组蛋白乙酰化酶p300和CREB结合蛋白在小鼠胚胎心发育中的时序表达

目的:探讨p300和CREB结合蛋白(CBP)在小鼠胚胎心发育过程中的时序表达规律.方法:选取胎龄7.5～18 d、出生1 d、3月小鼠正常心,采用免疫组织化学法观察p300和CBP在小鼠胎心发育中的表达分布及变化规律.结果:p300在胚胎心发育各个时期及出生1 d和3月成年鼠的心各部分均有很强表达.CBP在E7.5不表达;在E8.5～E9.5的心管中较强表达;E10.5～E16.5及E18和生后1 d心肌较强表达,房室瓣和小梁网较弱表达,室间隔肌部弱表达而膜部几乎不表达;3月成年鼠心肌和小梁较弱表达,室间隔极弱表达.结论:p300对发育早期的生心细胞诱导特化和中期的室间隔形成作用较CBP更大.     

冷饮食品的卫生状况调查分析

<正> 我们于1995年4月～9月对桂林铁路辖区内冷饮生产经营单位生产的冷饮(冷食和饮料)进行了卫生状况调查分析,结果如下。1 样品来源和评价方法1.1 样品来源1.1.1 抽检样品:每月对冷饮生产单位生产的冷食、饮料以无菌操作、随机抽样的方法进行采样,置于无菌容器内,立即带回实验室检验。1.1.2 自检样品:5个冷饮生产厂家合办一个检验室,聘请合格的检验员对产品进行检验,每周对生产的产品检验1次。1.2 检验项目 微生物指标。细菌总数和大肠菌群。1.3 检验方法 按照国家《食品卫生微生物检验方法》进行检     

小鼠胚胎心脏发育过程中组蛋白乙酰化酶亚型p300调控心脏特异转录因子的动态表达

目的:观察小鼠胚胎心脏发育过程中GATA4、Nkx2.5、MEF2C、Tbx5基因的动态表达和这些基因的启动子区域组蛋白H3乙酰化修饰状态的变化,以及组蛋白乙酰化酶亚型p300对这些基因启动子的直接调控作用,为进一步研究先天性心脏疾病的发生机制奠定基础.方法:选取胎龄(Embryo day,E)10.5d和16.5d小鼠正常胚胎心脏,用实时荧光定量PCR(Real Time PCR)的方法观察上述基因mRNA的动态表达;采用染色质免疫沉淀技术(Chromatin immunoprecipitation,ChIP),用ChIP级抗乙酰化H3和抗p300抗体免疫沉淀与其所结合的DNA,采用Real Time PCR扩增抗体所富集的上述基因启动子的DNA量,观察胚胎心脏发育过程中乙酰化组蛋白及组蛋白乙酰化酶亚型p300是否参与调控上述四种心脏特异转录因子的表达.结果:①胎龄E10.5d和E16.5d小鼠胚胎心脏的GATA4、Nkx2.5、MEF2C、Tbx5基因的mRNA表达水平都有明显差异(P<0.05),其中GATA4和MEF2C mRNA相对β-actin的表达水平,E10.5明显低于E16.5,而Nkx2.5和Tbx5 mRNA相对表达水平,E10.5明显高于E16.5;并且ChIP结果显示这些基因启动子的乙酰化水平也随着时间而改变,但差异无统计学意义.②E10.5和E16.5胚胎小鼠心脏中,p300抗体均能免疫沉淀GATA4、Nkx2.5、MEF2C、Tbx5基因启动子,其沉淀的基因量在这两个小鼠心脏发育的关键时间点有所不同,但差异无统计学意义.结论:小鼠胚胎心脏发育过程中,心脏发育相关基因GATA4、Nkx2.5、MEF2C、Tbx5呈现动态表达,提示这些基因在心脏发育不同阶段具有重要作用.ChIP结果提示p300介导的组蛋白乙酰化修饰可能为调节这些基因动态表达的机制之一.     

滇产毛喉鞘蕊花提取成分对缓激肽诱导豚鼠肺微血管渗漏的影响

目的 建立豚鼠肺微血管渗漏损伤模型,从动物水平上研究从滇产毛喉鞘蕊花提取的有效部位(CF-E,异佛司可林类似物的混合物)对微血管渗漏的影响,对其抗急性肺损伤(ALI)作用机理进行初步探讨.方法 静脉注射缓激肽诱导豚鼠肺微血管渗漏,然后静脉注射伊文思蓝(EB),通过测定肺组织中渗漏的EB含量,反映微血管渗漏程度.灌胃给予豚鼠CF-E,观察受试验品对微血管渗漏的影响.结果 缓激肽模型组的肺组织EB含量明显增加,证明缓激肽造成了豚鼠肺微血管渗漏反应;而CF-E低、中、高剂量组(50、100、200mg/kg)肺组织中EB含量显著低于模型组(P<0.01、P<0.05),显示CF-E对缓激肽造成的豚鼠微血管渗漏具有保护作用.结论 CF-E可明显降低缓激肽诱导的豚鼠肺微血管渗漏反应,提示其通过抑制肺微血管渗漏,抑制肺水肿,从而具有ALI作用.     

先天性圆锥动脉干畸形超声形态学诊断进展

圆锥动脉干畸形 (ｃｏｎｏｔｒｕｎｃａｌｄｅ ｆｅｃｔｓ ,ＣＴＤ)是与圆锥动脉干胚胎发育异常相关的一类复杂先天性心脏畸形 ,包括法洛四联症、大动脉转位、右室双出口及永存动脉干等 ,约占青紫型先心病的 70 % ,近半数可死于婴儿期。采用超声心动图对ＣＴＤ病变心脏的结构形     

p300特异性siRNA载体的构建及其对心肌细胞GATA4表达的影响

目的 构建并筛选小鼠p300特异性siRNA载体,并观察p300表达降低对心脏特异性转录因子的调控作用,为进一步研究p300介导的组蛋白乙酰化失衡对心脏发育的影响奠定基础.方法 针对小鼠p300基因的保守序列区域设计并构建3个重组质粒p300 RNAi1,p300 RNAi2和p300 RNAi3.利用阳离子脂质体将其分别转染入体外培养的乳鼠心肌细胞,分别利用RT-PCR和免疫荧光从mRNA和蛋白水平检测p300表达,判断抑制效率,并检测心脏特异性转录因子GATA4的表达水平.结果 pSOS-HUS组和p300 RNAi2组中p300 mRNA水平表达较正常对照组无明显降低,而p300 RNAi1组和p300 RNAi3组中p300 mRNA表达量较正常组有明显降低(分别为0.220 8±0.020 0,0.170 8±0.040 0,vs 0.509 5±0.030 0),且差别有统计学意义(P<0.05),抑制率分别为56.7%和66.5%.转染p300RNAi1组和转染p300RNAi3组的GATA4 mRNA表达水平(分别为0.423 1±0.110 0,0.262 7±0.080 0)明显低于正常组(0.856 4±0.070 0)和阴性对照组(0.841 5±0.040 0),差别有统计学意义(P<0.05).结论 p300特异性siRNA 质粒载体构建成功,p300 RNAi1和p300 RNAi3具有确切阻断p300蛋白表达的作用,并下调GATA4的表达.     

武进市0～4个月婴儿母乳喂养情况分析

为进一步确保母乳喂养的成功,探讨母乳喂养情况及影响因素,从而采取相关措施,笔者对本市创建爱婴医院以来０～４个月母乳喂养情况分析如下：１调查对象及方法１１调查对象１９９６年１０月１日至１９９７年９月３０日武进市所辖范围内０～４个月的婴儿。１２调查方...     

榆黄膏外敷治烫伤

笔者业医近40年，用自拟“榆黄青”外敷治水火烫伤，经临床观察疗效颇佳，现报告如下。1一般资料用输黄膏外敷治烫伤嗯例，其中男性对例，女性对例；最大年龄68岁，最小年龄12岁。上肢烫伤11例，下肢烫伤36例；面部火灼伤1·例。烫伤时间最长3天。2治疗方法方药组成：生地榆、生大黄各100g，菜籽油适量。药物配制：将生地榆、生大黄研制成极细末，贮瓶备用；菜籽油用锅煎熬，待油沫散尽后收存。配制时视烫伤创面大小接1：l取用上药与菜籽油适量调成糊状即可，直观配现用。用法：将创面用淡盐水清洗，取榆黄膏外敷。若在夏秋季节，创面周围有…     

心脏TTO三维超声成像影响因素的实验研究

目的探索心脏多平面经胸(TTO)三维超声检查优化方案。方法选择影响TTO检查的采样角度间隔、后处理、对比度、图像增益、能量、频率融合及余辉等7个因素 ,各因素下设三个水平 ,按正交试验设计 (L1837)对12只离体猪心进行TTO采样 ,并以三维重建效率为考核指标 ,评价各因素各水平的重要性。结果各因素对三维重建效率均起到一定的作用 ,其中采样角度间隔所起作用最大。按各因素平均极差值大小排序 ,各因素最大值分别位于 :采样角度间隔3°及设置能量0、后处理D、余辉0、频率融合F3、图像增益90、对比度20。采用上述方案能在较短时间内获得较理想的心脏TTO三维超声检查。结论探索合理的TTO三维超声检查方法 ,有利于促进该技术在心脏病诊断中的应用。