胞系,通过克隆实验探讨miR-20a对肝癌细胞放射敏感性影响;蛋白印记法检测Bcl-2、Caspase-3以及γ-H2AX的表达;生物信息学预测miR-20a下游调控的靶基因,双荧光素酶报告系统、荧光定量PCR及蛋白印记法进一步验证;在稳定过表达miR-20a的肝癌细胞系中转染pCDNA3.0-PTEN探讨细胞放射敏感性的变化,明确PTEN是否为miR-20a诱导肝癌放射抵抗的一个功能性靶基因。结果 miR-20a在肝癌细胞系和组织标本中表达上调(P<0.05);经过同等条件的放射处理后,与空白及对照组(WT组、LV-con组)相比,过表达miR-20a组(LV-miR-20a组)细胞存活分数升高,放射抵抗增强(P<0.05),Bcl-2表达上调,Caspase-3及γ-H2AX表达下调;过表达PTEN能够逆转miR-20a引起的放射抵抗。结论 miR-20a在肝癌细胞系及组织标本中表达上调;过表达miR-20a可以促进肝癌细胞放射抵抗,PTEN是miR-20a诱导肝癌放射抵抗的一个功能性靶基因,预示着miR-20a/PTEN位点可能是是肝癌临床放疗相关的有效分子靶点。     

辐射干预下细胞增殖能力检测方法探讨

[摘要] 目的 本研究旨在探讨MTT法、WST-1法、克隆形成法和3H掺入法检测细胞辐射敏感性的差异,为辐射敏感性检测方法选择提供实验依据。方法 选择人正常肝细胞L02、人肝癌细胞HepG2、人肺腺癌细胞SPC-A-1三种细胞系,6MV X线以0,1,2,3,4,6,8 Gy辐射细胞,分别用4种方法来检测细胞增殖情况,检测其不同剂量点细胞存活分数,统计分析4种方法所得存活分数的相关性。结果 在≤3 Gy剂量范围内,超出该剂量范围,相关性差。经直线回归分析,克隆形成法与3H掺入法之间有很好的相关性,MTT法、WST-1法与克隆形成法、3H掺入法之间无很好的相关性。WST-1法和MTT法相比无更好的相关性。结论 平板克隆形成法和3H掺入法能准确测定细胞的辐射敏感性,MTT法和WST-1法可提供参考,无法替代克隆形成法和3H掺入法。 [关键词]MTT法;WST-1法;克隆形成法; 3H掺入法;放射治疗