人胰岛素瘤相关蛋白-2基因的克隆及原核表达研究

目的：克隆1型糖尿病自身抗原人胰岛素瘤相关蛋白-2(IA-2)的编码基因，并从大肠杆菌中表达具有免疫原性的人IA-2重组蛋白。方法：抽提胎脑总RNA，通过RT—PCR获得编码IA-2胞内结构域的cDNA，与Pinpoint Xa-IT质粒相连接，构建表达型重组质粒，经转化、筛选并鉴定后，从大肠杆菌诱导表达生物素酰化融合蛋白，进而用亲和层析纯化之，以dot—blot鉴定其免疫原性。结果：重组质粒转化的大肠杆菌经IPTG诱导表达及亲和层析后得到了纯度较高、分子量约为59kd的融合蛋白，表达产物用dot—blot证明具有免疫原性。结论：原核表达的生物素酰化人IA-2胞内段融合蛋白具有正确的免疫学构象。     

LC术中穿线结扎法行胆囊部分切除的体会

腹腔镜胆囊切除术（Laparoscopic choleeysteetomy,LC）已经取代开腹胆囊切除术而成为胆囊切除的手术金标准。我院对LC术中胆囊三角分离困难的病例将胆囊管丝线结扎后行胆囊部分切除,拓宽了手术适应证,并发症较少,取得了较好的效果。现报告如下。     

创伤后急性阑尾炎25例诊治分析

阑尾炎为腹部外科常见病、多发病，但创伤后急性阑尾炎临床上较为少见。本院1991年1月～2003年6月收治创伤后急性阑尾炎25例。现报告如下。     

脐部穿刺孔盲目穿刺致肝圆韧带气肿6例报告

我科在行腹腔镜腹部手术时,第一个脐部穿刺孔采用单人盲穿的方法,均能顺利穿刺成功,但其中6例发生了肝圆韧带气肿,现报告如下.     

微型腹腔镜下自制缝合针行小儿腹股沟斜疝高位结扎术

我院自2001年3月至2005年1月，用自制缝合针，行疝囊高位结扎术治疗小儿腹股沟斜疝68例，取得良好的效果，现报告如下。     

胃癌组织中Toll样受体4/9的表达与肿瘤病理分期和转移的相关性

目的:探讨Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)4和TLR9在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:收集2009年1月至2009年10月在解放军第174医院手术切除的42例胃癌及其癌旁(距癌灶边缘5 cm)组织标本。RT-PCR和Western blotting检测胃癌组织中TLR4、TLR9在mRNA和蛋白水平的表达。结果:胃癌组织中TLR4和TLR9 mRNA表达高于癌旁组织(1.29±0.03 vs 0.53±0.02,0.99±0.04 vs 0.22±0.05;均P<0.05),Ⅲ期+Ⅳ期胃癌组织中TLR4和TLR9mRNA表达显著高于Ⅰ期+Ⅱ期(P<0.05),有远处转移的胃癌组织中TLR4和TLR9 mRNA表达显著高于无远处转移者(P<0.05);TLR4和TLR9 mRNA的表达水平与患者的年龄、性别、淋巴结转移没有相关性。胃癌组织中TLR4和TLR9蛋白的表达高于癌旁组织(1.36±0.05 vs 0.48±0.04,1.12±0.05 vs 0.34±0.03;均P<0.05),Ⅲ期+Ⅳ期胃癌组织TLR4和TLR9蛋白的表达显著高于Ⅰ期+Ⅱ期(P<0.05)。结论:TLR4和TLR9在胃癌组织中高表达,其表达与胃癌分期、远处转移具有相关性,表明TLR4和TLR9可能参与了胃癌的发生和发展,可能为胃癌的治疗提供一种潜在的靶点。     

海上伤员救治的组织与实施

通过组织多次海上卫勤保障训练,总结了海上伤员救治的特点,提出了海上伤员救治的组织与实施方案,强调了海上伤员救治需要把握的有关问题,为海上伤员救治的系统化和规范化提供了有益的经验和方法。     

下肢深静脉血栓非手术治疗体会

深静脉血栓形成（deep venous thrombosis,DVT）是指血液在深静脉腔内不正常凝结导致静脉回流障碍,从而引起一系列临床症状,以下肢深静脉血栓形成最为常见,因其存在严重并发症而倍受临床重视[1]。其治疗主要分为手术治疗和非手术治疗,我院从2006年10月至2007年11月采用非手术治疗71例下肢深静脉血栓形成,取得满意疗效,现总结报告如下。     

siRNA沉默Bmi-1基因对人肝癌细胞株MHCC97-H侵袭迁移能力的影响

目的:探讨RNA干扰技术沉默Bmi-1基因表达后,对人肝癌细胞株MHCC97-H侵袭迁移能力的影响.方法:设计并合成针对Bmi-1基因序列特异性的双链小干扰RNA(Bmi-1-siRNA),转染高转移性人肝癌细胞株MHCC97-H,用流式细胞仪观察转染效率,荧光实时定量PCR和Westernblot检测Bmi-1基因的mRNA和蛋白表达水平;通过体外Transwell小室基质侵袭和迁移实验,观察Bmi-1表达沉默后对人肝癌细胞株MHCC97-H侵袭和迁移能力的影响.结果:将针对Bmi-1基因序列特异性的小干扰RNA(Bmi-1-siRNA)转染高转移性人肝癌细胞株MHCC97-H后,流式细胞仪显示,转染效率可达到91%.与空白组、对照siRNA组相比,实验组Bmi-1-siRNA能有效抑制MHCC97-H细胞中Bmi-1基因的mRNA(F=56.199,P<0.05)和蛋白表达水平.通过Transwell小室基质侵袭和迁移实验,我们分析了不同组细胞的侵袭迁移能力.结果发现,与空白组、对照siRNA组相比,Bmi-1-siRNA转染的MHCC97-H细胞穿透能力明显降低(F=186.66,12.746,P<0....     

儿童和青少年垂体瘤的诊断和治疗

儿童和青少年垂体瘤的诊断和治疗陈战（滨州地区人民医院，滨州市２５６６１０）儿童和青少年垂体瘤占所有需要手术的垂体瘤的３．６％～６％［１，２］，对比以往的病例报道［３］及回顾分析［４］都有不同的描述。如同成人垂体瘤，儿童和青少年的垂体瘤临床表现多样化。...