特发性血小板减少性紫癜患者外周血共刺激分子的表达及与血小板抗体关系的临床研究

本研究检测特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者外周血共刺激分子CD80、CD86和CD137的表达及血清血小板抗体（PAIgG）含量并探讨二者相关性及与血小板数量等疾病表现的关系,以期阐明共刺激分子在特发性血小板减少性紫癜发病及病情判断中的作用。分别应用免疫荧光法和流式细胞术检测48例ITP患者及40名正常人外周血单个核细胞（PBMNC）表面共刺激分子CD80、CD86和CD137的表达;应用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清PAIgG含量。结果表明：ITP患者CD80、CD86和CD137的表达水平分别为（4．92±2．02）％,（8．68±4．25）％,（5．32±2．67）％,PAIgG平均含量为210±3．02ng／10^7PA,均明显高于正常对照组（2．01±0．75）％,（4．56±2．06）％,（1．37±1．25）％和20±1．13ng／10^7 PA（p〈0．01）。共刺激分子表达水平与PAIgG含量呈正相关（r=0．302,P〈0．05）,与患者血小板数量呈负相关（r=-0．369,P〈0．05）。结论：共刺激分子CD80、CD86和CD137是参与ITP发病和免疫反应的重要共刺激分子,其过度表达与ITP发病及临床病情密切相关。纠正其异常表达、调节免疫状态可能是ITP的治疗策略之一,具有重要的临床研究意义。     

系统性红斑狼疮凝血象的变化

目的 :探讨系统性红斑狼疮 ( SL E)患者血凝象改变及免疫吸附治疗对 SL E凝血象的影响 ,为临床治疗提供依据。方法 :用 ACL 2 0 0型全自动血凝分析仪测定凝血及纤溶 ,用发色底物法测组织型纤溶酶激活物 ( t-PA)和纤溶酶激活物抑制物 ( PAI-1 )。结果 :SLE患者 FIB、PT、APTT、TT、AT- 出现多种组合形式异常 ;t-PA及 PAI-1活性均增强 ,治疗后 SLE患者部分 APTT恢复正常 ,AT- 活性升高。结论 :综合检测 SLE血凝指标 ,可指导治疗。     

吲哚胺2,3-二氧化酶在人急性单核细胞白血病(M5)和急性淋巴细胞白血病细胞中的表达及其抑制剂1-甲基色氨酸的治疗作用

本研究旨在探讨吲哚胺2,3-二氧化酶（IDO）在白血病细胞中的表达和作用。应用间接免疫荧光染色光法检测人急性单核细胞白血病（M5）和急性淋巴细胞白血病（ALL）的细胞内吲哚胺2,3-二氧化酶的表达情况,并以小鼠急性淋巴细胞白血病细胞系L1210建立白血病小鼠模型以观察吲哚胺2,3-二氧化酶抑制剂1-甲基色氨酸是否具有抑制白血病细胞生长的作用。结果表明：M5和ALL的白血病细胞中吲哚胺2,3-二氧化酶阳性细胞率分别为29.4±11.2%和24.7±7.96%,而对照组的外周血单个核细胞中吲哚胺2,3-二氧化酶阳性细胞率仅为3±1.2%;两个白血病组与正常对照组在吲哚胺2,3-二氧化酶阳性细胞率方面的差异均有显著的统计学意义（P〈0.05）,而M5与ALL组之间在吲哚胺2,3-二氧化酶阳性细胞率方面无显著性差异（P〉0.05）;1-甲基色氨酸（1-MT）治疗的白血病小鼠与对照组比较,肿瘤消退,生存期延长（P〈0.05）,部分治疗小鼠达到无病长期生存（注射肿瘤细胞后生存期超过3个月）。结论：人急性单核细胞白血病（M5）和急性淋巴细胞白血病（ALL）的细胞均表达吲哚胺2,3-二氧化酶,1-甲基色氨酸对白血病小鼠有一定的治疗作用。     

马利兰﹢氟达拉滨预处理异基因造血干细胞移植治疗白血病的临床研究

目的：探讨马利兰﹢氟达拉滨（ Bu/Flu）预处理方案异基因造血干细胞移植治疗白血病的临床疗效。方法：30例患者中,急性淋巴细胞白血病（ ALL）12例,急性髓系白血病（ AML）12例,其中1例为MDS转化,慢性粒细胞白血病（ CML）6例;其中急性白血病未缓解或复发状态下移植6例,CML加速期患者1例。供者干细胞为G-CSF动员后采集的HLA配型全相合或一个位点不合的同胞（21例）或非血缘（9例）外周血造血干细胞,有1例成人ALL患者接受HLA 配型相合的双份脐带血移植。预处理方案包括：注射用马利兰3.2mg/（kg·d）×3-4d,氟达拉滨30mg/（m2·d）×4-6d,同胞不全相合和非血缘移植患者加用兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白（ATG）2.5mg/（kg·d）×3d。输注外周血单个核细胞数7.73（0.36-16.0）×108/kg,CD34﹢造血干细胞数3.26（0.77-17.6）×106/kg。用环孢素﹢短疗程甲氨喋呤或环孢素﹢吗替麦考酚酯预防移植物抗宿主病（ GVHD）。采用DNA短串联重复序列多态性（ STR）分析方法鉴定供者干细胞植入情况。结果：29例患者重建造血,检测外周血白细胞STR-DNA证实均为100％完全供者植入,1例非血缘全相合患者未植入于短期内死亡外,其余患者为完全供者型,植入率为96.7％。血缘相关HSCT和非血缘相关HSCT白细胞植活的中位时间分别为11（8-17）d和13（9-15）d;血小板植活的中位时间分别为13（7-22）d和14（8-25）d。出现急性GVHD 14例,占46.7％,其中I-II度10例（33.3％）,III-IV度者4例（13.3％）;6例发生慢性局限性GVHD,发生率为20.0％。随访1-66个月（中位时间20个月）,总体生存率（ OS）为63.3％,无事件生存率（ DFS）为51.7％。结论：Bu/Flu预处理方案移植治疗白血病相关并发症轻,有很好耐受性和较好疗效,是值得推广应用的预处理方案。     

MEAD方案治疗难治复发性成年人急性淋巴细胞白血病

 目的　观察MEAD化疗方案治疗难治复发性成年人急性淋巴细胞白血病（ALL）的疗效和安全性。方法　对 2006年6月至2009年6月收治的22例成年人难治复发性ALL患者,采用MEAD方案化疗,米托蒽醌6 mg／d静脉滴注,第1天至第3天;阿糖胞苷100 mg／d静脉滴注,第1天至第5天;依托泊苷100 mg／d静脉滴注,第1天至第5天;地塞米松10 mg／d静脉滴注,第1天至第8天。结果　成年人难治复发性ALL完全缓解率31.8 %,部分缓解率22.7 %,总有效率 54.5 %;两次MEAD方案化疗后,累积完全缓解率为50.0 %,部分缓解率40.9 %。主要不良反应为不同程度的骨髓抑制,重要脏器毒性反应轻微。结论　MEAD化疗方案对难治复发性成年人ALL有较好的疗效。患者不良反应轻微。     

基于临床路径的案例教学法在血液学临床教学中的评价

目的 探讨以临床路径为基础的案例教学法在血液病学临床教学中的效果。方法 将50名临床医学本科生分成两组,实验组在教学过程中加入急性早幼粒细胞白血病(Acute Promyelocytic Leukemia,APL)临床路径作为教学工具,采用基于临床路径的案例教学法,对照组采用传统教学法。实习结束后进行口头考试,同时使用问卷调查学生对教学的满意度。结果 两组在APL”诊断标准及鉴别诊断”、“必须完成的实验室检查项目”“初治患者的诱导缓解治疗”三方面差异有统计学意义(P＜0.05),实验组得分优于对照组;两组间关于APL“需要重点询问的病史要点”“完全缓解患者的巩固治疗和维持治疗”“中枢神经白血病(CNSL)的防治”三个方面差异无统计学意义(P＞0.05)。且除过“医患沟通能力”一项,实验组对教学方法的满意度均高于对照组。结论 在血液病学临床教学引入基于临床路径的案例教学法,有利于规范教学流程,能充分调动学生学习的主动性,可在实践教学中应用推广。     

新型共刺激分子CD137抗白血病作用的体外研究

本研究探讨新型共刺激分子CD137（4—1BB）在人T淋巴细胞上的表达特点及其单克隆抗体hCD137mAb在刺激T淋巴细胞增殖、促进细胞因子分泌、增强细胞杀伤作用的抗白血病功能。应用FACS及间接免疫荧光法分别检测正常人T淋巴细胞上加入植物血凝素（PHA）前后不同时相CD137的表达。在HL-60细胞和T淋巴细胞体外培养体系中,用MTT比色法测定hCD137mAb、PHA对T淋巴细胞增殖作用的影响,用FACS及间接免疫荧光法检测其对T细胞表面上IFN-1和IL-4分泌水平的影响。在体外混合淋巴细胞肿瘤细胞培养（MLTC）体系中,研究不同效靶比例时hCD137mAb增强T细胞杀伤白血病细胞的抗白血病作用。结果表明：①T细胞未经PHA刺激几乎不表达hCD137,经PHA活化后开始表达,且随着时间延长表达率逐渐增高,第7天为高峰（FACS法为56．4％±1．98％,间接免疫荧光法为52．8％±2．01％）。②MTT法检测提示,单独使用hCD137mAb不能刺激T细胞增殖（增殖指数1．002±0．011）,但其与PHA伍用可增强后者刺激活性（增殖指数2．161±0．102）约2倍（增殖指数4．705±0．133）。⑧在PHA存在时,hcD137mAb可使IFN-γ在T细胞上表达增加到大约2倍,而对IL-4几无影响。④hCD137mAb明显增强T细胞对白血病细胞株HL-60的杀伤活性,且共刺激活性在40：1效靶比时最强,杀伤百分比增加到大约2倍。结论：新型共刺激分子CD137具有显著的抗白血病作用,应用hCD137mAb是一种有效排斥白血病的免疫策略,且安全、简便,本研究为其用于临床免疫治疗提供了实验依据。     

不同时期应用细胞瘤苗对红白血病荷瘤小鼠抗瘤作用的研究

目的：探讨不同时间应用细菌瘤苗对红细胞病荷瘤小鼠的抗瘤作用。方法：在不同时间内应用瘤苗免疫治疗红白血病荷瘤小鼠，观察小鼠生存期，皮下肿瘤大小及肿瘤，注射部位病理变化。结果：3天，7天瘤苗治疗的小鼠生存期延长，皮下肿瘤生长缓慢，病理可见瘤组织坏死及大量以单个核细胞为主的炎细胞浸润，与PBS组及10天瘤苗组相比，有显著性差异。结论：3天，7天瘤苗比10天瘤苗组抗肿瘤作用强。     

MEAD方案治疗难治复发性成年人急性淋巴细胞白血病

目的 观察MEAD化疗方案治疗难治复发性成年人急性淋巴细胞白血病(ALL)的疗效和安全性.方法 对2006年6月至2009年6月收治的22例成年人难治复发性ALL患者,采用MEAD方案化疗,米托蒽醌6 mg/d静脉滴注,第1天至第3天;阿糖胞苷100 mg/d静脉滴注,第1天至第5天;依托泊苷100mg/d静脉滴注,第1天至第5天;地塞米松10mg/d静脉滴注,第1天至第8天.结果 成年人难治复发性ALL完全缓解率31.8%.部分缓解率22.7%,总有效率54.5%;两次MEAD方案化疗后,累积完全缓解率为50.0%,部分缓解率40.9%.主要不良反应为不同程度的骨髓抑制,重要脏器毒性反应轻微.结论 MEAD化疗方案对难治复发性成年人ALL有较好的疗效.患者不良反应轻微.     

特发性血小板减少性紫癜患者红细胞免疫功能的研究

用红细胞酶联免疫吸附试验测定红细胞免疫粘附功能,结果显示,红细胞免疫粘附活性、红细胞膜免疫复合物含量均降低,抑制因子显著升高,促进因子降低,且红细胞免疫粘附活性降低与血小板数的减少呈正相关。提示特发性血小板减少性紫癜患者发病机理中存在着红细胞免疫功能缺陷,因此在治疗上应考虑应用免疫调节剂来全面纠正免疫功能紊乱,且红细胞免疫粘附功能可作为临床上判断病情的依据之一。